1、基础分子生物学复习题及参考问题详解根底分子生物学复习题与参考答案一、填空题1.核酸分子中糖环与碱基之间为型的糖苷键，核苷与核苷之间通过磷酸二酯键连接成多聚体。2.DNA变性后，紫外吸收增加 ，粘度下降 ，浮力密度升高，生物活性丧失。3.DNA双螺旋直径为 2 nm，每隔nm上升一圈，相当于10个碱基对。4.Z-DNA为左手螺旋。5.hn-RNA是真核生物mRNA的前体。6.用Sanger的链末端终止法测定DNA一级结构时，链终止剂是双脱氧核苷三磷酸。7.维系DNA双螺旋结构稳定的力主要有氢键和碱基堆积力。8.在碱性条件下，核糖核酸比脱氧核糖核酸更容易降解，其原因是因为核糖核酸的每个核苷酸上-O
2、H的缘故。9.DNA复制时，连续合成的链称为 前导 链；不连续合成的链称为 随从链。10.DNA合成的原料是 四种脱氧核糖核苷三磷酸 ；复制中所需要的引物是RNA 。11.DNA合成时，先由引物酶合成 RNA引物 ，再由 DNA聚合酶在其3端合成DNA链，然后由 DNA聚合酶切除引物并填补空隙，最后由 DNA连接酶 连接成完整的链。12.细菌的DNA连接酶以NAD为能量来源，动物细胞和T4噬菌体的DNA连接酶以ATP为能源。13.大肠杆菌RNA聚合酶的全酶由2组成，其核心酶的组成为2。14.RNA转录过程中识别转录启动子的是因子，协助识别转录终止部位的是因子。15.真核细胞mRNA合成后的成熟
3、过程包括 戴帽 、 加尾 、 剪接、 甲基化修饰 。16.遗传信息由RNA传递到DNA的过程称为逆转录，由逆转录酶催化。17.反密码子第 1 位碱基和密码子第 3 碱基的配对允许有一定的摆动，称为变偶性。18.在原核细胞翻译起始时，小亚基16SrRNA的3端与mRNA5端的 SD序列 之间互补配对，确定读码框架，fMet-tRNAf占据核糖体的 P位点 位置。19.细胞多肽链合成的方向是从 N 端到 C 端，而阅读mRNA的方向是从 5端到 3端。20.在形成氨酰- tRNA时，由氨基酸的 羧 基与tRNA3末端的 羟 基形成酯键。为保证蛋白质合成的正确性，氨酰tRNA合成酶除了对特定氨基酸有
4、很强的 专一性 之外，还能将“错误氨基酸从氨酰化-tRNA复合物上 水解 下来。21.转肽酶催化生成的化学键是 肽键 ，该酶还具有 酯酶 活性。22.肽链延伸包括：进位、 成肽 、和 移位 。23.翻译延长阶段的进位，是指 氨酰- tRNA进入 A 位。翻译延长阶段的转位是指mRNA与 核糖体 做相对运动。24.体大多数蛋白质形成正确的构象需要 分子伴侣 的帮助，某些蛋白质的折叠还需要 二硫键 互换酶和 脯氨酰肽酰 异构酶的催化。25.正调控和负调控是基因表达的两种最根本的调节形式，其中原核细胞常用负调控模式，而真核细胞常用正调控模式。26.在原核细胞中，由同一调控区控制的一群功能相关的结构基
5、因组成一个基因表达调控单位，称为启动子，其调控区包括启动基因和操纵基因。27.有些基因的表达较少受环境的影响，在一个生物体的几乎所有细胞中持续表达，因此被称为管家基因；另有一些基因表达极易受环境的影响，在特定环境信号刺激下，相应的基因被激活，基因表达产物增加，这种基因是可诱导的基因，相反，如果基因对环境信号应答时被抑制，这种基因是可阻遏的基因。28.在基因重组技术中，切割DNA用限制性核酸切酶，连接DNA用DNA连接酶 。29.除噬菌体外，质粒和病毒也是分子克隆的常用载体。30.用动物病毒DNA改造的基因载体有腺病毒载体和反转录病载体。用于植物基因工程的常用载体是Ti质粒。31.将重组质粒导入
