1、HPV的致癌机制治疗宫颈癌医学微生物学导论课程论文拮抗Bcl-2 从HPV的致癌机制治疗宫颈癌拮抗Bcl-2 从HPV的致癌机制治疗宫颈癌摘要 自从1972年Kerr提出细胞凋亡的概念至今，人们对细胞凋亡现象进行了广泛、深入 的研究。但是，凋亡的分子和生化机制迄今尚未彻底明了； 而已形成的初步认识大多源于对Bcl-2基因家族的研究。 基于已清楚的Bcl-2与细胞凋亡的联系， 细胞凋亡与宫颈癌的联系,经过小组内以及小组间的讨论和查阅有关资料，找到了 Bcl-2与宫颈癌的治疗的关系。关键词 HPV、Bcl-2、宫颈癌的治疗.、八 、-刖言癌症是当今世界最难攻克的顽症之一，是一个全球性公共健康问题。
2、卫生部公布的调查结 果显示，2006年我国无论是城市还是乡村，恶性肿瘤死亡率均位居致死疾病之首，占死亡 原因的20%以上，且增幅最大。在我国，癌症已成为威胁人民健康的第一杀手。其中宫颈 癌又是严重威胁女性健康的疾病之一。 因此，研究宫颈癌的发病机制，找到治疗宫颈癌的有效方法是医学研究的一项重要工作。主体HPV的分类1995年世界卫生组织中的国际癌症研究所正式提出高危型人乳头状瘤病毒(HPV感染是宫颈癌发病的主要原病因。到目前为止已经发现具有不同核苷酸序列的 HPV共200多种，其中85种的 基因型已经确定。病毒根据其组织嗜异性的不同分为皮肤型和黏膜型。 皮肤型主要感染手部和足部的皮肤而黏膜型主
3、要感染泌尿生殖道、 口腔、喉部和呼吸道的黏膜。感染女性生殖道的HPV勺有30种，根据其致癌能力的大小又被分为两类： HRHP包括 HPV16 18、31、33、34、35、39、45、51、52、56、58、59、66、 68和70,主要引起高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈浸润癌， 其中最常见的是HPV16 和18型；低危型HPV包括HPV6 11、42、43和44,主要引起良性的生殖道 疣和低级别宫颈上皮内瘤变 CINI。3HPV的流行病学宫颈癌是妇科常见的恶性肿瘤之一， 在发达国家如北美、欧洲的国家其发病 率远低于乳腺癌、子宫内膜癌及卵巢癌；而在一些发展中国家其发病率却高居首 位。国际癌症研究生
4、估计，全世界每年大约有 50万新发病例，其中80%勺病例发生在发展中国家。我国每年的新发病例在 13.5万例左右，约占全世界宫颈癌新发病例的 29.0%。近 50 年来我国广泛开展宫颈癌筛查工作，使宫颈癌的发病 率和死亡率都明显下降；但由于今年来人乳头状瘤病毒（HPV感染者急剧增多, 使得宫颈癌发病率在我国某些地区呈明显上升趋势，且患者趋于年轻化。 1流行病学、流行病学特点（一）地理分布特点 不同的国家宫颈癌的发病率和死亡率有着较大的差异。 同发达国家相比, 发展中 国家宫颈癌的发病率和死亡率均较高。世界卫生组织（ WHO 报道,宫颈癌发病率最高的国家是智利（ 15.4/10 万）其次是中国（
5、 14.6/10 万）第三是委内瑞拉 （11.2/10 万） ；日本最低（ 2.4/10 万）。在我国宫颈癌的分布主要是在中西部地 区, 20 世纪 90 年代死亡抽样调查结果显示,宫颈癌死亡率超过 5/10 万以上者 有甘肃、陕西、湖南、江西、新疆、内蒙古等省自治区,形成一个自北向南的高 死亡率的条形地带,并且整体呈现的分布特点是农村高于城市,山区高于平原。 如湖北五峰县鱼关区、 陕西略阳县、 甘肃武都县、 江西靖安县均为全国的高发地 区,而且这些地区的发病率和死亡率高居不下； 死亡率较低的有北京、 上海等地。 地理分布特点反应了宫颈癌的发病率与经济发展状况密切相关, 但并非是唯一的 影响因
