1、急性毒性试验LD50的测定急性毒性试验-LD50的测定北京理工大学开放性实验总结报告学生姓名 班级 学号 所在院系 专业 开放实验室名称 日期 2013-5-5北京理工大学实验室设备处 制一、实验项目概况开放实验题目：实验动物的基本操作及其相关技术实验题目类型： 参与科研 科技活动 V自选实验 素质培养指导教师及实验技术人员姓名： 李岩实验项目起止日期：201345至2013-5-5利用何种时间段开展实验：课余时间开展实验的累计总学时数：32学时实验项目基本原理：急性毒性试验是临床前新药安全性评价的第一步，与其它毒性实验相比具有简单、 经济、易行等特点。因此新药研究开发时往往通过该项试验，尽可
2、能多的了解一些新药 的毒理学特点，为早期判断侯选新药是否具有研究开发价值提供毒性强度资料。通常测 定药物ED50及LD50以初步估计药物毒性大小。实验项目的实验方法概述：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠， 并观察记录各组别小鼠的行为变化，通过比较不同组另U小鼠出现死亡的数量来计算 LD50。实验项目的仪器设备组成情况：天平,1000ul的移液枪,200卩I移液枪,2ml 离心管,1ml注射器，手术器械（包 实验项目的消耗材料明细：乳胶手套，KM小鼠,封口膜实验项目的主要结论：戊巴比妥钠的半数致死量为 134.32mg/kg用 Bliss法计算半数致死量，回归方程y(Probit)=
3、-24.916+14.058Log(D)半数致死量 LD50=134.32mg/kg二、实验项目技术报告1 实验原理戊巴比妥钠属于巴比妥类镇静催眠药， 对中枢神经系统有普遍性抑制作用，可起到镇静、催眠、抗惊厥作用。一定剂量的戊巴比妥钠引起一般实验动物死亡。半数致死量(LD50)，即在一群实验动物中，能使 实验动物一半死亡的药量，其值越大越好。2实验内容(1)探测戊巴比妥钠LD50的剂量范围。(2)确定组数并计算各组剂量。(3)正式实验：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并 观察记录各组别小鼠的行为变化及死亡情况。(4)记录实验结果，并计算LD50。3 实验方法：1、预试溶液配制和样
4、品处理(预实验)(1)探索剂量范围：取小鼠9到12只，以3只为一组，分成3到4组，包括组距较大的一系列剂量，按组分别腹腔注射戊巴比妥钠溶液，观察出现的症状并记录动物死亡数，找出引起0及100%有效剂量的所在范围，此即上下限剂量 Dn和Dm。(2):确定组数并计算各组剂量1确定组数G：根据适宜的组距确定组数，一般分为 5到8个剂量，这里我们分为5组，按等比级数增减2计算各组剂量：在找出 Dm、Dn和确定组数后，课按下列公式求 出公比r.再 按公比 计算各 组剂量 Dl-Dm,其中D1=Dn=最小剂量。3配置等比药液系列，让每只小鼠给药量相等，一般为 0.1ml/10g体重经过预实验的五个剂量浓度
5、分别是 77、96、120、150、190mg/kg, 相应浓度：0.77、0.96、1.2、1.5、1.9%，在随后的急性毒实验中对这 些剂量进行验证2、急性毒性试验：昆明种小鼠共15只，实验前一天晚禁食不禁水，实验当天称重，标记，随机分组。给5组小鼠分别按77、96、120、150、190mg/kg,腹腔注射，给药后观察动物死亡情况。记录小鼠死亡时间，死亡数目。利用Bliss 法计算 LD50。分组动物数剂 量对数剂量动物死亡死亡率(N)(mg/kg )(X)数(n)(P=n/N )13771.8900 %23961.9800 %331202.08133.3 %431502.18266.7
6、 %531902.283100 %表1 药物对小白鼠产生效应情况【实验结果】：LD50的测定依据药物剂量依次给药。利用 Bliss法计算LD50样品名称戊巴比妥钠实验动物昆明小鼠给药途径腹腔注射实验日期2013.5.5用Bliss法计算半数致死量剂量 对数剂量 动物数 死 亡数 死亡百分率 实验机率单位 回归 机率单位（X） （只） （只）(%)(Y)(Y)771.8865300.00-1.6031961.9823300.00-2.94951202.07923133.004.56974.31191502.17613267.005.43035.67421902.2788331E27.1173回 归 方 程y(Probit)=-24.916+14.058Log(D)半数致死量 LD50=134.32mg/kgLD50(Feiller校正)95%的可信限 =92.405-20557mg/kgLD5=102.59mg/kgLD95=175.85mg/kg三、参加开放性实验的体会与建议四、评价与认定 导教师评价意见与成绩评定：实验态度积极认真，并且能够较好的完成实验包含的内容。试验后积极思考老师提出的问题。成绩：指导教师签字:院系主管领导审核与学分评定意见:同意核准该生选修学分数 分院系主管签字:日学校主管部门审批意见:部门签章： 年 月 日备注:
