1、根本质部束 常较小，导管也少。2.2根粉末的显微结构鉴别丹参粉末呈红棕色。木栓细胞黄棕色，表面观呈类方形或多角形，壁稍厚，胞腔内常 含红棕色色素，色素溶解后，断面观细胞类长方形，排列较整齐。木纤维多成束，长梭 形，纹孔斜裂缝状或十字状，孔沟稀。导管主要为网纹和具斜纹孔导管。石细胞呈 类圆形、类三角形、类梭形、类长方形或不规则形 ，也有延长呈纤维状，有的胞腔内含棕色。2. 3花粉形态学特征对丹参及同属药用植物的鉴别 一定的植物具有一定形态的花粉，因此花粉形态研究也是植物分类鉴别的依据之一。丹参的花粉以外壁较薄、纹饰网眼较浅、网脊较粗、沟较宽、沟底具颗粒而区 别于其他种。3理化学方法鉴别3.1根据
2、丹参所含的化学成分进行鉴别 经过大量分析研究说明丹参所含化学成分中二萜醌成分与系统发育有密切关系，二萜醌类化合物组成的不同可以作为 种类鉴别的依据，根据二萜醌成分含量的多少对丹参组作丹参的药用植物的亲缘 关系进行划分。3.2薄层色谱鉴别林佳等采用薄层色谱定性鉴别的方法比较后指出在同一展 开系统的条件下，无论是野生还是栽培品种，丹参的一些主要成分相同，以此可以 作为识别丹参药材真伪的参考依据。落笊蕭沿原處位严H期：2004年12月29 H ）样品名称 S.丹酚酸B 1,2.丹参（产于河北）3.丹参（产于陕西）4-6.丹参（产于山东）7,8.丹参（产于安徽）相关条件 供试品溶液：取丹参粉末 0.2
3、g，加75%甲醇25ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液浓缩至1ml对照品溶液：取丹酚酸 B对照品，加75%甲醇制成每1ml含2mg的溶液。薄层 板：高效硅胶 GF254,预制薄层板（HPTLC-plate Nano-DLRASIL-20 ，UV254, MN点 样：2卩l ;条带状点样，条带宽度为 1Omm条带间距为5mm原点距底边10mm展 开 剂：甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（2:340.5:2） ，20ml。展 开 缸：双槽展开缸，20cmX10crm展 开：展开缸一侧槽中加入展开剂，预平衡 15分钟，上行展开，展距为 8cm。检 视：置紫外光灯（254nm）下检视。3. 3
4、紫外吸收光谱鉴别丹参在253, 277 nm两处有吸收特征峰，而甘西鼠尾在264,248, 218, 203 nm 4处有 吸收特征峰。作丹参使用的药材紫外吸收光谱的范围不同 ，据此可以对两者进行鉴别。丹参粉末处理后置紫外灯（365nm）下现察显亮蓝灰色荧光3. 4紫外导数光谱：李海鹰等研究认为丹参与番薯根的石油醚、甲醇及氯仿提 取物的零阶和二阶导数光谱均可用于二者的鉴别。3. 5丹参药材的近红外漫反射光谱模式识别法鉴别 刘沐华等近红外漫反射光谱（NIRTDRS模式识别法可以有效地应用于中药材自动鉴别、递归支持向量机等 方法可以有效地完成自动分类和特征谱段选择。 不同种丹参药材的NIRTDRS
5、丹参及属内植物为根茎类药材，其根茎中除含有大量的纤维素、淀粉等外，其他化学成 分主要分脂溶性的其结果与化学成分测定一致。 NIRTDRS用于不同种丹参药材的鉴别，方法简便、结果可靠。3.6指纹图谱鉴别（HPLC法）高效液相色谱（HPLC具有色谱稳定性好、柱效高、应用范围广等特点 ，是中药 指纹图谱研究中常用的手段。对丹参等几种中药指纹图谱与代谢指纹图谱研究的结果,指出不同产地的药材在指纹图谱上存在较大差异 I m V M K 比蝕Talk 1 CoKrparlMV M （he Drpw d ikmlhmt 寸 iht llfncriiibk1 峠 严刚划 IMNAviiZM.flhpiffi7
6、鉴别丹参与其近缘及远维橋曲的指紅囲潛I!引输內222结果验证：结果验证显示，PCR扩增重复性较好，取样合理，能够代表各居群。 4.2丹参EST序列中SSR信息的分析及建立4.2.1丹参EST序列中SSR信息的分析微卫星（Microsatellite）又称简单重复序列（Simplesequenee repeat），指的是 基因组中由16个核苷酸组成的基本单位重复多次构成的一段 DNA,广泛分布于基因组的不同位置，长度一般在 200bp以下SsR分子标记具有数量丰富，多性高，多等位基因，共显性，重复性高等优点。根据建立 SSR标记的序列性质不同可分为基因组 SSR （Geno mic SSR,gS
7、SR和表达序列标签 SSFR Expressed sequenee tagSSR EST-SSR EST及表达序列标签是通过从 cDNA文库中随机挑 选的克隆进行大规模测序所获得的 5或3端序列，长度一般在150500bp。422丹参EST序列中SSR信息的分析及建立表2丹参EST-SSF引物情况表弓闍骗号IjeueBank Eh V 虬6 Ja（yfiieltank EST ccnlrbpFifprrlril| Hi win lit* sii/r引像序列JU火詁度 TmWCFACA5；V1724l241GAGGC 1 At ITCt； I CXJAGG52.3GAAACTAAAGCAACAA
8、ACCC52.1（CAJ16t：V 172134176CCGHGGTG1ICCCTCII 155TG CCG ATTCTA ACCTGTATG苗K.CVI7IH77）37AGAGGCTGCTGC I ICA I 152.7IC A AG 1 ： AT AGGCXi I GX：543-H4（AAC：K：V371649TITAGGC：AGACAGACC1 CA I A4（k7（IId m wrrSSR（H）5（GTl 加153CTGAG CAX：T A 匚 TAC CAC AT49.6C FTATCCCAACAC 1 rCTlCT4.5SSJK）6I715i5l亦AAA：A；AGCiAC（iAA（
9、； A；56.2ACX ACX A 1 I AC： IC：AA；ACG564SSR：HI7CTl 11FFS37lk.（.jfiSCTCCGCTTCfiCl GCTGTT57JracTCGCitcgtcgtcit57.2SSRoohMW厂捋1ACiti J I AC： I A：AKiAA（K：A（i511AGTT； AGTGGTGATC；GAA（ ； AT53.2SSR w（AA；yFE53盟刘145C ；A CTT I G i ATCK:CTCiCTC:52.9GAGGCCGCTAC I I K：TAT50.2（TA t A：nLS136AA 1 AA（；（；C AA 1 A：AC（,：J
10、I：4.2C TTT AC A CGC ATAACACG47.4SSRhI 1l ： HFE53（561162AACTTGGCAATG7 IXZGCTAT55.2GCTTG ttc TTC ACAGGCI n54.9SS1UH2（TQHtstrr（AC）RFE53M&6UilGGTCCATTCrrt TTTATTTCC（1CC： ATCA A f iTC； CiTCC； TCT55.65SRCH3:AGQh1 1：订“I iwHi2CAGTCCAACAGCCCGACCAG4ATC：A l Alt t； CAG A （：（M.4从NCBI数据 库 下载鼠 尾草属EST序 列11747条，其中包
11、括丹参EST 序 列 10228 条和 Salvia fruti cosa 1519 条，应用 Active Perl5.6.1.628对 含有 SSF的序列进行搜索。搜索参数设置为：单核苷酸、二核苷酸、三核苷酸、四核苷酸、五核苷酸和六核苷酸最少重复次数分别为18次、6次、5次、4次、4次、3次423丹参的EST-SSF分布频率与特点丹参EST-SSF中共包含77种重复基元。单核苷酸重复有 1种A/T。二核苷酸重复也为3种，以AG/CT为主，占64.21%。三核苷酸重复为10种表3丹参EST-SSF言息情况表Keprat片卩广丹基冗种数 Number of mutd lirsSSK数SSR N
12、umber占全部SSR比例Proparrioti in 胡 SSRjM%）出现频率Frequency %）单核昔酸童复1 （Xj953.0b1（X45Mononucleotide二檢甘酸讥奴3S018.873.72D inn cleo tideJ1045022.34J rinilcleoddc四梭仔醸重复rccranucleotidtffl151）.74（1.15五孩甘酸取IX13（L650.13P c ntanu clcotidc 六核昔酸遼复432（L帖hexriniu leordr总计T Ltl772014HKi.Od19.69表4丹参二、三核苷酸重复基元情况表Repeat type基元
13、 rrprul umlitNum be r占该类型比例LJtLn|orLiiH in this typr （%）Frequency!%）巾核背隈就复MoncmuclcntidcA/fIhOJl.i1（+45-核井酸币.貝AC/GTwl15,790.591 JillLldtOlldcAG/CT24464.2123A17AT76OJA:核昔酸质复AAC/CTTS1 780.08rinuc-lrotidrAG/Cl 17917.560.77AA I7A 1 192.dllU.Q2ACC/CJGT143 11（+（3ACG/CTG12327.331.20CV/TC,419.110.40AGC/CG1368.（1（0.35AGG/CC1255.560.24AGT/ATC9521.110.93CCX；/C（；G21）4.441）.20423讨论：丹参EST-SSR勺出现频率高，重复基元的类型也比较丰富。 17.5%的EST序列中含有 SSRSSR出现频率为19.69%。丹参EST-SSR言息比较丰富， 覆盖了从单核苷酸重复到六核苷酸重复。