6、素。 2（二） 人群分布特点1、 年龄 我国的普查资料显示,在 30 岁以上的妇女中,宫颈癌的发病率随年龄 的增加而明显升高，44岁49岁是高发年龄组，之后宫颈癌发病率呈下降趋 势。但是近几年宫颈癌发病人群有年轻化的趋势。研究表明这可能跟性因素及HPV感染等有关。2、 民族 同一地区不同民族的居民， 其宫颈癌发病率也有所不同， 发病率最高的 民族多为本地区民族或长期移居该地区的少数民族。另外移居的居民中其宫 颈癌和环境的因素也有关，例如从高发地区移民至低发地区的人群，其宫颈 癌发病率要低于其原籍居民。我国少数民族中，宫颈癌死亡率最高的前三位 分别是维吾尔族（ 17.27/10 万）、蒙古族（
7、15.72/10 万）和回族（ 12.29/10 万）；而苗族、藏族和彝族的发病率较低。3、 社会经济状况和职业 一般来说，社会经济状况低下的妇女的宫颈癌发病率较高。我国宫颈癌发病率分布的特点也反应出在经济状况差的地区妇女宫颈癌 发病率较经济状况好的地区显著升高。天津肿瘤研究所根据 20世纪 80 年代相关报道资料分析发现 3265 岁宫颈癌职业发病率在经济、 文化和卫生水平 较低的农业人口和从事装卸、建筑、制革、皮毛业的女工中较全市区同龄妇 女人群的发病率高十至数十倍。 2（三） 时间分布特点WH统计28个发达国家，从1960到1980年间宫颈癌的死亡率下降了 30% 而我国自 20世纪 5
8、0年代末期开展了宫颈癌普查防治工作以来， 全国宫颈癌 的死亡率由 20世纪 70年代的 10.28/10 万下降到 20世纪 90年代的 5/10 万，下降了 69%。但是今年很多国家包括德国、挪威、英国、美国部分地区及中国等出现一个新的现象是年轻妇女的宫颈癌发病率呈上升趋势， 这可能 与性自由程度如早年性生活、多个性伴侣等危险因素增加有关。 2二、流行因素（一） HPV感染生殖道 HPV 感染与宫颈病变及宫颈癌的关系最早由德国病毒学家 zur-Hausen提出。通过流行病学研究和病原学研究，已经明确 HPV感染是 宫颈癌前病变和浸润性宫颈癌发生的必要条件。 1（二） 性行为初次性交年龄过早、
9、 多个性伴侣盒宫颈癌密切相关。 研究结果显示， 宫颈癌 妇女较对照组妇女有更多的性伴侣， 且患病的危险性与性伴侣数成正比。 报 道表明，有婚外性伴侣（1个或 2个以上） 发生宫颈癌的相对危险度为 1.08 和4.31.Velema等研究报道20岁以上开始性生活的妇女患 CIN的风险较16 岁以前开始者降低 50%以上；16 岁以前开始性生活的妇女宫颈癌发病率是 20 以后者的 2 倍多。一些学者研究发现，配偶的性行为及其他行为对妇女 宫颈癌发病也有影响作用。宫颈癌配偶的性伴侣数较对照组的性伴侣数为 多；宫颈癌患者的配偶大多有各种性病史，包括生殖器疣、淋病、生殖器疱 疹等；男性阴茎癌患者的妻子较
