1、D凝固剂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强解析理想的凝固剂应具备以下条件：不被所培养的微生物分解利用，在微生物生长的温度范围内保持固体状态，凝固剂的凝固点不能太低，否则不利于微生物的生长，如琼脂凝固点为40 ，对所培养的微生物无毒害作用，并且在灭菌时不会被破坏，透明度好，凝固力强，配制方便，价格低廉。常用凝固剂有琼脂、明胶。答案C4无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是A对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌B将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌C为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行D实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
2、解析对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，而不是灭菌。答案A5. 可以鉴定出分离分解尿素的细菌的方法是A以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂B以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂C以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂D以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂解析尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，酚红指示剂变红。6以尿素为唯一氮源筛选出多种具有较高尿素降解能力的微生物，其中有真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似A硝化细菌 B蓝藻C蚯蚓 D兔子解析尿素分解菌是以现成有机物为能量来源，营腐生生活的生物，类似于蚯蚓，
3、属分解者；而硝化细菌和蓝藻为生产者，兔子是消费者。7在进行分离分解尿素的微生物的实验中，要进行灭菌，下列对灭菌的理解中，不正确的是A防止杂菌污染B培养基和相关器具都必须灭菌C灭菌就是杀死培养基中的一切细菌D灭菌必须在接种前解析灭菌的目的是防止杂菌污染，获得纯净培养物；培养基和相关器具都需要灭菌；培养基的灭菌是杀死其中的一切微生物，而不只是细菌，且灭菌必须在接种前。8尿素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于培养基中加入了A葡萄糖 B酚红CNaCl D尿素解析尿素分解菌的选择培养基以尿素为唯一氮源，能够分解尿素的微生物可生长繁殖，而不能分解尿素的微生物则会被淘汰，从而起到选择尿素分解菌的作用。9
4、尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时A葡萄糖在培养基中含量越多越好B尿素在培养基中含量越少越好C尿素分解菌有固氮能力，培养基中的尿素为无机氮D尿素分解菌无固氮能力，培养基中的尿素为有机氮解析葡萄糖是微生物最常用的碳源，但在培养基中不能加入过多，否则，会使细胞无法吸水而死亡；尿素在培养基中可以提供氮源，加入要适量而非越少越好；同时尿素是尿素分解菌的有机氮源，而不是无机氮源，在分解过程中，尿素会被尿素分解菌分解为氨。10果胶酶常在0 4 下保存，其原因是A此温度条件下，酶的活性最高B此温度条件下，酶变性失活C低温可降低酶的活性，但酶不变性失活D自然条件下，果胶酶常在0 4 下发生催化作用解析
5、酶的活性受温度影响。酶都有一个最适温度，但果胶酶的最适温度是45 50 ，而不是0 4 。保存果胶酶时，降低温度，使其活性降低，但酶并不失活，当温度恢复到适宜时，酶的活性也恢复最高。11加工橘子罐头，采用酸碱处理脱去果皮（橘络），会产生严重污染。目前使用酶解法去除橘络，可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物，不可以大量产生所用酶的是A生长在麦麸上的黑曲霉B生长在酸奶中的乳酸菌C生长在棉籽壳上的平菇D生长在木屑上的木霉解析本题考查酶的专一性。橘络的主要成分是纤维素，要将其分解需要纤维素酶，麦麸、棉籽壳、木屑的主要成分也是纤维素，所以生长在上述三种成分的黑曲霉、平菇、木霉肯定能产生纤维素酶，
6、所以可以利用。而乳酸菌的培养基为酸奶，其主要成分是蛋白质，不含纤维素，所以乳酸菌不能产生纤维素酶。12关于固定化酶技术的说法正确的是A固定化酶技术就是固定反应物，将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C固定化酶中的酶无法重复利用D固定化酶是将酶固定在一定空间的技术解析本题主要考查对固定化酶的概念及其作用特点的理解和掌握。固定化酶是指通过物理或化学的方法，将水溶性的酶与不溶性的载体结合，使酶固定在载体上，并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。因此，固定化酶技术固定的不是反应物而是酶。而被固定的只是一种酶，所以不能催化一系列的酶促反应，但固定的酶可以重复利用。
7、13下列关于果胶酶的叙述，不正确的是A是特指一种酶B是指一类酶的总称C能分解果胶，瓦解植物的细胞壁D果胶甲酯酶是果胶酶的一种解析果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括果胶酶和果胶甲酯酶等。14研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将从大肠杆菌中提取的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成的制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的A温度 BpHC水分 D营养解析微生物降解有机磷农药时，需要营养物质，而固定化酶却不需要营养物质。15某校学生尝试用琼脂作载体，用包埋法固定淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。实验结果见下表（假设加入试管中的固定化
