1、天然产物化学课程设计天然产物化学课程设计论 文题 目： 金银花中绿原酸提取姓 名： XXX学 号： XXXXXXXXX院 系： 理学院化学系专 业： 应用化学X班完成日期： 2012年12 月21 日目录简介2 论文题目2摘要2 关键词2第一部分 金银花与其有效成分的性质2 1.1金银花的性质21.1.1金银花理化成分31.2金银花的有效成分绿原酸3第二部分 金银花中绿原酸的提取分离32.1金银花中绿原酸的醇提法42.2金银花中绿原酸的酶法提取42.3金银花中绿原酸的超声波提取法42.4金银花中绿原酸的微波提取法5第三部分 结论与展望6第四部分 参考文献6 金银花中绿原酸提取摘 要：金银花是忍
2、冬科植物忍冬的干燥花蕾，是常用的功能性植物，绿原酸是其中主要有效成分，具有显著的清热解毒、抗茵消炎以及防腐作用等。通过比较的方法，对金银花中绿原酸的提取工艺进行综述，并展望其提取工艺发展趋势。关键词：金银花；绿原酸；醇提法；超声波法；酶提法；工艺参数Abstract：Flos Lonicerae，dry flower of Lonicera japonica Thumb is a functional plantFlos Lonicerae contains chlorogenic acidsChlorogenic acid is the most effective component，wh
3、ich has marked activities such as detoxification，diminish inflammation，antisepsis and SO onThe extraction process of chlorogenic acid from flos lonicerae is reviewed by comparative methods，as well as the promising potential of the extraction process isforecastedKey words：Lonicera macranthoides；chlor
4、ogenic acid；ethanol refluxing；ultrasonic；enzymes；technical parameters1. 金银花与其有效成分的性质1.1金银花的性质金银花为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或带初开的花。呈棒状，上粗下细，略弯曲，长23cm，上部直径3mm，下部直径1.5mm，表面黄白色或绿白色，密被短柔毛。偶见叶状苞片，花萼绿色、先端5裂，裂片有毛，长约2mm，开放者花冠筒状，先端二唇形，雄蕊5附于筒壁，黄色；雌蕊1个，子房无毛，气清香，味淡微苦。金银花自古被誉为清热解毒的良药。它性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花既能宣散风热，还善清解血毒，
5、用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等证，均效果显著。1.1.1 金银花理化成分挥发油：挥发油是金银花的有效成分之一。目前在金银花挥发油中鉴定出的化学成分多达近70种。主要含芳樟醇、棕榈酸，其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。有机酸类：绿原酸类化合物也是金银花有效成分之一。包括绿原酸和异绿原酸，其他有机酸还有咖啡酸和棕榈酸。黄酮类化合物：1949年冲七太郎首先从金银花中分离出木犀草素，后又得忍冬苷，1995年高玉敏等首次从金银花中分离出四个黄酮类化合物；1996年黄丽瑛等首次分离出corymbosin和5- 羟- 3- 4- 7- 三甲基黄酮1.4 三萜类：