10、其对照组妇女患宫颈癌的危险性高 36倍。 另外，前妻患宫颈癌的男性， 其仙子阿的妻子患宫颈癌的危险较对照组妇女 高约 2 倍；包皮环切者的妻子患宫颈癌的相对危险性很低， 使用避孕套可以 降低患宫颈癌的危险性。（三） 分娩因素 早孕、多孕多产与宫颈癌的相关性已被证实。 我国台湾地区 19911994年的 资料显示：阴道分娩4次者与w 1次者相比较，前者患宫颈癌的危险性较 后者增加了 2 倍。随着分娩次数的增加， 患宫颈癌的风险亦增加。 此相关性 可能为分娩对宫颈的创伤及妊娠对内分泌及营养的改变所致。 此外，还发现 妊娠妇女HPV检出率很高，很可能是妊娠期免疫功能低下，促使病毒的活性 增高所致。（
11、四）口服避孕药 关于妇女口服避孕药是否会增加宫颈癌发生目前还存在争议。 Beral 等对 46000名妇女 25年的随访表明，口服避孕药是宫颈癌发生的治病因素。 WHO关于肿瘤与甾体类避孕药的多中心协作研究发现， 使用避孕药的妇女患宫颈 癌的危险性增加，并且用药时间越长，危险性越大。最近资料显示，单纯口 服避孕药与宫颈癌之间无显著相关性，但具有协同其他危险因素如HPV感染 等致癌的作用。（五）吸烟1977年， Winkelstein 首次提出吸烟可能与宫颈癌发病有关的假设。 后许多 研究发现，吸烟室宫颈癌发病的高危因素。 在吸烟者的宫颈黏膜中可以检测 到烟草中特有的致癌成分如尼古丁、亚硝胺等。
12、 Gram等研究表明吸烟年限、每日吸烟量及初始吸烟年龄均与宫颈癌发病有关。 这不仅是由于烟草中含有 许多致癌物质， 还因为吸烟会影响体液和细胞免疫功能， 阻碍抑癌基因起作 用，从而可能会增加感染HPV的机会及加强HPV的致癌作用。常见病因根据大量流行病学资料和相关研究认为与宫颈癌相关的危险因素主要 包括以下几类：第一类为生物学因素，包括病毒、细菌、衣原体等各种微生 物的感染；第二类是行为危险因素，诸如性生活混乱、多孕多产、口服避孕 药、吸烟、营养不良等；第三类是机体免疫因素，包括外源性和内源性免疫 抑制剂，如药物、 HIV 感染等；第四类是遗传易感性，目前仅有少量研究表 明宫颈癌可能存在着家族
13、聚集现象。 2、生物学因素人乳头状瘤病毒（HIV）是宫颈癌发生的最主要致病因子；生殖系统感染尤其 是性传播疾病也与宫颈癌密切相关。（一） HPV宫颈癌的发生是一个复杂的病理过程， 而近几年来的分子生物学研究已证实： 人 乳头状瘤病毒的持续感染时宫颈上皮内瘤样病变 （CIN） 及宫颈癌的主要致病因 子，HPV感染和宫颈癌的相关度甚至高于吸烟和肺癌的关系。在一项全世界范围 内上千例宫颈癌的研究中发现宫颈癌患者 HPV的感染率达到99.7%。（二） 单纯疱疹病毒 -2 （ HSV-2）是首先被认为与宫颈癌发生有关的一种病毒。 研究表明从宫颈活检中发现 25%患 活动性HSV-2病毒感染的患者，将会发
14、生宫颈上皮内瘤样病变或浸润性宫颈癌。其次，实验检测表明宫颈癌患者血清中 HSV-2抗体浓度较对照组明显升高，并在 宫颈癌组织中分离出HSV-2病毒的DNA和mRNA此外，在一项体外实验中发现， HSV-2可转变大田鼠的正常细胞，并使其他大田鼠产生肿瘤。（三） 人巨细胞病毒（ HCM）VHCM同属疱疹病毒家族。用原位杂交方法在宫颈癌活检组织中测得了 HCMV-DNA相关序列。HCM具有致癌的潜在能力，患者可长期隐性感染而无明显临床症状。（四） 人免疫缺陷病毒（ HIV） 报道显示患获得性免疫缺陷综合征的妇女宫颈癌的发病率亦高， 这可能与免疫抑 制导致的HPV易感相关。研究还发现HIV的tat蛋白