6、细菌称转化，将噬菌体DNA转入细菌称转导。32.Southern印迹法、Northern印迹法和Western印迹法是分别用于研究 DNA、RNA和蛋白质转移和鉴定的几种常规技术。二、选择题1.有关核酸的杂交 A,C,DA.DNA变性的方法常用加热和碱变性 C.不同来源的核酸复性时，假如全部或局部碱基互补就可以杂交D.杂交可以发生在DNA与DNA之间，RNA与DNA，RNA与RNA之间2.DNA的复性速度与以下哪些有关EA.温度 B.分子的重复序列 C.pH D.变性DNA的起始浓度E.以上全部3.某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%，如此胞嘧啶的含量应为(D)A15%B30% C40% D35
7、% E70%4.DNA变性是指(D)A分子中磷酸二酯键断裂 B多核苷酸链解聚CDNA分子由超螺旋双螺旋 D互补碱基之间氢键断裂EDNA分子中碱基丢失5.寡聚dT-纤维素柱层析用于(D)A. 从总DNA中别离纯化质粒DNA B. 从总核蛋白中别离DNPC. 除去杂蛋白 D. 从总RNA中纯化mRNA6.关于双螺旋结构学说的表示哪一项为哪一项错误的(C)A.由两条反向平行的脱氧多核苷酸链组成 B.碱基在螺旋两侧，磷酸与脱氧核糖在外围C.两条链间的碱基配对非常严格，A与T间形成三个氢键，G与C间形成两个氢键D.碱基对平面垂直于中心轴，碱基对之间的作用力为德华力7.如下关于双链DNA碱基含量关系，哪一
8、个是错误的(B)AA=T，G=C BA+T=G+C CA+G=C+T DA+C=G+T8.如下是几种DNA分子的碱基组成比例。哪一种的Tm值最高(A)AA+T=15% BG+C=25% CG+C=40% DA+T=80%9DNA复制时，如下哪一种酶是不需要的(E)ADNA指导的DNA聚合酶 BDNA连接酶 C拓朴异构酶 D解链酶 E限制性切酶10.DNA复制中的引物是(C)A由DNA为模板合成的DNA片段 B由RNA为模板合成的RNA片段 C由DNA为模板合成的RNA片段 D由RNA为模板合成的RNA片段 E引物仍存在于复制完成的DNA链中11.DNA复制时，子链的合成是(C)3，另一条链35
9、 B两条链均为35C两条链均为53 D两条链均为连续合成 E两条链均为不连续合成E.coli细胞中DNA聚合酶的作用主要是(C)A. DNA复制 B合成的起始 C. 切除RNA引物 D. 冈崎片段的连接13.需要DNA连接酶参与的过程有(A)ADNA复制BDNA体外重组CDNA损伤的切除修复 DRNA逆转录14.DNA损伤的光修复作用是一种高度专一的修复方式，它只作用于紫外线引起的(A)A.嘧啶二聚体 B. 嘌呤二聚体 C.RNA聚合酶催化合成的是(B)A18SRNA BmRNA CtRNA D5SRNA ErRNA16.转录指如下哪一过程(B)A. 以RNA为模板合成DNA B. 以DNA为
10、模板合成RNA C. 以RNA为模板合成蛋白质 D. 以DNA为模板合成DNA17.hnRNA是(B)A.存在于细胞核的tRNA前体 B.存在于细胞核的mRNA前体 18.基因有两条链,与mRNA序列一样(T代替U)的链叫做(A)A. 有义链B. 反义链C. 重链 D. cDNA链19.如下关于逆转录酶的表示哪一个是错误的(D)A.它以RNA为模板指导DNA的合成 B.它也可以DNA为模板指导DNA的合成 20.多肽链的氨基酸序列取决于(D)AtRNA B. 18S rRNA C. 28S rRNA DmRNA E. 氨基酰-mRNA合成酶21.密码GGC的对应反密码子是AAGCC B. CC
11、G C. CCC D. CGC E. GGC22.关于密码子，错误的表示是(C)A每一密码子代表一种氨基酸 B. 某些密码子不代表氨基酸C一种氨基酸只有一种密码子 D. 甲硫氨酸只有一种密码子E. 密码子有种族特异性 23.一个N端为丙氨酸的20肽，其开放的阅读框架至少应该由多少个核苷酸残基组成？(C)A60个 B. 63个 C. 66个 D. 57个 E. 69个 tRNA中，tRNA与氨基酸的结合键是(E)A盐键 B. 磷酸二酯键 C. 肽键 D. 糖苷键 E. 酯键25.原核生物和真核生物翻译起始不同之处(B)A真核生物的Shine-Dalgarno序列使mRNA与核糖体结合B真核生物帽
12、子结合蛋白是翻译起始因子之一 CIF 比eIF种类多D原核生物和真核生物使用不同起始密码E原核生物有TATAAT作为翻译起始序列，真核生物如此是TATA26.关于核蛋白体转肽酶，错误的表示是(C)A转肽不需要GTP B. 转肽不需要ATP C活性中心在小亚基 D. 活性中心在大亚基 E活性中心与rRNA有关27.一个氨基酸参入多肽链，需要(B)A两个ATP分子 B一个ATP分子，两个GTP分子C一个ATP分子，一个GTP分子 D两个ATP分子，一个GTP分子E两个GTP分子28.信号肽段的作用是(C)A指导DNA合成的启动 B指导多肽链糖基化 C引导多肽进入质网 D指导RNA合成的启动 E指导
13、蛋白质合成的启动29.多肽链合成后，其Ser可(B)A乙酰化 B糖基化 C磷酸化 D甲基化 E硫酸化30.蛋白质合成后加工不包括(D)A蛋白质的磷酸化 B信号肽的切除 C蛋白质的糖基化D酶的构像变化 E蛋白质的乙酰化31.以下哪一种抑制剂只能抑制真核生物的蛋白质合成(C)A氯霉素 B. 红霉素 C放线菌酮 D嘌呤霉素 E四环素32一个操纵子通常含有BE两个启动序列和数个编码基因33有关操纵子学说的论述，正确的答案是BC.操纵子调控系统由调节基因、操纵基因、启动子和结构基因组成D.诱导物与阻遏蛋白结合启动转录 34转录因子是C35阻遏蛋白阻抑蛋白识别操纵子中的CA.启动基因 B.结构基因 C.操
14、纵基因 D.含子 E.调节基因 36.在如下哪种情况下，乳糖操纵子的转录活性最高AA.高乳糖，低葡萄糖 B.高乳糖，高葡萄糖 C.低乳糖，低葡萄糖37.顺式作用元件是指E和3侧翼序列和338.反式作用因子是指EA.具有激活功能的调节蛋白 B.具有抑制功能的调节蛋白 C.对自身基因具有激活功能的调节蛋白 D.对另一基因具有激活功能的调节蛋白 39.如下关于限制性切酶的表示哪一项为哪一项错误的CA.它能识别DNA特定的碱基顺序，并在特定的位点切断DNAB.切割点附近的碱基顺序一般呈回文结构 D.是重组DNA的重要工具酶 40.基因工程中，不常用到的酶是C41如下哪项不能作为表达载体导入真核细胞的方
15、法？D42.重组体的筛选方法有A43.cDNA是指DA.在体合成的与病毒DNA或RNA互补的DNA 44建cDNA文库时，首先需别离细胞的C三、三、判断题()1.生物体，天然存在的DNA分子多为负超螺旋。()2.RNA分子可以发生热变性，并有增色效应。()3.水分子可以插入天然DNA分子双螺旋空隙中。()4.从结构基因中的DNA序列可以推出相应的蛋白质序列。()5.提高盐浓度可使DNA分子的熔点Tm升高。()6.RNA的局部螺旋区中，两条链之间的方向也是反向平行的。()细胞和真核细胞中都是由DNA聚合酶切除RNA引物。()8.逆转录酶催化RNA指导的DNA合成不需要RNA引物。()9.RNA病
16、毒不含DNA基因组，根据中心法如此它必须先进展反转录，才能复制和增殖。()10.原核细胞和真核细胞的RNA聚合酶都能够直接识别启动子。()11.大肠杆菌染色体DNA由两条链组成，其中一条链充当模板链，另外一条链充当编码链。()12由于遗传密码的通用性，用原核生物表达真核基因不存在技术障碍。表达出的蛋白质通常是有功能的。()1tRNA合成酶可以通过合成反响的逆反响切除误载的氨基酸。()1-羟基上。()15.在核糖体上形成肽链所需的能量，由水解GTP来提供。()16.生物合成蛋白质时，A 位的氨基酸转移到P位，使P位的肽链延长，A 位空载的-tRNA随后便脱落。()17.蛋白质能够折叠成何种三维结
17、构，主要是由分子伴侣决定的。()18.高等真核生物的大局部DNA是不为蛋白质编码的。()19.大多数管家基因编码低丰度的mRNA.()20.乳糖可以诱导乳糖操纵子的表达，所以乳糖对乳糖操纵子的调控属于正调控系统。()21.某些蛋白质既可以作为阻遏蛋白又可以作为激活蛋白参与基因表达的调控。()22.准备用原核生物表达真核基因时，最好通过cDNA获取目的基因。()23.用原核生物表达真核生物的糖蛋白，其表达产物不会有正常的生物学功能。()24.Ti质粒可以随土壤农杆菌进入植物细胞。()2噬菌体作克隆载体时，外源DNA片断越小，克隆的成功率越高。()26.基因克隆选择的宿主细胞必须无限制性核酸切酶。
18、()27.采用蓝白斑选择法时，蓝色菌落或噬菌斑是含有重组载体的克隆。()28假如1个氨基酸有3个遗传密码，如此这3个遗传密码的前两个核苷酸通常是一样的。四、名词解释每题2分，共20分1.增色效应(hyperchromic effect)； 核酸从双链变为单链的无规如此卷曲状态时，在260nm处的吸光度增加，称 “增色效应。2.分子杂交molecular hybridization； 不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可以复性，形成新的双螺旋结构。这种按照互补碱基配对而使不完全互补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。3. 聚合酶链式反响PCR
19、； 聚合酶链式反响PCR是扩增样品中的DNA量和富集众多DNA分子中的一个特定的DNA序列的一种技术。在该反响中，使用与目的DNA序列互补的寡核苷酸作为引物，进展多轮的DNA合成。其中包括DNA变性，引物退火和在Tap DNA聚合酶催化下的DNA合成。4. DNA的变性与复性denaturation and renaturation of DNA； DNA的变性是指DNA双螺旋区的氢键断裂，变成单链并不涉与共价键的断裂。DNA的复性是指变性DNA在适当条件下，又可使两条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构。5. Tm； 通常把加热变性DNA使增色效应达到最大增量一半时的的温度称为该DNA的熔点或
20、熔解温度，用Tm表示。6. 含子与外显子含子是指结构基因中存在于外显子之间的非编码序列，也是基因中不表达的序列，属插入序列。外显子是指基因中编码蛋白质的序列。7.半保存复制； DNA复制的一种方式。每条链都可用作合成互补链的模板，合成出两分子的双链DNA，每个分子都是由一条亲代链和一条新合成的链组成。8.冈崎片段； 相比照拟短的DNA链大约1000核苷酸残基，是在DNA的滞后链的不连续合成期间生成的片段，这是Reiji Okazaki在DNA合成实验中添加放射性的脱氧核苷酸前体观察到的。9.复制体； 一种多蛋白复合体，包含DNA聚合酶，引发酶，解旋酶，单链结合蛋白和其它辅助因子。复制体位于每个
21、复制叉处，进展染色体DNA复制的聚合反响。10.编码链； 双链DNA中，不能进展转录的那一条DNA链，其核苷酸序列与转录生成的RNA的序列一致在RNA中是以U取代了DNA中的T。11.含子； 在转录后的加工中，从最初的转录产物除去的部的核苷酸序列。术语含子也指DNA中编码相应RNA的区域。12.外显子exon既存在于最初的转录产物中，也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。术语外显子也指DNA中编码相应RNA的区域。13.遗传密码； DNA编码链或mRNA上的核苷酸，以3个为一组三联体决定1个氨基酸的种类，称为三联体密码。mRNA的三联体密码是连续排列的，因此，mRNA的核苷酸序列可以决定蛋白
22、质的一级结构。14.摆动假说； mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子相互辩认，大多数情况是遵从碱基配对规律的。但也可出现不严格的配对，这种现象就是遗传密码的摆动性，tRNA分子上有相当多的稀有碱基，例如次黄嘌呤inosine,I常出现于三联体反密码子的5端第一位，它和mRNA密码子第3位的A、C、U都可以配对。15.SD序列； 位于mRNA分子AUG起始密码子上游约813个核苷酸处，由46个核苷酸组成的富含嘌呤的序列，以-AG-GA-为核心。SD序列同16S rRNA近3-末端的序列互补，在核糖体与mRNA的结合过程中起重要作用。16.信号肽； 是未成熟的分泌性蛋白质中可被细胞转运系统识别
23、的特征性氨基酸序列。有碱性N-末端区、疏水核心区与加工区三个区段。蛋白质被转运到细胞的一定部位后，信号肽即被切除。是由1个mRNA分子与一定数目的单个核糖体结合而成的串珠状排列。每个核糖体可以独立完成一条肽链的合成，所以多个核糖体上可以同时进展多条肽链的合成，可以加速蛋白质的合成速度，提高模板mRNA的利用率。18.操纵子； 原核生物的几个功能相关的结构基因往往排列在一起，转录生成一个mRNA，然后分别翻译成几种不同的蛋白质。这些蛋白可能是催化某一代过程的酶，或共同完成某种功能。这些结构基因与其上游的启动子，操纵基因共同构成转录单位，称操纵子。19.启动子； 是RNA聚合酶结合位点周围的一组转
24、录控制组件，包括至少一个转录起始点。在真核基因中增强子和启动子常交织覆盖或连续。有时，将结构密切联系而无法区分的启动子、增强子样结构统称启动子。20.增强子； 是一种能够提高转录效率的顺式调控元件，最早是在SV40病毒中发现的长约200bp的一段DNA，可使旁侧的基因转录提高100倍，其后在多种真核生物，甚至在原核生物中都发现了增强子。增强子通常占100200bp长度，也和启动子一样由假如干组件构成，根本核心组件常为812bp，可以单拷贝或多拷贝串连形式存在。21.衰减子； 在原核生物的Trp操纵子结构中，第一个结构基因与启动子P之间有一个区域含Trp密码子，称衰减子。当环境中Trp浓度很高时
25、，它可通过编码并翻译，使正在转录的mRNA形成终止信号，从而终止Trp操纵子的表达。这种转录衰减实质上是转录与一个前导肽翻译过程的偶联，它是原核生物特有的一种基因调控机制。22.反式作用因子； 大多数真核转录调节因子由某一基因表达后，通过与特异的顺式作用元件相互作用DNA-蛋白质相互作用，或通过与基它调节因子的相互作用蛋白质-蛋白质相互作用，反式激活另一基因的转录，故称反式作用蛋白或反式作用因子。23.顺式调控元件：指可影响自身基因表达活性的真核DNA序列。根据顺式作用元件在基因中的位置、转录激活作用的性质与发挥作用的方式，分为启动子、增强子与沉默子等。24.降解物基因活化蛋白；也就是cAMP
26、受体蛋白cAMP receptor protein,CRP，它与cAMP的复合物可以促进某些原核操纵子如乳糖操纵子的转录。25.克隆技术； “克隆作为名词指一样的分子或细胞构成的群体，或一个共同的祖先通过无性繁殖所得到的群体，作为动词指获取“克隆的过程。克隆技术特指获取“克隆的过程，包括分子克隆，细胞克隆等技术。26.限制性核酸切酶； 就是识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸切酶。限制性核酸切酶存在于细菌体，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制、修饰体系，限制外源DNA，保护自身DNA，对保持细菌遗传物质的稳定具有重要意义。限制性核酸切酶分为三类，其中的类酶能特
