1、第十九章遗传病的治疗 第十九章 遗传病的治疗随着对基因研究和遗传病研究的不断深入，人们对人类遗传病的研究已经取得了许多重要成果。特别是DNA技术在医学中的广泛应用，遗传病的治疗有了突破性的进展，已从传统的手术治疗，饮食疗法，药物疗法等跨入了基因疗法。为遗传病根治开辟了广阔的前景。第一节 遗传病治疗的原则一、遗传病治疗效果的评估由于不同类型的遗传病的发病基础和机制不同，故所采用的治疗方法也不一样。对于单基因病特别是先天性代谢病的治疗按禁其所忌，去其所余和补其所缺的原则进行，即主要采用内科疗法；而多基因病往往是一些较常见的多发病及某些先天畸形，在其发病中环境因素起一定的作用，故利用药物治疗或外科手
2、术治疗可以收到较好的效果。染色体病则是令人棘手的一类遗传病，目前不仅无法根治，改善症状也很困难。只有少数性染色体病如Klinefelter综合征在发育早期如使用睾丸酮进行治疗，可改善患者的第二特征；对于真两性畸形则可进行外科手术等。总体而言，遗传缺陷清楚的遗传病治疗效果好。但有近80%的遗传病因或发病机制尚不完全清楚，即使像苯丙酮尿症这种疾病，经过多年的研究，人们已经知道了它的遗传缺陷所在，也知道了苯丙酮酸在体内堆积而对脑的发育和功能产生不良反应，但究竟是如何产生不良反应的，所知还是很少，所以对苯丙酮尿症的彻底治疗还是会产生不利的影响。统计分析表明：遗传缺陷明朗的遗传病比遗传缺陷不明了的遗传病
3、的治疗效果好。二、遗传病疗效的长期评估遗传病的治疗与一般疾病治疗的疗效不同，遗传病治疗的初期效果明显，但长期观察则达不到预期的目的。例如：前述的苯丙酮尿症可以在发病的早期（或症状前）通过饮食控制而进行预防性治疗，患者可以因此不会发生严重的智能落后，并具有正常或接近正常的智商，从近期疗效看，治疗是成功的；但随着年龄的增长，这类患者还是会表现或轻或重的学习障碍，行为紊乱，故从远期疗效来看，这种治疗又是不成功的，至少不十分成功。再如，女性半乳糖血症患者在早期的“成功”治疗后，到青春期则发现其卵巢功能早已丧失（半乳糖毒性作用）；胱氨酸病也是一样，由于胱氨酸从溶酶体排出缺陷，使胱氨酸在溶酶体内堆积，使肾
4、功能衰竭。肾移植可以使胱氨酸病达到治疗的目的，但长期观察的结果，患者还是常因为脑组织中、甲状腺组织中溶酶体内胱氨酸堆积导致功能衰竭而死亡；再如，一些遗传病的短期治疗是有效的，长期治疗则会产生一些不良反应。珠蛋白生成障碍性贫血患者经输血治疗后会使患者铁过量（iron overload）；用凝血因子治疗血友病时，患者会因此产生针对输入的凝血因子的抗体；青霉胺是一种重金属螯合剂，可用来治疗肝豆状变性这类铜中毒性遗传病，但长期用药，可能会对患者的生殖系统产生不良反应。总之，由于遗传病的特殊性，其治疗的效果需要有一个十分谨慎而长期的评价。此外，众多多基因遗传病的治疗应重视环境条件。对于多基因遗传病来说，
5、遗传因素和环境因素是发病的共同病因；因此在多基因病的治疗中既要考虑遗传条件，也要考虑到环境条件；而在目前状态下，环境条件的改善是多基因遗传病治疗中更为重要的一部分。如哮喘病人、过敏病人对过敏原的去除；高血压病患者、糖尿病患者对饮食的控制等等。三、杂合子和症状前患者的治疗对尚未出现临床表现的杂合子，症状前患者是否应该实施预防性的治疗措施不能一概而论。不少遗传病的杂合子也会表现出临床症状，严重者可致死；症状前患者则是在一定条件下会发病者，对他们治疗既取决于这类疾病的严重程度，治疗的近期、远期效果，药物不良反应大小，也取决于人们对这种问题的道德取向，不必一概而论，需要做认真细致的考虑再作决定。四、遗
