1、四、四、NIPT与胎儿超声检查该怎样关联？与胎儿超声检查该怎样关联？五、时限：晚孕可否行五、时限：晚孕可否行NIPT？六、双胎？七、临床运用七、临床运用 为什么是为什么是NIPT？胎儿胎儿DNADNA的特点和来源的特点和来源 基本特点：基本特点：1 含量有一定的变化规律。妊娠第4周开 始可检出胎儿游离DNA，随着孕周增加 而增加，存在个体差异，平均浓度7.5%2 分娩后短时间内消失，平均半衰期为 16.3min（4-30min），2h就无法检出，前次妊娠情况不影响再次妊娠检测结果 3 DNA片段较小，平均166bp左右。常规技 术很难检测 来源：1 胎儿细胞通过胎盘渗透到母血中，被 母体免疫系
2、统破坏，胎儿DNA残留下来；2 胎儿细胞凋亡；3 胎盘滋养层细胞的凋亡 图1 临床试验数据浓度随孕周变化趋势 NIPTNIPT的基本原理的基本原理 目标疾病：目标疾病：21；18三体三体 性染色体？性染色体？唐氏综合征唐氏综合征（Downs SyndromeDowns Syndrome）:）:俗称“先天愚型俗称“先天愚型”，主要是由于细，主要是由于细胞中多出一条胞中多出一条2121号染色体所导致的疾病。严重智力障碍，绝大多数生号染色体所导致的疾病。严重智力障碍，绝大多数生活无法自理。心智年龄发育迟缓，性格温驯、乐观开朗，素有“蜜糖活无法自理。心智年龄发育迟缓，性格温驯、乐观开朗，素有“蜜糖天使
3、”之称。发生率天使”之称。发生率1/6001/600-800800，中国的唐氏综合征患者数量目前已中国的唐氏综合征患者数量目前已超超过过100万万，平均每年有约，平均每年有约3万多万多名唐氏综合征婴儿出生。名唐氏综合征婴儿出生。唐氏综合征唐氏综合征 正常男性核型正常男性核型:46,XY 47，XY，+21 唐氏综合征：唐氏综合征：患者面容特殊，两外眼角上翘，舌头常往外伸出，通患者面容特殊，两外眼角上翘，舌头常往外伸出，通贯手等。患者绝大多数为严重智能障碍并伴有多种脏器的异常，如贯手等。患者绝大多数为严重智能障碍并伴有多种脏器的异常，如先天性心脏病、白血病、消化道畸形等，给家庭和社会带来沉重的先
4、天性心脏病、白血病、消化道畸形等，给家庭和社会带来沉重的经济负担和心理负经济负担和心理负担。担。唐氏综合征的临床表现唐氏综合征的临床表现 染色体核型类型染色体核型类型 发生率发生率 类型类型 92%标准型标准型21-三体三体 34%易位型易位型21-三体三体 24%嵌合型嵌合型21-三体三体 染色体核型类型染色体核型类型 1、精子或卵子形成过程中精子或卵子形成过程中21号染色体不分离，号染色体不分离，90%由卵子的由卵子的21号染号染 色体不分离引起（标准型）色体不分离引起（标准型）47,XX（XY）,+21 2、受精卵卵裂过程中受精卵卵裂过程中21号染色体不分离（嵌合体）号染色体不分离（嵌合
5、体）46,XX（XY）?/47,XX（XY）,+21?3、双亲的平衡易位（易位型）双亲的平衡易位（易位型）46,XX（XY）,rob（15;21）,（p10;q10）mat 45,XX,rob（15;21）46,XX,rob（21;21）特点特点 一、偶发：育龄妇女每一次妊娠都一、偶发：育龄妇女每一次妊娠都 有生唐氏儿的可能。有生唐氏儿的可能。二、母亲年龄：孕妇超过二、母亲年龄：孕妇超过35岁时，岁时，发病率急剧增高。但多数妇女在发病率急剧增高。但多数妇女在35岁以前生孩子，岁以前生孩子，所以所以80%的唐的唐氏综合征患儿是由氏综合征患儿是由35岁以下的孕岁以下的孕妇所生。妇所生。部分症状：早