6、娄红祥等从金银花水溶性部分中分离得到3种具有保肝活性的三萜皂苷；陈昌祥从金银花花蕾中分离得到了6个化合物，其中有一新化合物，命名为新长春皂苷F。无机元素：金银花含微量元素共有15种：Fe，Mn，Cu，Zn，Sr，Ti，Mo，Ba，Ni，Cr，Pb，V，Co，Li，Ca。醇类：金银花中鉴定出的醇类主要包括：-谷甾醇，肌醇，二十九烷醇等。1.2金银花的有效成分绿原酸金银花的主要有效成分之一为绿原酸。绿原酸是咖啡酸与奎宁酸（1-羟基六氢没食子酸）的酯，分子中具有羧基、酯键以及多元醇和多酚结构，是一种苯丙素类化合物，化学名为3-O- 咖啡酰奎宁酸，结构式如图1所示。绿原酸的药用历史悠久，具有抗菌、抗病
7、毒等作用，对消化、血液系统和生殖系统疾病均有疗效。近年，绿原酸及其衍生物被确认是大鼠肝微粒体中葡萄糖- 6- 磷酸位移酶的特效性抑制剂，显示出其在治疗糖尿病方面的良好前景。绿原酸也是某些中药制剂质量控制的重要指标。图一 绿原酸的结构绿原酸的提取工艺正是由于绿原酸良好的药用价值以及良好的应用前景，国内外已有不少文献对金银花中绿原酸的分析、测定及提取工艺的研究，但提取方法各不相同。主要流程大致可以分为粗提、分离纯化、成品的制备等步骤。2.金银花中绿原酸的提取分离2.1 金银花中绿原酸的醇提法溶剂提取法是根据天然产物中各种化学成分在溶剂中的溶解性质，选用对活性成分溶解度大，对不需要溶出成分溶解度小的
8、溶剂，将有效成分从金银花组织内溶解出来的方法。溶剂可分为水、亲水性有机溶剂及亲脂性有机溶剂，被溶解物质也有亲水性及亲脂性的不同。石硫醇法是从金银花中提取绿原酸粗品的一种常用方法嘲。该方法先将金银花水煮浓缩，加石灰乳，使水提液中的绿原酸形成难溶于水的钙盐，过滤后将沉淀悬浮于乙醇中，加入50硫酸调pH 34，使绿原酸钙盐分解，产生硫酸钙沉淀析出，绿原酸成为游离酸溶于水中。加人40NaOH中和至pH 6.57，过滤，将滤液浓缩、干燥，得绿原酸粗品。粗品中绿原酸含量一般在20一30之间，收率较低，约12。马希汉等专家对不同溶剂提取金银花中绿原酸类物质的效果进行了比较。结果表明：60的乙醇是一种较好的提
9、取溶剂。将溶剂提取所得粗品溶于水中，用浓盐酸酸化pH为23，用乙酸乙酯反复萃取水相，萃取液用适量活性炭回流脱色，滤液浓缩后加人适量氯仿，析出淡黄色固体，分离后真空干燥，得淡黄色粉末。绿原酸含量在90以上。由于绿原酸在酸性条件下比较稳定，与石硫醇法相比，绿原酸水解的几率较小。2.2 金银花中绿原酸的酶法提取刘佳佳等专家将金银花乙醇回流前，用纤维素酶和果胶酶分别或联合处理，探讨酶的用量、处理时间、处理温度及酶的联合作用对金银花提取物得率和绿原酸得率的影响，优化金银花中绿原酸的提取工艺。纤维素酶处理能显著提高金银花提取物得率和绿原酸得率，绿原酸得率比乙醇回流法提高大约25.97，酶处理最适温度为40
10、50，在一定范围内随着酶用量和处理时间的增加，金银花提取物得率和绿原酸得率增加，采用该工艺绿原酸得率最高可达到8.32。纤维素酶和果胶酶的联合处理对绿原酸得率影响不明显，但能显著提高提取物得率。梅林采用酶法优化提取金银花中的绿原酸，考察纤维素酶的用量、酶解时间、酶解温度及回流提取温度对绿原酸含量的影响；用高效液相色谱法测定绿原酸含量。用纤维素酶法提取金银花可提高绿原酸得率。酶法提取最佳条件为:加入纤维素酶3.0，在46下酶解4h，再在56下浸提1 h；其绿原酸含量为3.57。目前，应用酶法与其它提取方法联用提取金银花中绿原酸的研究报道并不多，并且酶的种类也只有纤维素酶和果胶酶两种。2.3 金银
11、花中绿原酸的超声波提取法府期中等应用超声波法与传统提取方法联用提取金银花中的绿原酸，利用超声波空化作用实现提取液局部高温、高压，加之超声波的机械扰动作用，加快了固液两相之间的传质，从而提高提取率。采用紫外分光光度法测定不同提取工艺下制备的提取物中绿原酸的含量，并与传统的水提法、乙醇回流提取法比较，根据绿原酸的得率及抑菌效果确定金银花提取的优化工艺。试验结果表明：超声波法的绿原酸提取率高于水提法、乙醇提取法，但超声波法、水提法及乙醇提取法制备的绿原酸提取物对大肠杆菌的抑菌效果没有明显差异，其最小抑菌浓度均为250 gg。采用超声波技术对金银花中绿原酸的提取工艺进行了研究，选择超声功率、乙醇浓度、