6、传病治疗的策略从基因突变到临床表现的出现，这其间涉及到许多过程，每一过程都可能成为遗传病治疗的着眼点。遗传病治疗包括：针对突变基因的体细胞基因的修饰与改善；针对突变基因转录的基因表达调控；蛋白质功能的改善；在代谢水平上对代谢底物或产物的控制；临床水平的内、外科治疗以及心理治疗等。 第二节 传统的遗传病治疗方法当遗传病发展到已出现各种临床症状尤其是器官组织已出现了损伤，应用外科手术的方法对病损器官进行切除、修补或替换，可有效地减轻或改善症状。手术疗法主要包括手术矫正和器官移植两方面。一手术矫正治疗外科手术矫正是手术治疗中的主要手段。对遗传病所造成的畸形可用手术进行矫正或修补，例如修补和缝合唇裂、
7、腭裂，矫正先天性心脏畸形及两性畸形等。对某些先天性代谢病可以手术的方法调整体内某物质的生化水平。例如高脂蛋白血症a型患者进行回肠-空肠旁路手术后，肠道中胆固醇吸收减少，使患者体内胆固醇水平下降。二器官和组织移植根据遗传病患者受累器官或组织的不同情况，结合免疫学研究与技术的不断深入，免疫排斥问题得到控制，有针对性地进行组织或器官的移植是治疗某些遗传病的有效方法。例如，对家族性多囊肾、遗传性肾炎等进行肾移植，肾移植也是迄今最成功的器官移植；对重型地中海贫血和某些遗传性免疫缺陷患者施行骨髓移植术；对胰岛素依赖性糖尿病进行胰岛细胞移植术；对遗传性角膜萎缩症患者施行角膜移植术以及对粘多糖代谢障碍所致的粘
8、多糖病患者实施白细胞或成纤维细胞移植等都可以收到一定的治疗效果。由于成功的同种异体移植可以持续提供所缺乏的酶或蛋白质，因此，对于某些先天性代谢病进行器官移植而达到治疗目的越来越受到重视。例如，1-抗胰蛋白酶缺乏症患者在进行肝移植治疗后，可使血中的1-抗胰蛋白酶达到正常水平；通过肾移植可以治疗胱氨酸尿症。由于移植物能提供正常的酶原，所以这种移植又称酶移植（enzyme transplantation）。对患者有某些遗传病的胎儿进行宫内的手术治疗是遗传病治疗领域的一种有意义的实践。例如对常导致智力障碍的脑积水症胎儿实施子宫内脑室引流术，将过多的脑积液通过塑料导管引至羊膜腔，可防止胎儿的脑组织萎缩；
9、对于先天性尿道狭窄或尿道梗阻的胎儿可将孕妇的子宫切开，取出胎儿进行尿道修复手术，然后再放回子宫继续发育，这样可防止胎儿出现肾功能不全以及因胎尿不足，羊水量少，胎儿吞入的羊水不够所致的肺发育不全。如果在胎儿出生后再进行这类手术则患儿肾、肺等脏器将已经出现严重的功能障碍。第三节 药物治疗对遗传病的药物治疗的原则是“补其所缺”、“去其所余”，实施过程可分为出生前治疗、症状前治疗和临症患者治疗。一、出生前治疗药物治疗可以在胎儿出生前进行，这时可以大幅度地减轻胎儿出生后的遗传病症状。例如，产前诊断如确诊羊水中甲基丙二酸含量增高，提示胎儿可能患甲基丙二酸尿症，该病会造成新生儿发育迟缓和酸中毒，在出生前和出
10、生后给母体和患儿注射大量的维生素B12，能使胎儿或婴儿得到正常发育。此外，对确诊为维生素B2依赖型癫痫的胎儿，给孕妇服用维生素B2，胎儿出生后可不出现癫痫。二、症状前治疗对于某些遗传病，采用症状前药物治疗也可以预防遗传病的病症发生而达到治疗的效果。如发现新生儿甲状腺功能低下，可给予甲状腺素制剂终生服用，以防止其发生智能和体格发育障碍。对于苯丙酮尿症、枫糖尿症、同型胱氨酸尿症或半乳糖血症等遗传病，如能通过筛查在症状出现前做出诊断，及时给予治疗，可获得最佳效果。三、临症患者治疗若在出生后，当遗传病发展到各种症状已经出现，机体器官已经受到损害，这时治疗的作用就仅限于对症。药物治疗的原则可以概括为“去
11、其所余，补其所缺”。（一）去其所余对于一些因酶促反应障碍，导致体内贮积过多的代谢产物，可使用各种理化方法将过多的毒物排除或抑制其生成，使患者的症状得到明显的改善，称为去余。1应用螯合剂肝豆状核变性（Wilson病）是一种铜代谢障碍性疾病，应用青霉胺与铜离子能形成螯合物的原理，给患者服用青霉胺，可除去患者体内细胞中堆积的铜离子。地中海贫血患者因长期输血，易发生含铁血黄素沉积症，使用去铁胺B与铁蛋白形成螯合物可去除多余的铁。2应用促排泄剂对于家族性高胆固醇血症患者可口服消胆胺（cholestyramine）治疗。消胆胺是一种不被肠道吸收的阴离子交换树脂，可结合肠道中的胆酸排出体外，从而阻止了胆酸的