15、可以上调HPV的两个主要致 癌基因E6和E7的表达。并且HIV阳性患者发生宫颈癌后，往往期别晚，进展快， 且对治疗不敏感。、行为危险因素（一） 吸烟现已证实吸烟能降低免疫力，增加宫颈癌患病风险，是宫颈癌的危险因素之一。 高危HPV感染妇女主动及被动吸烟者发生高度鳞状上皮内病变是危险度增加。 在控制了其他各种因素后发现吸烟的影响依然存在。 大多数的研究结果显示吸烟者 宫颈癌的危险性增加2倍，高危患者大多为长期大量吸烟者。 Gram的研究表明 吸烟年限、每日吸烟量及初始吸烟年龄均与宫颈癌发生相关。（二） 性行为早在19世纪 40年代，一位意大利医生从死亡登记资料分析中发现， 患宫颈癌的 妇女大多数
16、为已婚者， 未婚者很少， 而修女几乎不患宫颈癌， 因此他提出结婚与 否和宫颈癌发生有关。 人们首先从修女中宫颈癌极为罕见这一现象认识到宫颈癌 可能与婚产情况及性混乱有关，继之这一观点得到大量流行病学资料证实。（三）月经及分娩因素 研究发现经期及产褥期卫生不良者与对照组间发生宫颈癌的相对危险度为 2.27. 而早育、多子女亦是造成宫颈癌的重要诱因。 宫颈癌的发生率随妊娠次数的增加 而递增，一项多中心的研究发现妇女分娩的次数与宫颈鳞状细胞癌的危险性之间 有直接的联系：分娩7次者患宫颈癌的危险性是没有分娩女性的 3.8 倍，是分娩 1 次或 2 次妇女的 2.3 倍。（四）避孕方法流行病学资料表明，
17、长期使用口服避孕药的女性患 CIN的风险增加，使用5年以 上的女性发病率增加 2 倍。而使用避孕套， 杀精药膜则可降低宫颈癌发病率。 口 服避孕药可引起叶酸缺乏， 导致致癌物代谢下降被认为是危险性增加的机制。 但 目前尚无确凿的临床依据需要采用停用口服避孕药以治疗宫颈癌。（五）饮食营养因素食物中维生素A或胡萝卜素缺乏可致CIN和宫颈癌的危险性增加。饮食中多摄入 维生素A、维生素C、维生素E,且提高某些微量营养素的循环浓度是控制宫颈 肿瘤发生的保护因素。三、免疫因素外源性或内源性免疫抑制均可增加宫颈癌的发病危险性。机体系统免疫能力 下降或局部免疫功能缺陷可致 HPV病毒清除能力下降，导致病毒持续
18、感染状态， 从而增加了发病率。研究发现肾移植患者由于长期使用免疫抑制剂， 其CIN的发生率为常规人群的16倍。同样，艾滋病女性患者由于免疫机制被破坏， CIN及宫颈癌的发生率明显增加， 且浸润前病变的治疗失败比例亦增高。 系统性免疫抑 制疾病如霍启金病、白血病和胶原血管疾病都与 HPV相关疾病的发病率增高和难 治性有关。四、遗传因素目前尚未发现宫颈癌有家族聚集现象。研究表明某些 HLA基因型在宫颈癌患 者中较正常更为常见，说明宫颈癌易感性可能部分由调节对 HPV免疫反应的先天 遗传因素所决定。在间变细胞及癌细胞中HLA-1类抗原下调，而HLA-1对于识别 病毒抗原十分重要， 相反正常宫颈上皮细
19、胞不表达的 HLA-1 类抗原在宫颈癌细胞 表面都可发现病变部位的角化细胞与抗原呈递细胞相似， 说明他们可能直接参与 免疫监视，但宫颈癌是否具有遗传易感性尚不确定。HPVDN基因组及其致癌机制（一） HPVDN基因组HPV是一组无包膜的小型双链环状 DNA病毒，属于乳多空病毒 A亚群。病毒 有蛋白衣壳和DNA核心组成。蛋白衣壳有主要衣壳蛋白和次要衣壳蛋白组成。 DNA基因组为环状双链DNA约含7900个碱基对。按照功能将基因组分成 3 个区：即长控制区、早期区和晚期区。LCR是位于上游的非编码区，含4001000 个碱基对，该区域包含一个p97核心启动子、增强子和沉默子，主要通过控 制开放阅读
