1、华南农业大学实验报告气质联用仪法分析测定檀香籽油主成分华南农业大学综合性实验报告实验项目名称：气质联用仪法（ GC-MS）分析测定檀香籽 油主成分实验项目性质：综合性实验 所属课程名称：食品仪器分析综合实验 I 班 级： 13 级食品质量与安全 4 班姓 名：黄嘉源学 号： 2013305204041实验试剂与仪器安捷伦 7890A/5975C-GC/MSD、檀香籽油2试验方法与原理2.1仪器基本原理和应用范围 质谱法可以进行有效的定性分析，但对复杂有机化合物的分析就显得无能 为力；而色谱法对有机化合物是一种有效的分离分析方法， 特别适合于进行有机 化合物的定量分析， 但定性分析则比较困难。
2、因此，这两者的有效结合必将为化 学家及生物化学家提供一个进行复杂有机化合物高效的定性、 定量分析工具。 像 这种将两种或两种以上方法结合起来的技术称之为联用技术， 将气相色谱仪和质 谱仪联合起来使用的仪器叫做气 -质联用仪。气质联用仪是利用试样中各组份在气相和固定液两相间的分配系数不同， 当 汽化后的试样被载气带入色谱柱中运行时， 组份就在其中的两相间进行反复多次 分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同， 因此各组份在色谱柱中的运 行速度就不同， 经过一定的柱长后， 便彼此分离， 按顺序离开色谱柱进入检测器 （质谱仪 ），产生的离子流讯号经放大后，在记录器上描绘出各组份的色谱峰。气质联用
3、仪的工作过程是高纯载气由高压钢瓶中流出， 经减压阀降压到所需 压力后，通过净化干燥管使载气净化， 再经稳压阀和转子流量计后， 以稳定的压 力、恒定的速度流经气化室与气化的样品混合， 将样品气体带入色谱柱中进行分 离。分离后的各组分随着载气先后流入检测器 （质谱仪 ），然后载气放空。检测器 将物质的浓度或质量的变化转变为一定的电信号， 经放大后在记录仪上记录下来， 就得到色谱流出曲线。 根据色谱流出曲线上得到的每个峰的保留时间， 可以进行 定性分析，根据峰面积或峰高的大小，可以进行定量分析。2.2定性分析原理将待测物质的谱图与谱库中的谱图对比定性。2.3定量分析原理相对定量方法（峰面积归一法）
4、：由气质联用仪得到的总离子色谱图或质量 色谱图，其色谱峰面积与相应组分含量成正比，可对某一组分进行相对定量。绝对定量法（标准物质标定法） ：配制一组合适浓度的标准样品，在最佳测 定条件下，由低浓度到高浓度依次测定它们的吸光度 A，以吸光度 A 对浓度 C作 图得 A-C标准曲线。在相同的测定条件下，测定未知样品的吸光度，从 A-C标准 曲线上用内插法求出未知样品中被测元素的浓度。2.4实验条件 索氏提取檀香种子油脂，经甲酯化处理后上 GC-MS检测脂肪酸组成。柱子型号： DB-5色谱条件： 初温：120,保持 5min；以 5/min 升至 220，保持 1min；再以 4 /min ，升至
5、250/min，保持 5min。载气为高纯氦气。进样口温度： 250；分 流比： 20：1.质谱条件：离子源 EI，电离电压： 70Ev;离子源 230。质量范围： 40-400Amu3实验步骤3.1 香精油提取 目前迷迭香精油的提取有冷磨法、冷榨法、蒸馏法、浸提法、吸取法和超临 界萃取法等方法 ,其中蒸馏法操作简便 ,成本较低 ,是最常用的方法。 本实验的精油由研究生师兄师姐们提供，具体制备方法不介绍。3.2 使用 GC-MS的步骤顺序3.2.1开、关机顺序 开机：通氮气开电源设置温度（柱箱、汽化）加热通空气、氢气点火调准基线进样 关机：关氢气、空气关掉加热器通者氮气降温至室温关电源关氮气3
6、.2.2温度设定1）柱温设定（范围： -99 399）、进样器温度设定（范围： 099）2）了解温度设定情况3）监测实际温度4）设定温度的启动和停止3.2.3检测器1 ）选择检测器，2 ）设置检测器量程3.2.4分析 当柱温箱、汽化室温度设定好后，按 START键，开始升温到设定的温度。当 柱室温度达到所设定温度 1以内时， READY灯亮。但因温度稳定达到所设定 值之前，会略有波动， REDAY灯会闪烁一、二次，但很快就会稳定。当柱箱和汽 化室温度达到设定的温度时，就可以进样分析了。分析条件：（1）气相色谱条件： 色谱柱 DB-5, 前进样口温度 :270, 升温程序为： 50 保持 1 分
7、钟 ,以 5/min 速率升温到 200保持 3min，整个程序为 34min,分流比 为 40： 1.(2)质谱条件：四级杆温度 :150,离子源 (EI):70ev,230.3.2.5数据处理所得谱图经谱库检索结合手工检索，并查阅有关资料进行精油组分定性4实验结果用气相色谱数据处理系统， 以峰面积归一法测得其中各组分的相对百分含量， 对总离子流图中的各峰经质谱扫描后得到质谱图经过 NIST质谱计算机数据系统检索，结合人工谱图解析， 结果檀香籽油分离出 28个色谱峰，共鉴定出 21 个化 学成分，占总成分含量的 96.11%，具体如表 1。4 21.459 1.30 D:NISTM.L113
