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    尿液化学检查.ppt

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    尿液化学检查.ppt

    1、尿液化学检验,尿液酸碱度测定 尿液蛋白质检验 尿液糖测定检验 尿中酮体的检验 尿液胆色素检验 尿亚硝酸盐检验 尿血红蛋白检验,尿肌红蛋白检验 尿本周蛋白检验 T-H蛋白检验 尿液蛋白电泳 尿液脂质检验 尿酶的检验 尿液HCG检验,尿液酸碱度测定,测定方法 指示剂法、试带法、滴定法、pH计法参考值 晨 尿:pH 5.56.5,平均pH 6.0 随机尿:pH 4.58.0 可滴定酸度:20-40 mmol/24尿,生理性变化:食物的影响 进餐后尿pH碱潮 生理活动及药物的影响,临床意义,病理变化:尿pH(酸性尿):代谢性酸中毒、发热、低血钾性碱中毒、DM、痛风等 尿pH(碱性尿):碱中毒、呕吐、尿

    2、路感染、肾小管性酸中毒等,尿蛋白质检查,主要内容:尿蛋白的形成原因和机制 尿蛋白测定方法 尿蛋白检测的临床意义,正常人肾小球滤液中每日排出的蛋白质在克,但大部分被重吸收,终尿中蛋白质为30 130 mg/24h,随机尿中为0 80 mg/L,尿蛋白定性试验阴性蛋白尿(proteinuria):当尿液中蛋白质含量大于150 mg/24h或大于100 mg/L时,尿蛋白定性试验阳性,尿蛋白组成,低分子量蛋白:分子量小于4万,包括免疫球蛋白Fc片段、微球蛋白、游离轻链等,含量极少。中分子量蛋白:分子量49万,以白蛋白为主的血浆蛋白组成,占尿蛋白总数的1/22/3。高分子量蛋白:分子量9万以上,包括

    3、T-H糖蛋白、粘液蛋白、分泌型 IgA 等,含量较少。,蛋白尿形成原因及机制,肾小球性蛋白尿 肾小管性蛋白尿 混合性蛋白尿 溢出性蛋白尿 组织性蛋白尿 偶然性蛋白尿 生理性性蛋白尿,肾小球性蛋白尿(glomerular proteinuria),肾小球因受到感染、毒素、免疫等因素的损伤后,引起肾小球毛细血管壁通透性增加,滤出较多的血浆蛋白,超过了肾小管的重吸收能力所致。,滤过膜的物理空间构型改变孔径增大唾液酸减少或消失电荷屏障减少,机 制,特 征,以白蛋白为主(70%80%)尿蛋白含量常大于2g/24h主要见于:肾小球肾炎、糖尿病肾病、SLE等,蛋白尿的选择性,1960年Blainly提出蛋白

    4、尿选择性的概念,作为判断肾小球损伤严重程度的指标 选择性蛋白尿(selective proteinuria)非选择性蛋白尿(non-selective proteinuria),选择性蛋白尿,损伤较轻,主要成分为白蛋白、抗凝血酶、转铁蛋白等,以及少量小分子量蛋白G/A 3.5g/24h时,称为肾病性蛋白尿肾病综合征,非选择性蛋白尿,损伤较重,大及中分子量蛋白同时存在,预后较差G/A0.5,尿蛋白1+4+,0.5 3.0g/24h见于原发/继发性肾小球疾病、糖尿病肾病等,选择性蛋白尿指数(selective proteinuria index,SPI),尿IgG/血清IgG 尿Alb/血清Alb

    5、SPI 0.2,选择性差SPI 0.1,选择性好G/A比值可粗略判断选择性,肾小管性蛋白尿(tubular proteinuria),由于炎症或中毒引起近曲小管对低分子量蛋白的重吸收功能减退而出现以低分子量蛋白为主的蛋白尿,称为肾小管性蛋白尿。以1-M、2-M、溶菌酶、RNA酶等增多为主,特 征,白蛋白正常或轻度增加尿蛋白 2g/24h,1+2+见于:肾盂肾炎、间质性肾炎、肾小管性酸中毒、中毒性肾间质损伤(中毒性肾病)、应用中草药、器官移植排斥反应,混合性蛋白尿(mixed proteinuria),肾脏疾病同时或相继累及肾小球和肾小管,以低分子量的2-M和中分子量的白蛋白为主,溢出性蛋白尿(