20、架的转录调节病毒 DNA勺复制。早期区，长约4500bp,包含E1、 E2、E4 E5 E6和E7,其编码蛋白主要参与病毒的复制、转录和细胞转化。 E1和E2蛋白通过结合LCR上特定的DNA序列，调节其他基因的转录。环状 HPV病毒在整入到宿主细胞的基因组时， E1和E2间的开放阅读架断开，致使E2基因丢失或灭活，继而出现 E6和E7编码蛋白持续表达和过度表达。 E4编码蛋白主要调节病毒的复制和成熟，并具有破坏宿主细胞骨架的作用。 E6和E7基因参与病毒复制的调控及细胞恶性转化。 晚期区约长2500个碱基 对，主要编码 L1 和 L2 两个结构蛋白组成病毒的外壳。病毒基因组的变异主 要发生于该
21、区域。 3（二） 病毒的复制和转录病毒在进入上皮的基底层细胞后即开始复制， 并随着宿主细胞的分化和移性 而不断增殖。在基底层细胞中，每个细胞周期病毒只复制一次；而在上层的 角化细胞中，病毒复制拷贝数明显增加并合成病毒外壳。病毒基因组和宿主 基因组的相互作用首先启动 E6好E7蛋白的转录合成。E6和E7蛋白产物通 过和宿主抑癌基因蛋白p53和pRB细胞周期因子和细胞周期素依赖激酶的 相互作用而影响宿主细胞的增殖。E5蛋白的合成促使与有丝分裂相关的蛋白 激酶的活性增加，致使宿主细胞不断增殖而延缓细胞分裂。随后 E1和E2蛋白产物合成，E2蛋白阻止E6和E7蛋白的转录，并促使E1蛋白和位于LCR 的
22、病毒复制起始点结合。E2蛋白降调节E6和E7蛋白的表达，是p53和pRB 蛋白释放，从而使宿主细胞恢复正常的分裂。最后病毒外壳蛋白合成， E4蛋白在促使病毒成熟和释放中起重要作用。（三） 病毒的致癌机制HPV勺致癌作用主要和E6和E7蛋白有关。E6蛋白结合p53蛋白，并通过细 胞泛素结合连接酶降解p53蛋白。使p53蛋白的正常功能受损，后者参与细 胞凋亡、DNA的修复剂细胞周期G1期的抑制。E7蛋白产物和pRB的去磷酸 化型结合，结果影响pRB和细胞转录因子E2F-1复合物的形成，E2F-1的游 离促使进入S期必必需基因的转录，结果促进细胞中DNA勺合成、细胞增殖， 而使DNA修复受损。这些受
23、损的DNA各导致癌基因的活化、染色体的不稳定、 DNA的甲基化和端粒体酶的活化等，最后基因组突变的不断积累将促使细胞 的转化。从拮抗抗凋亡 Bcl-2 蛋白表达的角度治疗宫颈癌自从 1972年 Kerr 提出细胞凋亡的概念至今， 人们对细胞凋亡现象进行 了广泛、深入的研究。但是，凋亡的分子和生化机制迄今尚未彻底明了；而 已形成的初步认识大多源于对 Bcl-2 基因家族的研究。已知，凋亡进程可分 为三个时相：诱导期、效应期和降解期。在诱导期，细胞接受各种信号从而 引发各种不同的效应； 进入效应期后， 经过一些决定细胞命运的分子调控点， 细胞进入不可逆的程序化死亡， 这些调控分子包括一系列原癌基因
