1、第二章制药卫生与制药用水学习目标学习目的对制药卫生有直观感性认识，为后面章节打基础。知识要求1.掌握 制剂车间洁净区划分和要求2.熟悉 制药卫生的基本要求和重要性；常用的物理灭菌法、化学灭菌法和无菌操作；常用的灭菌参数D值、Z值、F值和F0值的概念；空气过滤机制、空气过滤器的种类和特性。3.了解 空气过滤器的分类；洁净区的布局和不同药品生产操作对洁净度级别的要求；无菌检查法、微生物限度检查方法。能力要求1.能正确选用洁净区生产药品。2.能正确的使用灭菌法进行灭菌。第一节 概述一、制药卫生的概念和范围二、制药卫生的重要性三、制药卫生的基本要求环境要求厂房设备物料人员一、概述洁净区的设计必须符合相
2、应的洁净度要求，包括达到“静态”和“动态”的标准。二、洁净区的洁净区级别及要求（一）含尘浓度计数浓度：每升或每立方米空气中所含粉尘个数（个/L或个/m3）。重量浓度：每立方米空气中所含粉尘的毫克量（mg/m3）。（二）洁净区(室)洁净度标准洁净区分为A、B、C、D四个级别。第二节 洁净区的卫生管理洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米静态动态0.5m5.0m0.5m5.0mA B C D352035203520003520000202929002900035203520003520000不作规定202929000不作规定洁净区（室）各级别洁净度空气悬浮粒子的标准规定洁净度级别浮游菌cfu/m3沉
3、降菌（90mm）cfu/4h（b）表面微生物接触碟（50mm）5指手套 cfu/手套洁净区（室）微生物cfu/碟监控的动态标准A1111B10555C1005025D20010050洁净区必须保持正压，室温为1826，相对湿度为45%65%。三、空气净化技术（一）概述（二）空气的过滤主要采用空气过滤器拦截作用吸附作用粗效过滤器中效过滤器亚高效/高效过滤器（三）制冷技术厂房满足温度18-26，湿度45%-65%蒸气加热器空调（四）洁净区（室）气流的组织水平层流垂直层流空气流线以平行状态单向流动空气流线以不规则的运动轨迹流动垂直层流回风设计不同药品生产操作和相应的洁净度要求洁净度级别最终灭菌产品生
4、产操作C级背景下的局部A级高污染风险的产品灌装或灌封C级产品灌装或灌封；高污染风险的产品的配制和过滤；眼用制剂、无菌软膏剂、无菌混悬剂等的配制、灌装或灌封；直接接触药品的包装材料和器具最终清洗后的处理。D级轧盖；装前物料的准备；产品配制（指浓配或采用密闭系统的配制）和过滤；接接触药品的包装材料和器具的最终清洗。最终灭菌药品的生产操作和相应的洁净度要求非最终灭菌产品的无菌生产操作洁净度级别非最终灭菌产品的无菌生产操作处于未完全密封状态下产品的操作和转运，如产品灌装、分装、压塞、轧盖等；B级背景下的A级灌装前无法除菌过滤的药液或产品的配制；直接接触药品的包装材料、器具灭菌后的装配以及处于未完全密封
5、状态下的转运和存放；菌原料药的粉碎、过筛、混合、分装。处于未完全密封状态下的产品置于完全密封容器内的转运；B级直接接触药品的包装材料、器具灭菌后处于密闭容器内的转运和存放。灌装前可除菌过滤的药液或产品的配制；C级产品的过滤。D级直接接触药品的包装材料、器具的最终清洗、装配、包装和灭菌。第三节 灭菌与无菌操作技术灭菌与无菌操作技术灭菌：系指用物理或化学等方法杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。灭菌法：系指杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的方法或技术。无菌：系指在人一指定物体、介质或环境中，不得存在任何活的微生物。无菌操作：系指在整个操作过程中利用和控制一定条件，使产品