12、超声时间、料液比为因素进行了正交试验，优选出超声提取的最佳工艺：即以85的乙醇，料液比1：20(质量比)，功率为150 W，超声波处理30 min。李萍等采用超声波法提取金银花中的绿原酸，通过单因素和正交试验，确定了超声辅助提取金银花中绿原酸的工艺条件。获得的提取最佳条件为：超声功率180 W，超声时间18 min，提取时间为15 h。2.4 金银花中绿原酸的微波提取法微波提取技术是利用微波场中，各种物料吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得物质内部产生能量差，被萃取物质得到足够的动力从基体或体系中分离。微波萃取不仅萃取效率高、产品纯度高、能耗小、
13、操作费用少，而且符合环境保护要求，可广泛用于中草药、香料、食品和化妆品等领域。在天然产物的提取方面，自Ganzler等最早利用微波萃取法从羽扇豆中提取了鹰爪豆生物碱后，该技术成为天然产物提取的有力工具。余建平等采用微波法提取了金银花中的绿原酸，所制得的绿原酸粗产品用石油醚脱色、薄层层析分离和紫外分光光度计测定含量，并与超声波法、水提法进行了比较。试验结果表明：微波法对于从金银花中提取绿原酸具有非常好的效果。筛选的最佳微波工艺条件是：微波功率260W，样品预浸润时间为24h，辐射时间15 min，与水提法相比总收率提高了10.59，提取时间缩短75；与超声波提取法相比总收率也提高了2.60，提取
14、时间缩短了5O。且该方法具有操作简单、节能清洁和快速高效等优点，是一种提取金银花中绿原酸的环境友好的先进方法。郭振库等利用具有压力控制附件的MSP2100D专用微波制样系统，通过正交设计方案，用微波辅助提取金银花中有效成分，通过正交试验设计考察了微波提取的条件、溶剂选择、溶剂体积对样品质量比、高的溶剂压力温度和微波辐射时间对金银花中有效成分绿原酸类化合物提取产率的影响。结果表明：在微波辅助提取和超声波提取方法的最佳提取条件下，微波法的提取率和重复性好于超声波法。确定了35乙醇作溶剂，溶剂倍量为30，控制压力0.11MPa，加热时间1min，70微波功率(微波炉最大功率85 W)为微波最佳提取条
15、件。刘志平等l6J采用微波辅助提取金银花中的绿原酸。考察了溶剂种类及浓度、提取时间、液固比、溶剂pH、提取次数等对绿原酸得率的影响；结合正交试验设计确定了绿原酸的最优提取工艺条件：液固比为l5，浓度为40的乙醇溶液提取2次，每次60 s。将优化后的微波提取结果与其他方法比较，结果表明：微波法具有操作简单、快速高效、节能环保等优点。3.结论与展望传统的金银花中有效成分绿原酸的提取工艺大多采用水提取或有机溶剂提取，这些工艺存在提取能耗大、效率低、杂质多、收率少，资源不能得到充分利用等问题。绿原酸为热敏性物质，温度过高，会造成绿原酸的分解，这就要求提取温度不能过高。超声波提取作为一种新型的提取技术，
16、在天然产物提取方面得到广泛的应用，具有被提取活性物质不被破坏，提取时间短、提取效率高等优点，特别适合于热敏性物质的提取；微波提取技术具有短时、快速等特性，从而在活性物质成分的萃取中可有效地保护功能成分和风味物质，并能保护有效物质的充分溶出，微波萃取应用于金银花中绿原酸的提取具有选择性高、重现性好、省时节物、节能环保、萃取效率高、被提取成分的生物活性和化学结构不会被破坏等众多优点，近年来，超声波萃取、微波提取技术在工业上提取金银花中绿原酸的应用越来越普遍。参考文献：1于生兰，张龙，孙玲金银花的研究进展 时珍国医国药，2002，13(8)：4984992刘军海，裘爱泳绿原酸及其提取纯化和应用前景J.粮食与油脂，2003(9)：44463赵琰玲，尹莲金银花化学成分与有效成分提取研究进展J医药导报，2007，26(5);5215234霍德兰,陈永林1 金银花及2种混淆品的紫外光谱鉴别时珍国医国药,1999,10(4):2642645张文政1 金银花绿原酸提取工艺的改进中草药,1982,13(12):14156杜迎翔,刘文英. 复方葛根合剂及葛根中葛根素含量的高效液相色谱分析J. 中国药学杂志,2001,36(5):3367路玫,韦戈,黄雪梅. 反相高效液相色谱法测定心安宁片中葛根素的含量J. 中国现代应用药学杂志,2003,20(4):305