24、和抑癌基 因的产生，其中 Bcl-2 家族起着决定性作用； 降解期则产生可见的凋亡现象。Bcl-2基因（即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因）是一种原癌基因，它具 有抑制凋亡的作用，并用近年来的一些研究开始揭示这一作用的机制。目前 已经发现的 Bcl-2 蛋白家族按功能可分为两类： 一类是像 Bcl-2 一样具有抑 制凋亡作用，如哺乳动物的 Bcl-xl、Bcl-w、Mcl-1、A1、线虫ced-9、牛痘 病毒E1B119kD等;而另一类具有促进凋亡作用，女口 Bax、Bcl-xs、Bad Bak、 Bik/Nbk、Bid 和 Harakiri 等。1最初在血液淋巴细胞中发现 Bcl-2 能抑制细胞
25、死亡， 然后陆续在其他一 些细胞中也发现 Bcl-2 的这种作用。但是近年来的研究发现，除此之外尚存 在 Bcl-2 不敏感的凋亡途径。 1一、作用机制（一） Bcl-2 敏感的凋亡途径Bcl-2 可以抑制由多种细胞毒因素所引起的细胞死亡。 Bcl-2 的过度表达能增 强所观察细胞对大多数细胞毒因素的抵抗性。 这一发现使人们认识到凋亡的各种 信号转导途径有一个共同的通路或交汇点， 而该通路或交汇点手 Bcl-2 调节。实 验表明，Bcl-2可增强细胞对大多数DNA损伤因子的抵抗性，抑制大多数化疗药 物所引起的靶细胞凋亡，但其本身并不能抑制这些因素对细胞的损伤；同样地， 它也不能促进DNA修复。
26、P53蛋白是DNA损伤的一个分子传感器，已证实 Bcl-2 能抑制p53介导的凋亡，但不能抑制p53向核内转位或者p53介导的生长停滞， 可能Bcl-2的作用是在DNA损伤后，阻止激活凋亡机制的信号到达其靶分子； 在细胞毒性T细胞中，有颗粒酶B激活Caspases家族的一个或多个半胱氨酸蛋白 酶所诱导的凋亡不依赖于Bcl-2，颗粒酶B可能仅作用于凋亡途径中Bcl-2调节 位点的下游。以上结果表明在调节途径中 Bcl-2 的作用位点在信号分子和效应蛋 白酶之间的位置。Bcl-2 抑制细胞凋亡可能与以下几种作用有关：1.催抗氧化作用 以往研究表明， 在去除生长因子所诱发的凋亡中， 活性氧 损伤是促
27、发细胞死亡的主要因： Bcl-2 的过度表达可减少氧自由基产生和脂 质过氧化物的形成。 实验研究表明 Bcl-2 的抗氧化作用是间接的， 即可能在 于抑制超氧阴离子的产生而不是直接清除活性氧。细胞色素C作为呼吸链中 重要的电子传递体， 它从线粒体内膜上的释放会阻断电子向下游传递， 危及 呼吸链的功能并导致超氧阴离子的加速产生；而Bcl-2可以抑制Cyt C的释 放，从而抑制了超氧阴离子的产生。此外， Bcl-2 还可以增加胞内谷胱甘肽（GSH，升高NAD/NAD的比值，抑制和凋亡相联系的 GSH降低，促进GSH 进入核内， 从而影响细胞的氧化还原状态。 但也有证据表明， 在没有自由基 的情况下
28、 Bcl-2 也能抑制凋亡。因此， Bcl-2 的性质远非仅仅是一种抗氧化 剂。2.抑制钙离子跨膜流动 Lam 等曾报道钙泵特异性抑制剂 Thapsigargen （TQ诱导的 WEH17.2等细胞的凋亡可被 Bcl-2所抑制，其原因是 Bcl-2抑制了钙离子的跨膜流动， 提示 Bcl-2 可通过调节胞内钙离子浓度来调节凋 亡。然而，Wei等在神经元细胞GT1-7发现Bcl-2中可抑制由TG所诱导的凋亡，但并不能抑制TG诱导的胞内钙离子浓度升高；同时 Jason等在中国 仓鼠卵巢细胞5AHSmy中去除细胞内贮存的钙离子后发现过度表达的 Bcl-2仍可抑制凋亡， 提示 Bcl-2 对胞内钙离子浓