6、避免被微生物污染的一种操作方法或技术。物理灭菌技术利用蛋白质与核酸具有遇热、射线不稳定的特性，采用加热、射线和过滤方法，杀灭或除去微生物的技术称为物理灭菌法，亦称物理灭菌技术。1.干热灭菌法2.湿热灭菌法3.过滤除菌法4.射线灭菌法干热灭菌火焰灭菌法：直接在火焰中灼烧的灭菌方法。将灭菌物品通过火焰34次，每次20秒以上。干热空气灭菌法：在高温干热空气中进行灭菌的方法。干热空气灭菌条件1干热灭菌条件，药典规定为180，60分钟以上；有的为160-170，120分钟以上，此是大致的标准而已，必须通过实验，在保证灭菌完全同时对灭菌物品无损害的前提下，制订该物品的干热灭菌条件。2时间必须由灭菌物品全部
7、达到特定温度的计算。应用适用于耐高温的玻璃制品、金属制品以及不允许湿气透过的油脂类(如油性软膏基质、注射用油等)和耐高温的粉末化学药品等。热原经25030分钟，或200以上高温至少45分钟，可遭破坏。缺点是穿透力弱，温度不易均匀，而且由于灭菌温度过高，不适用橡胶、塑料及大部分药品。湿热灭菌用高压饱和水蒸气加热杀灭微生物。蒸气性质热含量热穿透力灭菌效率蒸气饱和蒸气湿饱和蒸气过热蒸气热压灭菌法系指利用高压饱和水蒸气加热法杀灭微生物的方法。热压灭菌条件:115，1.7atm(67kPa，7.1kg/cm2)，40min；121，2.0atm(97kPa，11kg/cm2)，30min；127，2.4
8、atm(139kPa，14.1kg/cm2)，15min。湿热灭菌一般要求F012分。热压灭菌适用于耐高温和耐高压蒸气的所有药物制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡皮塞、滤膜过滤器。流通蒸气灭菌是在不密闭的容器内，用蒸气灭菌。压力与大气压相等，即 100的蒸气灭菌，时间30-60min。缺点：不能保证杀灭所有的芽孢，如破伤风等厌气性菌的芽孢，制备过程中要尽可能避免污染，这点必须充分注意。目前我国药厂生产注射剂，特别是 1-2 ml注射剂及不耐高热的品种，可考虑采用这种灭菌法。流通蒸气灭菌煮沸灭菌法就是把安瓿或其他物品(如注射器、注射针头等)放入水中煮沸灭菌，一般是100，30-60min。此法灭
9、菌效果差，必要时加入抑菌剂。煮沸灭菌法滤过灭菌采用过滤法除去微生物的方法。该法属于机械除菌方法，该机械称为除菌过滤器。该法适用于对热不稳定的药液、气体、水等物品的灭菌。对灭菌用过滤器应有较高要求。常用的除菌过滤器：0.22m的微孔滤膜器和0.3 mG6垂熔玻璃滤器。射线灭菌系指采用辐射（60Co、137Cs）、微波和紫外线（254nm）杀灭微生物和芽孢的方法。辐射灭菌不升温、灭菌力强，对人体有伤害微波灭菌低温、常压、快速紫外线灭菌仅作用于表面化学灭菌技术用化学药品直接作用于微生物而将其杀死，同时不应损害制品的质量，常用的方法有：(一)气体灭菌法(1)环氧乙烷:易穿透塑料，纸板及固体粉末，暴露于
10、空气中环氧乙烷就可从这些物质消散，环氧乙烷对大多数固体呈惰性。(2)甲醛:甲醛溶液加热熏蒸，每立方米空间用40甲醛溶液30 m1室内相对湿度宜高，以增进甲醛气体灭菌效果。(3)丙二醇:丙二醇用于室内空气灭菌具有不挥发性和无引火性等特点，灭菌用量为1ml/m3，将丙二醇置蒸发器中加热，使蒸气弥漫全室。(4)乳酸:用乳酸蒸气灭菌用量为2ml/m3，杀菌力虽不及甲醛，但对人无害。(5)过氧乙酸:过氧乙酸用于车间灭菌，效力比相同浓度的甲醛大两倍半，对粘膜，眼部无剌激性，对木制品、金属制品、医疗器械均无影响。（二）化学试剂灭菌法无菌操作法无菌操作法在技术上并非灭菌操作，是整个过程控制在无菌条件下进行的一