6、夭，智障，残指早夭，智障，残指 自然发生率：自然发生率：1/80001/8000-1/20001/2000 47,XX,+18-EdwardEdward综合征（综合征（1818三体）三体）部分症状：智力严重缺陷，兔唇，易发心脏病智力严重缺陷，兔唇，易发心脏病 自然发生率：1/80001/8000 -Patau Patau 综合征（综合征（1313三体）三体）47,XX,+13 性染色体综合征性染色体综合征 X和和Y染色体数目异常或结构畸变所引起的疾病染色体数目异常或结构畸变所引起的疾病 临床表现：性发育不全或两性畸形，有的患者仅表现临床表现：性发育不全或两性畸形，有的患者仅表现出生殖力下降、继
7、发或原发闭经、智力稍差、行为异出生殖力下降、继发或原发闭经、智力稍差、行为异常等常等 常见核型：常见核型：45,X 47,XXY 46,XX/46,XY 46,XXq-46,Xi（Xq）除除21；常见染色体非整倍体异常发生频率常见染色体非整倍体异常发生频率 常见染色体异常常见染色体异常 频率频率 唐氏综合征唐氏综合征 1/600 18-三体三体 1/5000 13-三体三体 1/15000 Klinefelter综合征综合征 1/700 XYY综合征综合征 1/800（男性中）（男性中）XXX综合征综合征 1/1000（女性中）（女性中）Turner综合征综合征 1/1500（女性中（女性中）
8、2011年年6月月-2012年年12月月 5950无创提示性染色体异常无创提示性染色体异常33例例 6 总数总数 XXX XO XXY XYY 测序法阳性测序法阳性（总样本量总样本量 n=5950）33 14 7 9 3 核型结果核型结果 阳性阳性 13 7 2 3 1 阴性阴性 11 3 3 4 1 拒绝诊断拒绝诊断 9 4 2 2 1 阳性预测值阳性预测值（PPV）54.17%70%40%42.86%50.00%常见假阳性原因常见假阳性原因:1.母亲存在性染色体异常，造成母体背景影响母亲存在性染色体异常，造成母体背景影响 2.性染色体异常嵌合性染色体异常嵌合 3.胎盘嵌合胎盘嵌合 检出率检
9、出率100%（13/13,95%CI 75.3-100%）,假阳性率假阳性率0.18%（11/5937,95%CI 0.1-0.32%）Noninvasive prenatal genetic testing for fetal aneuploidy detects maternal trisomy X Prenatal Diagnosis 2012,32,11141116 Detection of Fetal Sex Chromosome Aneuploidy by Massively Parallel Sequencing of Maternal Plasma DNA:Initial Ex
10、perience in a Chinese Hospital Ultrasound Obstet Gynecol 2014;44:1724.染色体染色体异常分类异常分类 基因扩增基因扩增 先天性先天性 （体细胞体细胞）后天性后天性 （体细胞体细胞）PrenatalPrenatal产前产前 PostnatalPostnatal生后生后 单条染色体单条染色体内内 结构异常结构异常 染色体间染色体间 多体多体 非整倍体非整倍体 多倍体多倍体（三倍体三倍体,四倍体四倍体）染色体异常染色体异常 数目异常数目异常 单体单体 罗伯逊易位罗伯逊易位 相互易位相互易位 重迭重迭 缺失缺失 插入插入 等臂染色体等
11、臂染色体 环环状状染色体染色体 倒位倒位 插入插入 染色体异常染色体异常 流产流产（%）（%）出生后（出生后（%）%）常染色体三体常染色体三体 1313 1.101.10 0.010.01 1616 5.585.58 0.000.00 1818 0.840.84 0.020.02 2121 2.002.00 0.110.11 其它三体其它三体 11.8111.81 0.000.00 总三体总三体 21.3321.33 0.1350.135 X X染色体单体染色体单体 8.358.35 0.010.01 性染色体三体性染色体三体 0.330.33 0.150.15 三倍体三倍体 5.795.79