    6、overflow proteinuria),血循环出现大量中低分子量为主的蛋白,超过肾小管重吸收能力而出现于尿中。尿蛋白1+2+,1.0 2.0g/24h,临床意义:浆细胞病 急性血管内溶血 急性骨骼肌损伤及大面积心梗 急性白血病、严重胰腺炎等,肾组织细胞代谢、破坏及分泌所产生的蛋白主要为T-H糖蛋白,组织性蛋白尿(histic proteinuria),尿液中混入多量血、脓、粘液或生殖系统排泌物等导致尿蛋白定性阳性,又称假性蛋白尿见于:泌尿道的炎症、出血及生殖系统排泄物污染,偶然性蛋白尿(accidental proteinuria),功能性蛋白尿:机体在剧烈运动、发热、低温刺激、精神紧张、

    7、交感神经兴奋等所致暂时性、轻度的蛋白尿。1+或 0.5 g/24h,多见于青少年。体位性蛋白尿:直立性体位或腰部前突引起的蛋白尿。卧床时尿蛋白阴性,直立或活动时2+3+。,生理性蛋白尿(physiological proteinuria),尿蛋白的检测,定性 定量,尿蛋白的定性,试带法(reagent strip method)利用pH指示剂的蛋白误差原理 操作简便,快速,适用于人群健康普查,只对白蛋白敏感,加热乙酸法(heat and acetic acid method)加热煮沸使蛋白质变性、凝固,加酸至尿蛋白质等电点(pH4.7),促使变性蛋白下沉特异性强,干扰因素少,但加酸过多/少均可

    8、使阳性程度减弱,敏感性较低,0.15 g/L左右,磺基水杨酸法(sulfosalicylic acid method,SSA)在略低于蛋白质等电点下的酸性环境中,蛋白质带正电荷的氨基能与带负电荷的磺基水杨酸根结合,形成不溶性蛋白质盐而沉淀操作简便,反应灵敏,结果显示快,0.05 0.1 g/L,是检测尿蛋白的参考方法和确证试验,比浊法 比色法:双缩脲比色法 经典方法 染料结合法 免疫法 电泳法,尿蛋白的定量,参 考 值,定性试验:阴性 定量试验:0.1 g/L或0.15 g/24 h,临床意义,生理性蛋白尿病理性蛋白尿,生理性蛋白尿,功能性蛋白尿 体位性蛋白尿 摄入性蛋白尿 偶然性蛋白尿 老年

    9、性蛋白尿 妊娠性蛋白尿,病理性蛋白尿,肾前性蛋白尿 本-周蛋白、血/肌红蛋白、溶菌酶等。常见于浆细胞病、血管内溶血(PNH)、大面积肌肉损伤、酶类增高,肾性蛋白尿肾小球性蛋白尿:见于肾病综合症、原发/继发性肾小球疾病肾小管性蛋白尿:见于肾小管间质病变、重金属中毒、药物中毒、器官移植,肾后性蛋白尿 肾脏以下泌尿生殖系统炎症、结石、结核、肿瘤、泌尿系邻近器官疾病等,尿糖检查,尿中糖来源于血中葡萄糖;原尿中的糖几乎全部被肾小管重吸收;正常人尿中可有微量葡萄糖(2.8mmol/24h),定性检测为阴性尿糖定性阳性,即为糖尿(glucosuria)尿糖一般指葡萄糖,偶尔可见乳糖、半乳糖、果糖、戊糖等,尿

    10、糖的形成,葡萄糖代谢异常使血糖升高,超过肾糖阈血糖正常,肾糖阈降低 影响因素:血糖浓度 肾血流量 肾糖阈(renal threshold of sugar),肾糖阈,将尿液中开始出现葡萄糖时的血浆葡萄糖水平称为肾糖阈反映近端肾小管上皮细胞重吸收葡萄糖的能力,当血糖 8.88 mmol/L时,尿中开始出现葡萄糖,且随着血糖浓度增高,尿糖含量也增高,检测方法,糖还原试验(班氏法,Benedict)原理:葡萄糖含醛基,在热碱溶液中将2价铜(蓝色)还原成低价的氧化亚铜(棕红色沉淀),生成氢氧化亚铜易受其它糖或还原物质的干扰,特异性差,葡萄糖氧化酶试纸法原理:利用葡萄糖氧化酶与葡萄糖反应生成H2O2,在

    11、过氧化酶的催化下,使供氢体显色特异性强,灵敏度高,简便快速,用于尿化学分析仪,薄层层析法(thin layer chromatogaphy)特异敏感,操作复杂,参考值,定性试验:阴性定量试验:0.56 5.0 mmol/24 h,临床意义,血糖增高性糖尿(hyperglycemic glycosuria)摄入性 应激性 代谢性:糖尿病 内分泌性:甲亢、垂体前叶功能亢进、嗜铬细胞 瘤、Cushing综合征等,血糖正常性糖尿(normoglycemic glycosuria),又称肾性糖尿(renal glycosuria):出现糖尿的原因是由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力减低,即肾糖阈减低所

    12、致的糖尿见于:家族性或获得性肾性糖尿、新生儿糖尿、妊娠期或哺乳期妇女等,其他糖尿:乳糖尿、半乳糖尿、果糖尿等,尿酮体检验(urine ketone bodies,KET),酮体组成:乙酰乙酸(20%)-羟丁酸(78%)丙 酮(2%),正常人血浆中酮体2.0 4.0 mg/L,尿中酮体极少,定性试验(-)在饥饿,各种原因引起糖代谢发生障碍,脂肪分解增加及糖尿病酸中毒时,因产生酮体速度大于组织利用速度,可出现酮血症(50mg/L),继而产生酮尿(ketonuria),检测方法,试带法亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物是目前最常用的尿酮体筛检方法,简易快速、敏感各种试带对丙酮

    13、和乙酰乙酸灵敏度不一,湿化学法Rothera 法:亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物Gerhardt 法:三价铁离子与乙酰乙酸的稀醇式基团螯合,生成酒红色复合物。只与乙酰乙酸反应,片剂法:亚硝基铁氰化钠法,质量控制:因细菌在体内外可导致乙酰乙酸丢失,室温保存丙酮易丢失,应密闭冷藏,参考值,定性:阴性 定量:丙 酮:170420 mg/L 乙酰乙酸 20 mg/L,临床意义,糖尿病酮症酸中毒:早期诊断 非糖尿病酮症 中毒 服用双胍类降糖药,尿液胆红素检验,胆红素(bilirubin)组成:未结合胆红素(UCB)结合胆红素(CB)-胆红素,测定方法,重氮法:在强酸性条件下,

    14、CB与2,4-二氯苯胺重氮盐起偶联反应而呈(紫)红色可用于尿自动化分析仪,作定性筛检试验 尿液pH较低时可引起假阳性反应VitC 浓度过高或亚硝酸盐存在时可引起假阴性反应,氧化法:胆红素氧化可生成胆绿素,呈绿色Smith碘环法:简单,灵敏度低Harrison法:胆红素与氯化钡反应,形成钡盐沉淀吸附胆红素,滴加酸性FeCl3,胆红素氧化为胆绿素灵敏度较高,操作复杂,参考值,定性:阴性 胆红素在阳光照射下易转变为胆绿素,检测时使用新鲜尿液标本,避光,注意药物的干扰,临床意义,主要用于黄疸的诊断和黄疸类型的鉴别诊断 胆汁淤积性黄疸 肝细胞性黄疸 溶血性黄疸 先天性高胆红素血症,尿胆原及尿胆素检查,尿

    15、胆原(urobilinogen,UBG)胆红素氧化而来,大部分进入肠肝循环,一部分进入血液由尿中排出,一部分随粪便排出体外;碱性尿液UBG水平增高,酸性尿液UBG水平减低尿胆素:由尿胆原氧化(空气、光照)形成,检测方法,UBG:Ehrlich法:与对-二甲氨基苯甲醛反应,生成樱红色试带法:原理同上,注意问题,尿液必须新鲜,久置氧化为尿胆素,呈假阴性反应尿胆原含量受饮水影响大,留餐后2h尿可靠,尿内磺胺等药干扰测定尿内含胆红素,加入等量氯化钡,除去胆红素,取上清夜试验,尿胆素 湿化学Schleisinger法在尿液之中加碘液,在加饱和乙酸锌,观察绿色荧光(尿胆素-锌复合物)当UBG阴性时,可做尿