12、再吸收，并可促使胆固醇更多地转化为胆酸排出体外，使患者血中胆固醇水平降低。3利用代谢抑制剂由于酶活性过高所造成的生产过剩病，可用代谢抑制剂抑制酶活性，以降低代谢率。例如，用别嘌呤醇（allopurinol）抑制黄嘌呤氧化酶，可减少体内尿酸的形成，可用于治疗原发性痛风和Lesch-Nyhan综合征。4血浆置换或血浆过滤血浆置换（plasmapheresis）可除去大量含有毒物的血液，此法已成功应用于重型高胆固醇血症的治疗。溶酶体贮积病及某些遗传性溶血性贫血的患者，亦可通过血浆置换的方法得到治疗。血浆过滤（plasmafilter）是将患者的血液引入含有特定的亲合剂容器内，由于亲和结合剂与血浆中“
13、毒物”选择性结合后不能通过回输滤器，而使患者的血液得到清理，在将血液重新输入患者体内后，获得治疗效果。例如，治疗家族性高胆固醇血症，将患者的血液引入含肝素-琼脂糖小球和氯化钙的输血瓶内混匀，使患者血中的低密度脂蛋白（LDL）与肝素等形成难以通过滤器的不溶性复合物，当回输时不能通过滤器进入患者体内，可使家族性高胆固醇血症患者血中胆固醇水平下降50%，疗效显著。5平衡清除（equilibrium depletion）法：对于某些溶酶体贮积病，由于其沉积物可弥散入血，并保持血与组织之间的动态平衡。如果把一定的酶制剂注入血液以清除底物，则平衡被打破，组织中沉积物可不断进入血液而被清除，周而复始，以达到
14、逐渐去除“毒物”的目的。（二）补其所缺对于某些因X染色体畸变所引起的女性疾病，可以补充雌激素，使患者的第二性征得到发育，也可以改善患者的体格发育。垂体性侏儒患者可给予生长激素治疗。先天性肾上腺皮质增生症患者，可用类固醇激素予以治疗；糖尿病患者注射胰岛素等均可使症状得到明显的改善。但这种补充常需终生进行才能维持疗效。对有些遗传病是因为某些酶缺乏而不能形成机体所必需的代谢产物，如给予补充，即可使症状得到明显的改善，达到治疗目的，即称补缺。例如，先天性无丙种球蛋白血症患者，给予丙种球蛋白制剂，可使感染次数明显减少；乳清酸尿症患者，因体内缺乏尿苷而引起贫血、体格和智能发育障碍，如果给予尿苷治疗，症状即
15、可得到缓解。（三）酶疗法遗传性代谢病通常是由于基因突变造成酶的缺失或活性降低，可用酶诱导和酶补充的方法进行治疗。1酶诱导治疗在某些情况下，酶活性不足不是结构基因的缺失，而是其表达功能“关闭”，可使用药物、激素和营养物质使其“开启”，诱导其合成相应的酶。例如新生儿非溶血性高胆红素I型（Gilbert综合征）是常染色体显性遗传病，患者因肝细胞内缺乏葡萄糖醛酸尿苷转移酶，胆红素在血中滞留而导致黄疸，消化不良等症状，苯巴比妥能诱导肝细胞滑面内质网合成该酶，所以给予患者苯巴比妥治疗，即可使症状消失。雄激素能诱导1-抗胰蛋白酶的合成，因而可应用于1-抗胰蛋白酶缺乏症的治疗。2酶补充疗法给患者体内输入纯化酶
16、制剂是酶补充疗法的重要途径。如给脑苷脂病（Gaucher病）患者注射-葡萄糖苷酶制剂，可使患者肝和血液中的脑苷脂含量降低，使症状缓解；对严重的1-抗胰蛋白酶缺乏症患者每周用4g强化的1-抗胰蛋白酶静脉注射，连用4周后便可获得满意的效果。用从人胎盘提取的-半乳糖苷酶A治疗Fabry病也可取得一定的治疗疗效。在临床上很多情况下，直接输入酶制剂，往往受到机体免疫功能的作用而被破坏，因而不能有效地发挥作用。为了降低外源酶在体内的破坏，延长酶作用的半衰期，目前采用将纯化酶制剂装入载体后再输入给患者的办法。载体容易以胞吞作用通过细胞膜进入细胞，载体所带的酶逐渐释放，发挥治疗作用，提高疗效。常用的载体是红细
17、胞胞影和脂质体（liposome）。目前，应用酶受体介导分子识别法（receptor-mediated molecular recognized process）补充酶已经取得临床疗效。此法是把所用的酶进行一定的改造，用靶细胞表面特殊受体的抗体包裹，注入体内后，更易为靶细胞的某些结合部位所识别并与之特异性结合。例如，治疗型糖原沉积病，可使-糖苷酶与LDL结合，把酶引入肝外有LDL受体的细胞，取得了治疗效果。（四）维生素疗法有些遗传代谢病是酶反应辅助因子（如维生素）合成不足，或者是缺乏的酶与维生素辅助因子的亲和力降低，因此通过给予相应的维生素可以纠正代谢异常。例如，叶酸可以治疗先天性叶酸吸收不良
18、和同型胱氨酸尿症；生物素可以用于治疗混合型羧化酶缺乏症和丙酸血症等。近年来，在临床上应用维生素C治疗因线粒体基因突变引起的心肌病有一定的疗效。第四节 饮食疗法饮食疗法治疗遗传病的原则是禁其所忌，即对因酶缺乏而造成的底物或中间产物堆积的患者，制定特殊的食谱或配以药物，以控制底物或中间产物的摄入，减少代谢产物的堆积，达到治疗的目的。一、产前治疗现代医学遗传学技术已经根据系谱分析和产前诊断确诊多种遗传病胎儿，有些遗传病可以在其母亲怀孕期间就进行饮食治疗，使患儿症状得到改善。例如遗传病饮食治疗第一个获得成功的例子是对患有半乳糖血症风险的胎儿，在孕妇的饮食中限制乳糖和半乳糖的摄入量而代以其他的水解蛋白（
19、如大豆水解蛋白），胎儿出生后再禁用人乳和牛乳喂养，患儿会得到正常发育。二、临症患者治疗1953年，Bickle等首次用低苯丙氨酸饮食法治疗苯丙酮尿症患儿，治疗后患儿体内苯丙氨酸明显减少，症状得到缓解。现在经改良已有商品化的低苯丙氨酸奶粉出售，如果在出生后，立即给患儿服用这种奶粉，患儿就不会出现智力低下等症状。随着患儿年龄的增大，饮食治疗的效果就越来越差，所以要求早诊断，早治疗。目前，针对不同的代谢病已设计出100多种奶粉和食谱。减少患者对所忌物质的吸收是饮食疗法的另一条途径，亦可减轻症状的出现，而且更易被接受。例如，在苯丙酮尿症患儿常规进食后，让其服用苯丙氨酸氨基水解酶的胶囊，这种酶在肠内释放
20、后，可将食物消化后形成的苯丙氨酸转化成苯丙烯酸，使苯丙氨酸在未被肠道吸收前即被选择性清除；又如给家族性高胆固醇血症患者服用糠麸，也可减少肠道对胆固醇的吸收，延缓和减轻动脉粥样硬化等症状的形成。第五节 基因治疗基因治疗（gene therapy）是运用重组DNA技术，将具有正常基因及其表达所需的序列导入到病变细胞或体细胞中，以替代或补偿缺陷基因的功能，或抑制基因的过度表达，从而达到治疗遗传性或获得性疾病的目的。一、基因治疗的策略根据宿主病变的不同，基因治疗的策略也不同，概括起来主要有下列几种：（一）基因修正基因修正（gene correction）是通过特定的方法如同源重组或靶向突变等对突变的D
21、NA进行原位修复，将致病基因的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保留。但目前在技术上还无法做到。因为要在人基因组的某个特异部位上进行重组是一个非常复杂的过程。即使在不太复杂的模型系统中进行定位重组也不容易实现。然而原位修复的方法无疑是进行基因治疗最理想的途径和目的。（二）基因替代基因替代（gene replacement）指去除整个变异基因，用有功能的正常基因取代之，使致病基因得到永久地更正。传统上所谓基因治疗实际上就是指基因替代疗法，就像外科移植手术一样。（三）基因增强基因增强（gene augmentation）指将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物可以补偿缺陷细胞的功能或使
22、原有的功能得到加强。近十年来已经发展了许多有效的方法可将目的基因导入真核细胞并获得表达，因而是目前较为成熟的方法。这一方案最适宜隐性单基因疾病的治疗。（四）基因抑制和（或）基因失活导入外源基因去干扰、抑制有害的基因表达。例如，向肿瘤细胞内导入肿瘤抑制基因（如Rb或p53），以抑制癌基因的异常表达。此外利用反义技术（antisense technology）封闭某些特定基因的表达，以达到抑制有害基因表达的目的。反义技术是反义核酸（RNA或DNA）技术，ribozyme技术及反义ribozyme的总称。如反义RNA被誉为“基因封条”，能封闭mRNA，抑制基因的表达。再如ribozyme实际上也是一
23、种反义RNA，与靶细胞的mRNA结合后，还能切割杂交分子，使之断裂，所以可以封闭或抑制某一基因所编码的特定蛋白质。这一新技术已被广泛用于肿瘤和病毒性疾病（如艾滋病）等的基因治疗研究中。二、基因治疗的种类基因治疗根据靶细胞的类型可分为生殖细胞基因治疗和体细胞基因治疗。从理论上讲，将受精卵早期胚胎细胞作为目标进行生殖细胞的基因治疗是可行的。但由于受精卵或早期胚胎细胞的遗传改变势必影响后代，伦理学障碍和技术上的困难使生殖细胞治疗目前仍为禁区。体外受精的发展也许可以推动人类生殖细胞基因治疗的研究。体细胞基因治疗只涉及体细胞的遗传转变，不影响下一代，现已被广泛接受作为严重疾病的治疗方法之一，在现代伦理道
24、德上是可行的。方法上易于施行，而且已取得了可喜的成果。基因转移是基因治疗的关键和基础。基因转移的途径有两类：一类是in vivo，称为直接活体转移；另一类为ex vivo，称为回体转移。前者指将含外源基因的重组病毒、脂质体或裸露的DNA直接导入体内。后者指外源基因克隆至一个合适的载体，首先导入体外培养的自体或异体（有特定条件）的细胞，经筛选后将能表达外源基因的受体细胞重新输回受试者体内。ex vivo法比较经典、安全，而且效果较易控制，但是步骤多、技术复杂难度大、不容易推广；in vivo法操作简便、容易推广，但尚不成熟，存在疗效短、免疫排斥及安全性等问题，它是基因转移研究的方向，只有in v
25、ivo基因转移方法成熟了，基因治疗才能真正走向临床。对于遗传病而言，理想的基因治疗是将遗传物质高效率转移到个体细胞中，并且能整合到细胞基因组中，在细胞中长期表达。但是目前的基因转移方法很难满足理想基因转移方法的全部要求，因此探索理想的基因转移方法是基因治疗的一项重要内容。基因转移方法可分为物理、化学和生物学等方法。Minimal Requirement for Gene Transfer Therapy of A Genetic Disorder1. Identification of the affected locus.2. A complementary DNA (cDNA) clone
26、 of the gene.3. A substantial disease burden and a favorable risk-benefit ratio in comparison with alternative therapy.4. Sufficient knowledge of the biochemical basis of the disease to be confident that the gene transfer is likely to correct the biochemical pathology and to prevent or reverse criti
27、cal phenotypic abnormalities.5. An appropriate target cell with sufficiently defined biology and, ideally, a long half-life or good replicative potential in vivo.6. Adequate data from cultured cell and animal studies to suggest that the vector, gene construct, and target cell are suitable.三、基因治疗的方法（
