1、第第3章章 微生物细胞的破碎微生物细胞的破碎Chapter 3 Cell Disruption知识点:细胞壁的组成和结构知识点:细胞壁的组成和结构,微生物细胞的微生物细胞的破碎技术破碎技术,破碎率的测定破碎率的测定.重点:工业生产中常用的几种细胞破碎方法的重点:工业生产中常用的几种细胞破碎方法的原理原理,操作过程常用设备操作过程常用设备,并能就实际生产情况并能就实际生产情况予以合理的选择予以合理的选择.难点:常用破碎方法的合理选用难点:常用破碎方法的合理选用.目录v1微生物细胞的破碎技术概述微生物细胞的破碎技术概述v2细胞壁的组成和结构细胞壁的组成和结构v3微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎
2、技术v4 破碎方法的影响因素破碎方法的影响因素 胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物胞外产品:各种胞外酶、胞外多糖、细胞代谢物细胞本身:细胞本身:单细胞蛋白单细胞蛋白SCP胞内产品胞内产品:碱性磷酸酯酶碱性磷酸酯酶,基因工程产物基因工程产物,植物细胞产物植物细胞产物等等1 微生物细胞的破碎技术概述微生物细胞的破碎技术概述2 细胞壁的组成和结构细胞壁的组成和结构 1.细胞壁的组成和破碎阻力细胞壁的组成和破碎阻力2.细胞壁的结构细胞壁的结构 2.1 细胞壁的组成和破碎阻力细胞壁的组成和破碎阻力细菌:肽聚糖细菌:肽聚糖,多糖多糖,磷壁酸磷壁酸,主要阻力来自于肽主要阻力来自于肽聚糖的网状结构聚糖
3、的网状结构.酵母菌:葡聚糖酵母菌:葡聚糖,甘露聚糖甘露聚糖,蛋白质蛋白质,主要阻力来主要阻力来自于壁结构交换的紧密程度和厚度自于壁结构交换的紧密程度和厚度.真菌:多糖真菌:多糖,蛋白质蛋白质,脂类脂类,葡聚糖葡聚糖,几丁质几丁质,主要主要阻力来自于壁强度和聚合物网状结构阻力来自于壁强度和聚合物网状结构.back2.2 细胞壁的结构细胞壁的结构细菌的细胞壁细菌的细胞壁酵母菌的细胞壁酵母菌的细胞壁真菌的细胞壁真菌的细胞壁backbackback各种微生物细胞壁的结构与组成各种微生物细胞壁的结构与组成 3 微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎技术1微生物细胞的破碎技术:微生物细胞的破碎技术:2常用的
4、破碎技术:常用的破碎技术:3破碎方法的影响因素破碎方法的影响因素:3.1 微生物细胞的破碎技术微生物细胞的破碎技术 细胞破碎主要方法细胞破碎主要方法 细胞破碎机理图细胞破碎机理图机械破碎法与非机械法比较机械破碎法与非机械法比较 破碎技术的未来发展方向破碎技术的未来发展方向多种破碎方法相结合:多种破碎方法相结合:与上游过程相结合:与上游过程相结合:与下游与下游过程相程相结合:合:破碎方法选择原则破碎方法选择原则仅破坏或破碎存在目标生化物质的位置周围:仅破坏或破碎存在目标生化物质的位置周围:选择性溶解目标生化物质:选择性溶解目标生化物质:3.2 常用的破碎设备常用的破碎设备u机械法:机械法:u研磨
5、研磨,匀浆器匀浆器,组织捣碎法组织捣碎法,压榨器压榨器u物理处理法:物理处理法:u化学法:化学法:u酶解法:酶解法:u干燥法:干燥法:砂磨机砂磨机高速珠磨机高速珠磨机高压匀浆器高压匀浆器撞击破碎器撞击破碎器电声超声波发生器电声超声波发生器4 破碎方法的影响因素破碎方法的影响因素细胞的数量破碎条件破碎目标破碎率的测定破碎率的测定 1.直接测定法直接测定法2.测定释放的蛋白质量或酶的活力测定释放的蛋白质量或酶的活力5.包含体的破碎包含体的破碎 包含体定义包含体中目标蛋白的制备步骤蛋白质的复性操作方法提高目标蛋白质复性效率的对策作业作业1.1.高速湿法珠磨高速湿法珠磨2.2.高压匀浆高压匀浆3.3.超声波破碎超声波破碎4.4.组织捣碎组织捣碎5.5.酶解酶解6.6.自溶自溶7.7.化学溶胞化学溶胞8.8.渗透压冲击渗透压冲击9.9.冻结冻结-融化融化10.10.干燥干燥11.11.撞击破碎撞击破碎 12.12.每人请任选一种破碎方法每人请任选一种破碎方法,通过若干个典型实例来详细通过若干个典型实例来详细分析说明工艺流程、工艺成败关键点、操作方法及其原理、破碎的实分析说明工艺流程、工艺成败关键点、操作方法及其原理、破碎的实际效果际效果.列出中英文参考文献列出中英文参考文献.13.13.