    16、胆素检查检查UBG或尿胆素时,应去除尿胆红素,以免干扰,参考值,UBG 定性:阴性 定量:男性0.30 3.55 umol/L 女性0 2.64 umol/L尿胆素:阴性,临床意义,综合分析血清胆红素、尿胆红素、尿胆原和尿胆素,用于黄疸的诊断和鉴别诊断 溶血性黄疸 肝细胞性黄疸 阻塞性黄疸,尿亚硝酸盐检验,尿中细菌增殖且尿液在膀胱中存留足够长时间,含有硝酸盐还原酶的病菌将硝酸盐还原为亚硝酸盐,尿亚硝酸盐试验阳性结果的三个条件:尿液中的致病菌须含有硝酸盐还原酶体内有适量硝酸盐的存在尿液在膀胱内有足够的停留时间(4h以上),检测方法 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸形成重氮盐,再与-萘胺结合形成红色偶氮化合

    17、物参考值:阴性 作为泌尿系感染的过筛试验,阴性不能排除感染,尿血红蛋白检查,正常人血浆中仅含微量血红蛋白(20 50 mg/L),不能从尿中排出。,血红蛋白尿,血管内溶血时,血红蛋白释放入血浆中;肾及上尿路出血,RBC在非等渗或酸性环境中溶血。当血红蛋白大于1000 mg/L时,可随尿液排出,隐血试验(occult blood test)阳性,甚至尿外观呈浓茶色或酱油色。,检测方法,化学法 利用亚铁血红素的弱过氧化物酶活性试带法胶体金单克隆抗体法 采用胶体金标记的抗人血红蛋白的单克隆抗体;灵敏,特异,参考值:阴性临床意义 辅助诊断血管内溶血疾病 辅助诊断泌尿系统疾病,尿肌红蛋白检查,肌红蛋白(

    18、Myoglobin,Mb)结构与特性与Hb相似,肌损伤时,Mb释放入血,易通过肾小球滤过,排入尿中,检测方法:与Hb相似 Hb与Mb的区别?参考值 定性:阴性;定量:4mg/L临床意义:肌肉损伤的辅助诊断,尿本周蛋白检查,Bence-Jones 蛋白实质为免疫球蛋白轻链,当浓度过高时从尿中排出特性:在pH4.85.0,4060时发生凝固,温度升至90100再溶解,再降至56左右又可凝固凝溶蛋白不能与抗重链或抗Ig的抗血清起反应,但能与抗和抗反应,检测方法:热沉淀 电泳法 免疫(固定)电泳法 免疫速率散射浊度法,参考值:阴性临床意义 MM 巨球蛋白血症 原发性淀粉样变性,T-H蛋白检测,T-H

    19、protein:一种粘蛋白,正常人尿中含少量,肾损伤时排出量增加,与肾损伤程度一致是管型的主要基质物质,在高浓度电解质,酸性环境或尿流缓慢时,THP易聚合沉淀,方 法 放 免 ELISA 临床意义 协助诊断尿路疾患(肾小管病变定位)泌尿系结石形成机制的研究,尿蛋白电泳,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳法参考值:各相对分子量的尿蛋白显示微量蛋白区带,以清蛋白区带为主,临床意义,低分子量蛋白尿:肾小管损害为主中及高分子量蛋白尿:肾小球损害为主混合性蛋白尿:整个肾单位受损,乳糜尿(chyluria),尿液中混有淋巴液而呈稀牛奶状,称乳糜尿 乳糜尿中混有血液,称乳糜血尿(hema

    20、tochyluria),检测方法:乳糜试验:有机溶剂抽提法 离心沉淀:初步区分乳糜、脓尿、结晶尿参考值:阴性,临床意义:淋巴管阻塞 创伤、手术致淋巴管损伤 丝虫病诊断,尿溶菌酶,溶菌酶(lysozyme)主要来自单核细胞和中性粒细胞检测方法:光电比浊法 琼脂糖扩散平皿法临床意义:有助于判断肾小管的功能,是鉴别肾小管与肾小球病变的标志之一,尿淀粉酶,淀粉酶(amylase,AMY)主要来源于胰腺和唾液腺检测方法:碘-淀粉比色法 对硝基麦芽七糖法,临床意义:急性胰腺炎的诊断 急腹症的鉴别诊断,尿HCG检查,人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)是由胎盘合体滋养细胞分泌,具有促性腺发育功能,是一种糖蛋白激素,由一条多肽链和一条多肽链组成,检测方法:-HCG的特异性强,故用-HCG抗体来检测 ELISA 单克隆抗体胶体金试验 电化学发光免疫法 放免 胶乳凝集抑制试验,临床意义:早期妊娠诊断 流产诊断与监控 异位妊娠的诊断 滋养层细胞疾病的诊断及病情观察,小 结,


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