28、一）目的基因的转移把外源基因安全有效地转移到靶细胞中，是实现基因治疗的第一个关键步骤。目前基因转移技术有6种类型。1物理方法（1）直接注射法 在显微镜直视下，离体向靶细胞核内注射外源基因，并使其在靶细胞内得以表达。在小鼠、兔、猪、鱼等转基因动物已有成功的例子。但一次只能注射一个细胞，工作量大。（2）电穿孔法（electroporotion） 将靶细胞置于高压脉冲电场中，通过电击使细胞产生可逆性的穿孔，周围基质中的DNA可渗进细胞。（3）微粒子轰击法（microparticle bombardment） 利用亚微粒的钨和金能吸附DNA，将它包裹起来形成微粒，通过物理途径（一般应用可调电压产生的轰
29、击波）使它获得很高的速度即基因枪技术，微粒瞬间即可进入靶细胞，达到了转移基因的目的，而又不损伤靶细胞原有的结构。2化学法 应用磷酸钙沉淀法改变细胞膜透性，以加强细胞从培养液中摄取外源DNA。但此法转移效率低，其成功率约在1/1001/1000。3膜融合法 利用人工脂质体或红细胞影泡、微细胞、原生质球等（如人工脂质体）通过与靶细胞融合或直接注射到病灶区，令其内含的外源基因表达，可达到基因治疗的目的。4受体载体转移法 将含有目的基因的重组质粒和某些细胞表面受体能识别的特异性多肽（配体）形成复合物，可通过细胞内吞途径达到转移基因的目的，这种方法可使外源基因在活体内导向特异类型的细胞，如可将目的基因和
30、去唾液酸糖蛋白藕连起来，使肝细胞能特异性的吸入，并在肝细胞中表达。5同源重组法（homologous recombination） 将外源性目的基因定位或原位修补，导入的外源基因和染色体上的基因在同源顺序间发生重组而插入染色体，这样外源基因不是随机地而是专一地整合到靶细胞的特定位点，取代原位点上的缺陷基因。6病毒介导转移法(viral mediated gene transfer) 通过转换方式完成基因转移，即以病毒为载体，将外源目的基因通过基因重组技术，组装于病毒上，让这种重组病毒去感染受体宿主细胞，这种病毒称为病毒运载体（viral vector）。目前有两类病毒可以作为载体：（1）逆转录
31、病毒（retrovirus）虽是RNA病毒，但有反转录酶，可使RNA转录为DNA，再整合到细胞基因组（图19-1）。逆转录病毒具有以下3个优点：首先是它具有穿透细胞的能力，其转染率可达100%；其次是宿主范围广，可同时感染大量细胞并长期停留。再者病毒基因和它所载的外源基因都能表达。但它也有不足之处，主要是病毒基因容量有限，一般插入片段只能在7kb左右，如果较大的基因则要用其cDNA；病毒随机插入靶细胞基因组中，因病毒具有强大的启动子和增强子，能使插入位点附近的基因过度表达或失活；最严重的问题是由于病毒自身含有病毒蛋白和癌基因，可使宿主细胞感染病毒和致癌。因此，人们有目的地将病毒基因及其癌基因除
32、去，仅保留它们的外壳蛋白，以保留其穿透细胞的能力，避免上述缺点，这种改造后的病毒称为缺陷型病毒。在逆转录病毒载体中，最常用于人类的是小鼠白血病病毒（Mo-MLV）。它是经人工构建的。图19-1 逆转录病毒介导的基因转移注：包装细胞提供gag,pol和env蛋白（2）DNA病毒（DNA virus）包括腺病毒、SV40病毒、牛乳头瘤病毒、疱疹病毒等。其中腺病毒是近年来倍受关注的DNA病毒，因为它具有插入DNA较长，不需要正在分裂的靶细胞，可以原位感染和病毒滴度高等优点，此外，由于腺病毒载体一般不会整合到宿主的基因组中，从而大大减少了插入突变的危险。腺病毒目前已鉴定出40个以上的血清型，常用作基因转移载体的是2型（Ad2）和5型（Ad5）,它们常被切除E1和E3基因，造成复制缺陷型，可在缺少E1基因的细胞中繁殖（图19-2）。1993年美法等国成功采用腺病毒载体进行心、脑、肺、肝内胆管和肌肉组织的体内基因转移。采用复制缺陷的腺病毒进行基因治疗有以下优点：该病毒可感染分裂和非分裂的细胞，并能得到大量基因产物，对神经细胞、心肌细胞