29、度的调节作用也只能是其抑制凋 亡的机制之一。3.离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白 最近Reed发现Bcl-2蛋白可能具有双重 功能：离子通道蛋白和吸附 /锚定蛋白，提出 Bcl-2 抑制凋亡的部分新机制。离子通道蛋白体外实验证实， Bcl-2 、Bcl-xl 和 Bax 能在线粒体上形成 离子通道，提示它们可能参与调节一些与凋亡相关的细胞现象， 如线粒体通 透性改变（巨孔形成）和线粒体释放凋亡蛋白酶激活因子 CytC 和凋亡 诱导因子（AIF）。过度表达的Bcl-2能抑制线粒体通透性改变，并影响巨孔 的形成，从而抑制凋亡。但也有实验发现即使线粒体通透性未改变， CytC 等凋亡蛋白酶激活因子也可以
30、释放到胞液中从而诱发细胞凋亡， 因此这一观 点还有待进一步证实。在所观察的细胞系及多种情况下，凋亡的发生都伴有 CytC 从线粒体释 放，继而伴有Caspases激活，而活化的Caspases降解底物后，其代表降解 产物有引起线粒体通透性改变，并最终导致凋亡发生。 Yang 等与 Kluck 等 发现 Bcl-2 可以通过抑制线粒体释放 CytC 来抑制凋亡，继而 Rosse 等和 Zhivotovsky等用两种不同的方法证明了即使 CytC已经释放入胞浆，Bcl-2 仍能延迟细胞死亡，这是由于 Bcl-2抑制活化的Caspases对线粒体释放的 上游和下游都有 Bcl-2 调节凋亡的作用点。
31、AIF 作为一种线粒体来源的效应蛋白酶，在分离的胞核中能诱导凋亡， 同时还能激发线粒体通透性改变，诱导线粒体释放 CytC和Caspase-9，并在体外切割和激活其底物一一半胱氨酸蛋白酶 CPP32体外研究发现，Bcl-2过度表达可能阻止AIF从分离的线粒体上释放，但它并不能影响AIF的产生， 同时也不能影响 AIF 促凋亡的功能。此外，吸附/锚定蛋白在正常情况下Bcl-2通过其C端疏水残基的伸展 而锚定在细胞内膜上，作为吸附 /锚定蛋白，可把胞液蛋白固定在膜边，或 是引导胞液蛋白与别的膜蛋白相互作用。Bcl-2 可与 Bcl-2 家族的 Bcl-xl、Bcl-xs、Bax、Bcl-2、Bad
32、 和 Mcl-1 形成同源的蛋白二聚体， 而特定的蛋白二聚体则可作为在细胞死亡信号通路 商的分子开关。例如，Bcl-2可与促凋亡Bax形成二聚体，如果Bax相对量 高于Bcl-2，则Bax同二聚体的数量增多，从而促进细胞死亡；而如果Bcl-2 的相对量高于Bax，则促进形成Bcl-2/Bax异二聚体，并使Bcl-2同二聚体 的量增多，从而抑制细胞死亡；而促凋亡分子和 Bad和Bcl-ss则竞争结合细胞死亡抑制分子如Bcl-xl或Bcl-2，由此替换了 Bax并促进Bax同二聚 体形成，诱导凋亡。另外， Bcl-2 还可与 Bcl-2 家族外的 11 种蛋白质结合，包括蛋白激酶 Raf-1、蛋白磷酸酶 Calcineurin、GTF酶、R-Ras 和 H-Ras、p53-BP2、腕蛋 白 Pr-1 、 Ced-4、 BAG-1、 Nip-1 、 Nip-2 和 Nip-3 ，并由此形成其抗凋亡作 用。二） Bcl-2 不敏感的凋亡途径 Bcl-2 抑制凋亡的作用并不