11、种操作方法。适用于一些不耐热药物的注射剂、眼用剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂的制备。无菌操作场所无菌操作室；层流洁净工作台；无菌操作柜。无菌操作柜分小型无菌操作与联合无菌操作两种。小型无菌操作柜又称单人无菌柜，式样有单面式与双面式两种。联合无菌操作柜是由几个小型操作柜联合制成，以使原料的精制，传递分装及成品暂时存放等工作全部在柜内进行。近年来，采用层流洁净工作台作无菌操作，使用方便，效果可靠。(一)无菌操作前工作无菌操作前无菌操作室或无菌操作所用的一切用具、材料以及环境均须应用灭菌法灭菌：定期应用环氧乙烷、甲醛、丙二醇或乳酸等对空气进行较彻底的灭菌。每天工作前开启紫外线一小时，中午休息时间也要开
12、0.5-1小时。用3%酚溶液、2%煤酚皂溶液、0.2新洁尔灭溶液或75酒精等用对室内的空间、用具(桌椅等)、地面、墙壁等喷洒或擦试。其它用具：尽量用热压灭菌法或干热灭菌法灭菌。(二)无菌操作操作人员进入操作之前要洗澡并换上已经灭菌的工作服和清洁的鞋子，不使头发、内衣等露出来，以免造成污染机会。安瓿要150-180，2-3小时干热灭菌；橡皮塞要以121，1小时热压灭菌；有关器具、机器都要经过灭菌。用无菌操作法制备的注射剂,大多要加入抑菌剂。小量无菌制剂的制备,也可在无菌操作柜中进行。(三)无菌检查法在药剂中选择灭菌方法,与微生物学上的要求不尽相同,要达到灭菌的目的,且要保证药稳定性。灭菌效果,应
13、以杀死芽孢为标准(细菌的芽孢具有较强的的抗热力,不易杀死)。药剂或药品经灭菌或无菌操作法处理后,需经无菌检验证实已无微生物生存,方能使用。无菌检查法是用于检查药典要求无菌的药品中是否无菌的一种方法法定的无菌检查法，包括有试管接种法和薄膜过滤法。薄膜过滤用于无菌检查的突出优点，在于可滤过较大量的样品可滤除抑菌性物质，滤过后的薄膜，即可直接接种于培养基管中，或直接用显微镜观察，故此法灵敏度高，不易产生假阴性结果，检测次数减少，节省培养基，操作比较简单。1、F与F0值在灭菌中的意义与作用无菌检验往往难以检出极微量微生物，为了保证产品无菌，对灭菌方法的可靠性进行验证是很必要的。主要原因：灭菌温度多系测
14、量灭菌器内的温度，不是灭菌物体内的温度；无菌检验方法也存在局限性，难以用现行的无菌检验法检出微量的微生物。灭菌参数2、D值D值为在一定温度下杀死被灭菌物品中微生物90所需时间；也可定义为降低微生物一个十位数或一个对数值（如log100降低到log10）所需的时间。3、Z值在不同温度下对特定的微生物在特定介质或环境中求得D值后，Z值为降低一个lgD值所需升高的温度数，即灭菌时间减少到原来的 1/10时所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭99%的微生物所需要提高的温度。Z=(T2-T1)/(lgD2-lgD1)，即D2/D1=10(T2-T1)/Z4、F值与F0值F(或F0)值可作用验证灭菌可靠
15、性的参数。F值:为在一定温度(T)，给定Z值所产生的干热灭菌效果与参比温度(T0)给定Z值所产生的灭菌效果相同时所相当的时间(equivalent time)，以分为单位。F0值为在一定灭菌温度(T)、Z值为10所产生的湿热灭菌效果与121，Z值为10所产生的灭菌效果相同时所相当的时间(min)。物理F0=t10(T-121)/Z也就是说F0是将各种灭菌温度使微生物的致死力转换为灭菌物品完全暴露于121使微生物致死效力。制药用水一、概述制药用水的种类饮用水灭菌注射用水纯化水饮用水药材净制时的漂洗、制药用具的粗洗用水。除另有规定外，也可作为饮片的提取溶剂。纯化水饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透
16、法或其他适宜的方法制备的制药用水，不含任何附加剂。注射用水纯化水经蒸馏法制备，不含任何附加剂。灭菌注射用水注射用水用注射剂的生产工艺制备而得。药典和GMP对制药用水系统的要求制药用水应至少采用饮用水。水处理设备的运行不得超出其设计能力。纯化水、注射用水储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀；储罐的通气口应安装不脱落纤维的疏水性除菌滤器；管道的设计安装应避免死角、盲管。纯化水、注射用水的制备、贮存和分配应能防止微生物滋生。纯化水可采用循环，注射用水可采用70以上保温循环。二、纯化水的制备1.离子交换法利用离子交换树脂除去水中的阴、阳离子采用阳床、阴床、混合床的组合形式优点是所用设备简单，成本低，制
17、得的水质化学纯度高缺点是离子交换树脂常需要再生、消耗酸碱量大。在外加电场作用下，利用离子定向迁移及交换膜的选择透过性完成水的净化。电渗析法较离子交换法经济、节约酸碱，但制得的水纯度不高2.电渗析法3.反渗透法美国药典（23版）已收载该法作为制备注射用水的法定方法之一。二级反渗透制水流程多介质过滤器又叫石英石过滤器。内装锰砂、石英砂和无烟煤等填料，可以滤除原水中的固体杂质及颗粒。每周需反洗一至二次。预处理部分主要作用是除余氯。确保出 水余氯量小0.1ppm（mg/L），满足RO膜的运行条件。未经过活性炭过滤器的含氯水若进入反渗透膜，会造成膜的不可逆损坏！活性炭过滤器预处理部分防止硬水中的离子沉积
18、在反渗透膜上，使设备的生产效率降低。软化器预处理部分二级反渗透部分组成：保安过滤器+一级RO+二级RO保安过滤器的滤芯一般90天更换或清洗一次。滤芯的材质一般是聚丙烯制的PP棉滤芯的清洗办法35%NaOH泡12h以上，冲洗干净，再用35%盐酸泡12h以上，冲洗干净，凉干待用。在更换滤芯时应将进入渗透膜前的水阀关闭，防止过滤器内的杂质进入管道，换完以后应冲洗干净才打开进膜的阀门。保安过滤器二级反渗透设备在高于溶液渗透压的作用下，反渗透膜只能通过水分子而不能透过金属离子，从而达到脱盐的目的。1.反渗透膜组件（1）螺旋卷式工作过程64（2）中空纤维管式一级反渗透所制得的水电导率在之间。二级反渗透制得
19、的水，电导率，一般为。从二级反渗透装置出来的水经紫外线杀菌器杀菌，是防止纯水中有活的微生物存在，有的工艺流程还在紫外线杀菌器后设计了臭氧灭菌器。三、注射用水的制备蒸馏法制备注射用水是我国药典规定的法定方法塔式蒸馏水器多效蒸馏水器注射用水的质量要求pH：5.07.0氨硝酸盐与亚硝酸盐细菌内毒素 1ml0.25EU微生物限度需氧菌总数10cfu/100ml注射用水的储存：注射用水的储存应能防止微生物的滋生和污染；储罐的通气口应安装不脱落纤维的疏水性除菌滤器；储存应采用70以上保温循环；一般药品生产用注射用水储存时间不超过12小时；生物制品生产用注射用水储存时间不超过6小时，但若制备后4小时内灭菌则72小时内可使用。