27、异性在一定的核苷酸序列处切割双链DNA，因而在基因工程中得到广泛的应用。27.基因组DNA文库； 利用限制性核酸切酶将染色体DNA切割成一定大小的片段，将这些片段分子与适当的克隆载体拼接成重组DNA分子，继而转入受体菌，使每个细菌都携带一种重组DNA分子。不同细菌中的重组DNA分子可能包含不同的染色体DNA片段，这样，只要得到的转化细菌所携带的重组DNA分子种类足够多，如此全部转化细菌所携带的各种染色体片段就代表了染色体的整个基因组。存在于转化细菌，由克隆载体所携带的所有基因组DNA片段的集合称基因组DNA文库。基因组DNA文库涵盖了基因组的全部基因信息。28. cDNA文库以mRNA为模板，
28、经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，如此每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一局部表达，而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因表达的种类和强度也不尽一样，所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多，能够比拟容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。另外，对真核细胞来说，从基因组DNA文库获得的基因与从cDNA文库获得的不同，基因组DNA文库所含的是带有含子和外显子的基因组基因，而从c
29、DNA文库中获得的是已经过剪接，去除了含子的cDNA。一般来说，从cDNA文库获得的基因，因不含含子而片段较小，更适合于用作基因工程的目的基因。由于原核生物不存在将hnRNA加工成mRNA的酶系统，假如用原核生物表达真核基因，如此目的基因一定要通过cDNA获取。五、分析计算题B-DNA的结构特征。1两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕形成右手螺旋；2嘌呤和嘧啶碱位于双螺旋的侧，磷酸和核糖在外侧，彼此通过3，5磷酸二酯键相连接，形成DNA分子的骨架。碱基平面和纵轴垂直，糖环的平面如此和纵轴平行；3双螺旋的平均直径为2nm，两个相邻的碱基对之间相距的高度，碱基堆积距离为0.34nm，两个
30、核苷酸之间的夹角为36度；4两条核苷酸链依靠彼此碱基之间形成的氢键相联系而结合在一起；5碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制。Tm？影响Tm大小的因素有哪些？在实验中如何计算Tm值？DNA的变性从开始解链到完全解链，是在一个相当窄的温度围完成的，在这一围，紫外线吸收值的增加量达到最大增加量的50%时的温度为DNA的解链温度溶解温度，melting temperature,Tm。Tm值大小主要与GC含量有关，GC含量越高，Tm值越大；另外核酸分子越大，Tm值也越大，溶液pH值大于11.3，核酸完全变性，小于5.0如此核酸容易脱嘌呤。降低溶液的离子强度会使Tm值下降，尿素等变性剂也会使Tm值下降。在实验中，Tm值计算公式：Tm=69.3+0.41(G+C%),小于20bp的寡核苷酸：Tm=4G+C+2A+T。3.如果人体有1014个细胞，每个体细胞的DNA含量为6.4109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少？是太阳-地球之间距离2.2109公里的多少倍？双链DNA每1000个核苷酸重110-18g，求人体的DNA的总质量。每个体细胞的DNA的总长度为：6.41090.34nm = 2.176109，3.人体所有体细胞的DNA的总长度为