12、 0.000.00 四倍体四倍体 2.392.39 0.000.00 总染色体异常总染色体异常 41.5241.52 0.600.60 数目畸变数目畸变发生率发生率 发病率：发病率：/14000-1/50000 遗传特点：新发遗传特点：新发85%-95%家族性遗传：家族性遗传：510%。遗传方式通常为常显。遗传方式通常为常显 发生机制：发生机制：基因组上易于发生重排的局部区域：例如基因组上易于发生重排的局部区域：例如 low copy repeats LCR 低拷贝重复序列低拷贝重复序列 nonallelic homologous recombination（NAHR）非等位同源重组非等位同源
13、重组 微缺失、重复微缺失、重复 DS筛查与筛查与NIPT如何临床运用如何临床运用 国内中孕期筛查与NIPT结合的体系特点 Risk1/270 11-14周周NT测定测定 中孕期三联筛查中孕期三联筛查 1/270Risk1/1000 产前诊断产前诊断 随访结局随访结局 Risk3mm 法律规定35岁以上的孕妇直接产前诊断 早孕期筛查以单独的NT测定为主 NT增厚的临床处理流程不明确 中孕期筛查占绝大多数的比例 进行NIPT检测的孕妇人群孕周普遍偏大 中间风险的定义较国外方案窄 进行NIPT检测的主力人群是NT正常的高龄和中孕期筛查高危人群 cfDNA 检测检测 vs 唐筛唐筛 cfDNA结果结果
14、 样本数样本数（n）验证样本验证样本s（n）失访样本失访样本（n）+-唐筛高风险唐筛高风险（5550）T21 34 25 4 5 T18 5 3 1 1 T13 3 0 2 1 其他异常其他异常 47 10 26 11 阴性阴性 5461 0 唐筛低风险唐筛低风险（1891）T21 5 3 2 0 T18 0 0 0 0 T13 1 0 0 1 其他异常其他异常 12 1 10 1 阴性阴性 1873 0 1640 233 总计总计-7441 44 6534 863 NIPT与胎儿超声检查与胎儿超声检查 超声胎儿畸形与染色体异常的关系超声胎儿畸形与染色体异常的关系 可导致胎儿染色体异常风险增高
15、的胎儿畸形有可导致胎儿染色体异常风险增高的胎儿畸形有:（1）NT（1）NT增厚增厚;（2）;（2）颈部水囊瘤颈部水囊瘤;（3）;（3）某些类型的心脏畸形如房某些类型的心脏畸形如房室共道畸形等室共道畸形等;（4）;（4）十二指肠闭锁十二指肠闭锁;（5）;（5）前脑无裂畸形前脑无裂畸形;（6）Dandy Walker（6）Dandy Walker畸形畸形;（7）;（7）脐膨出脐膨出;（8）;（8）胎儿水肿等胎儿水肿等 不导致胎儿染色体异常可能性明显增高的胎儿畸形有不导致胎儿染色体异常可能性明显增高的胎儿畸形有:（1）（1）单独的唇腭裂单独的唇腭裂;（2）裂腹畸形裂腹畸形;（3）空肠闭锁空肠闭锁;（4）大肠大肠梗阻梗阻;5）;5）单独足内翻畸形单独足内翻畸形;（6）;（6）卵巢囊肿、肠系膜囊肿卵巢囊肿、肠系膜囊肿;（7）（7）半椎畸形半椎畸形;（8）单侧多发性囊性肾发育不良单侧多发性囊性肾发育不良;（9）;（9）脑穿通脑穿通囊肿、脑裂畸形囊肿、脑裂畸形;（10）;（10）胎儿肿瘤、肺囊腺瘤。胎儿肿瘤、肺囊腺瘤。超声胎儿畸形数与染色体异常的关系超声胎儿畸形数与染色体异常的关系 出畸形数与胎儿染色体异常发生率的关系出畸形数与胎儿染色体异常发生率的关系 胎儿畸形数胎儿畸形数 例数例数