8、淀粉酶量与普通淀粉酶量相同）。实验表明1号试管中淀粉未被水解，你认为最可能的原因是（）1号试管2号试管固定化淀粉酶普通淀粉酶淀粉溶液60 保温5 min，取出冷却至室温，滴加碘碘化钾溶液现象变蓝不变蓝A.实验中的温度过高，导致固定化淀粉酶失去活性B淀粉是大分子物质，难以通过琼脂与淀粉酶接触C水浴保温时间过短，固定化淀粉酶未将淀粉水解D实验程序出现错误，试管中应先加入碘碘化钾溶液后保温解析由于固定化酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物质，它不能通过琼脂与酶接触，导致淀粉不能被水解而遇碘碘化钾溶液呈现蓝色。二、非选择题（本大题共8小题，共70分）16（9分）果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，常用于果
9、汁的生产。（1）果胶酶用于果汁生产，是因为它能分解果胶，可解决果肉出汁率低和_等问题。（2）果胶由_和_组成。（3）若要检测苹果汁中是否还含有果胶，可取一定量的果汁与_混合，若出现_现象，说明果胶还没有被完全分解。（4）如图为某同学进行的澄清苹果汁生产实验，下列相关叙述正确的是A实验中所用的固定化果胶酶可由某些物质吸附，吸附后的酶可连续使用B果胶酶是一类催化剂，其本质是RNAC植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶D果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊（5）固定化酶技术是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使酶能与_接触，又能与_分离。（6）在“淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”
10、这一实验中，淀粉酶固定在石英砂上，使用了下图中的_。答案（1）果汁浑浊（2）半乳糖醛酸半乳糖醛酸甲酯（3）乙酸浑浊（4）A（5）底物（反应物）产物（6）17（8分）请回答下列与大肠杆菌有关的问题：（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于_，它的异化作用类型是_。从细胞壁被革兰氏染色剂的着色情况看，大肠杆菌属于革兰氏_菌。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行_，操作者的双手需要进行清洗和消毒。（3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜时间后，观察培养基上是否有_产生。若用大肠杆菌进行
11、实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。（4）利用培养基不仅可以分离、培养微生物，在植物组织培养的过程中，也要配制培养基，培养基根据是否加入琼脂等凝固剂分为固体、半固体和液体培养基，若将大肠杆菌进行扩大培养则用_培养基，若是将大肠杆菌进行分离，则用_培养基。解析大肠杆菌的代谢类型为异养兼性厌氧型，它属于革兰氏阴性菌，在生态系统中属于分解者。（2）操作过程中为了防止杂菌污染，需对培养基和器皿进行高压蒸汽灭菌。（3）为了排除培养基被污染的可能性，应把未接种的培养基在适宜温度下放置一定的时间，观察有无菌落产生。（4）大肠杆菌分离时用的是固体培养基，而在扩大培养时用
12、的是LB液体培养基。答案（1）分解者兼性厌氧型阴性（2）灭菌（3）菌落灭菌（4）液体固体18（9分）尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用、才能被植物吸收利用。某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：K2HPO4NaClH2O葡萄糖尿素酚红琼脂0.12 g15 mL0.025 g2.0 g0.25 mg0.5 g（1）分解尿素的细菌都能合成_，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？_。写出细菌分解尿素的反应式。_。（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？_（能/不能），原因是_。（3）分离得到分解尿
13、素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择_培养基进行培养。培养一段时间后，使用_对微生物细胞进行计数。计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性？_。A计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数B如果方格内微生物细胞数量多于300个，培养液先稀释后再计数C如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞D压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”。为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用_技术。解析（1）含有脲酶的细菌通过降解尿素为氨获得生长的氮源，从而也起到维持生物圈中氮元素平衡的作用。（2）从培养基的成分看，因为含有琼脂，
14、所以不能分离出分解尿素的细菌，因为琼脂是一种未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。（3）扩大培养需要使用液体培养基，对微生物或者酵母菌等进行计数时常用血细胞计数板。计数过程需要注意操作规范，如A选项所述的操作会影响计数的准确性，应该把试管振荡数次，使细菌分布均匀后取样。（4）固定化酶技术可以提高酶的利用率。答案（1）脲酶参与了氮循环（或维持氮平衡）（NH2）2COH2O2NH3CO2（分子式、符号、条件缺一不可）（2）不能琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物（3）液体血细胞计数板A（4）固定化酶19
15、（7分）请回答微生物培养和分离的有关问题：（1）欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌：以_为唯一氮源且加入了_指示剂的培养基，用_法分离细菌。若培养基平板上有菌落存活且颜色变_，则说明分离成功。（2）分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基，其成分_。A前者含琼脂，后者不含琼脂和琼脂糖B两者都含有琼脂C前者含有琼脂糖，后者不含琼脂糖但含琼脂D两者都不含琼脂和琼脂糖解析（1）分离能利用尿素的细菌，只需以尿素为唯一氮源，加酚红作指示剂，采用涂布分离法分离细菌，只要培养基中的指示剂变红，标志着存在脲酶水解尿素的作用，证明菌株可以以尿素为氮源。（2）分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂
16、糖，而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂。答案（1）尿素酚红涂布分离（或涂布）红（2）C20（10分）下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基的配方。试剂用量牛肉膏5 g20 g蛋白胨10 g水1 000 mLNacl请回答：（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、_、_和无机盐。（2）该培养基配制完成后，一般还需调节pH并对培养基进行_处理，实验过程中为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_附近操作。（3）在土壤中分离纯化细菌最常用的方法是_和_。在分离纯化前需将菌体放入液体培养基中_，在固体培养基上划好线后须将培养皿倒置的原因是_。（4）实验结束后，使用过的培养
17、基应进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是_。解析（1）各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、生长因子和无机盐。（2）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染，培养基配制完成后，需进行灭菌处理，在实验过程中，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。（3）在土壤中分离纯化微生物最常用的方法是划线分离法和涂布分离法。在分离纯化前需将菌体放入液体培养基中扩大培养。划线后将培养皿倒置的原因是防止皿盖上的水珠落入培养基中，造成污染。（4）用过的培养基不可随便丢弃，一定要进行灭菌处理，以免污染环境。答案（1）氮源生长因子（2）灭菌酒精灯火焰（3）划线分离法涂布分离法扩大
18、培养防止皿盖上的水珠落入培养基中，造成污染（4）防止造成环境污染21（10分）工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出汁率，为探究温度对果胶酶活性的影响，某学生设计了如下实验：将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在10 水浴中恒温处理10 min（如图A）。将步骤处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10 水浴中恒温处理10 min（如图B）。将步骤处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图C）。在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量，结果如表：温度/1020304050607080果汁量/mL81315251211根据上述实验，请分析回答下列问题：（1）果胶酶能破除植物细胞壁
19、，是因为果胶酶可以促进细胞壁中果胶的水解，产物是_。（2）实验结果表明，当温度为_左右时，果汁量最多，此时果胶酶的活性_。（3）为什么该实验能够通过测定过滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低？_（4）果胶酶作用于一定量的某种物质（底物），保持温度、pH在最适值，生成物量与反应时间的关系如图。在35 min后曲线变成水平是因为_。若增加果胶酶浓度，其他条件不变，请在图中画出生成物量变化的示意曲线。解析从实验数据分析：在40 附近时，果汁量最多，说明此时的果胶酶催化活性最高。因为底物的量是一定的，所以底物消耗完时，生成物的量达到最大值，其后不再发生变化；增加酶的浓度可以使反应更快地达到平衡
20、点，即更早结束反应，但生成物的总量不会发生变化。答案（1）半乳糖醛酸（2）40 最高（3）果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分子物质可以通过滤纸，因此苹果汁的体积反映了果胶酶催化分解果胶的能力（4）底物消耗完毕如图22（7分）如图为固定化酶的反应柱示意图，请据图回答：（1）请在横线上填出各标号的名称。_；_；_。（2）与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是_。固定化细胞的优点是_。（3）的作用是_。（4）制作固定化淀粉酶所用的方法是_。解析与一般的酶制剂相比，固定化酶不仅能与反应物充分接触，还能与产物分离，并且可以反复利用。但是与固定化细胞相比，固定化酶不能催化一系列的化学反应，并且固定化细胞成
21、本更低，操作更容易。使用固定化酶技术往往利用一个反应柱，下端有一个分布着小孔的筛板，酶颗粒无法通过筛板，而反应溶液却可以自由出入。制作固定化淀粉酶的方法是吸附法。答案（1）反应柱固定化酶分布着小孔的筛板（2）既能与反应物充分接触，又能与产物分离并且能被反复利用成本更低，操作更容易（3）使酶颗粒无法通过，反应溶液却可以自由出入（4）吸附法23（10分）某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。（1）图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是_。黑曲霉提取液中含有的_可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过_方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去_。（2）实验中，操作流程
22、A和B的先后顺序为_。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的_混合，如果出现_现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调_。（3）实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被_使用。解析（1）KMnO4有杀菌消毒的作用，可将苹果表面的杂菌杀死。果汁中因含有果胶等而使苹果汁浑浊，用果胶酶处理可使果胶水解，使果汁澄清。固定化酶技术是将酶固定在固定化柱的载体上，固定化柱内填充的石英砂可以起到很好的吸附作用。酶被固定后用蒸馏水冲洗是为了除去未被固定的酶。（2）具体操作时，先提取果胶酶，将果胶酶固定在固定化柱中，再将阀2打开，使苹果汁进入固定化柱，与酶接触，固定的果胶酶就能将果汁中的果胶分解，而果胶酶不流失。果胶中的果胶酸钙能与乙醇作用形成沉淀，故可用乙醇鉴定果汁中的果胶，如有浑浊现象，说明果汁中仍有果胶存在，此时应控制阀门2的流量，调慢果汁流速。（3）酶被固定化后，便于与反应物和产物分离，可反复利用，提高酶的利用率。答案（1）消毒果胶酶吸附未被固定的酶等（2）A、B阀1乙醇浑浊（沉淀）慢（3）反复