8、682 000112499113690 000112-3M 97113688 000196Hexadecanoic acid, methyl esterHexadecanoic acidr methyl esterHexadecanoic acid, methyl ester5 24.673 0.27 D:NIST08.L10,13-Octadecadienoic acid, methyl 132267 056554-62*2 99 ester9,12-Octadecadienoic acid, methyl 132282 0C2566-97-4 99 ester, (E,E)Methyl 1
9、0-trans.12-cis-octadecadie 132261 1000336-44-2 99noate 24.847 12.88 D:NISTO8.LS-Octadecenoc acid (2卜，methyl e 133714 OOt 112-62-& 99 ster9-Oetsdeeenoic acid, methyl ester, 133720 001937-62*8 99 (S9-Oct3decenoic acid, methyl ester, 133723 001937-62-8 99 (“7 24 906 036 D:NIST08丄9-Octadecenoic acid, me
10、thyl estert 133725 001Q37-62*fi 99 (E)cis-13-Octadecenoic acid, methyl e 133713 1000333-5S-3 QQ ster11-Octadecenoic acid, methyl ester 133708 C52380-33-3 99 25.126 0.07 D:NIST08.Ltrans-13-Octadecenoic acidt methyl 133727 1000332-61-3 91 ester7,10.13-Hexadecatrienoic acid, met 108848 055554-3CM 70 hy
11、l esterBicyclo3.3.0oct-2-e n-7-one. 6-me 16318 1000150-43-7 64 thyl-925.261 1.43 D:NIST08.L1353S1 000112-61.B 99135390 000112-61-8 99135188 000112-61-3 98Octadecanoic acid, me岀yl esterOcdecanoic acid, methyl esterOctadecanoic acid, methyl ester1025.467 2.04 D:NlST08.L9-Oetsdecynoic acid, methyl este
12、r 132244 001120-32-7 91E,Z-1.3,12.Nonadecatriere 107440 1000131-11-3 78Cyciodecene. 1-methyl- 24992 066633-38-3 7611122781 000506-17.2 96108922 0S655.35.g 95122794 00-0112-79-8 9525.554 0.19 D:NISTO8.L cis-Vaccenic acid 5.17-Octadecadienal. (Z卜 9-Octadecenoic acid, (E-1225.655 0.57 D:NISTO8.LMethyl
13、I0-transj2-cis-octadecadie 132261 1000336-44-2 99 noateMethyl 9-cist11 -transoctadecadien 132260 1000336-444 97 oate9.12-Octadecadienoic acid (Z.Z-, 132273 000112-63) 94 methyl ester1326.121 0.07 D:NISTO8.LMethyl I0-transj2-cis-octadecadie 132261 1000336-44-2 97 noateMethyl 9-cis,11 -trans-octadecad
14、ien 132260 1000336-44-0 966.11Octadecadienoic acid, methyl 132258 05659&-58-7 94 ester1426.463 1.41 D:NlST08.LMethyl io.trars.12is 23602 077210-40-5 68enyl -2-etrienyl-1828.486 0.14 D:NlST08.LMethyl octadec140907门0倉 13078 1000336-41 -*0 00 te1.3-Cyclododecadiene. (E.Z- 33065 001129926 943a,6-Methano
15、-3aHirKjen5(4H”one. 23459 016489-26-2 87 hexa hydro-192fi.5fi0 0.43 D:NISTO9.LMethyl 10-epoxyoctadecanoate 143848 1000336*4 7-9 87Oxiraneoctanoic acid. 3-octyl-, me 145869 002566-91-8 76 thyl ester, cis-7*OctadFcenoic acid methyl tor 133690 642028.761 0.46 D.NlST08.Lcis-1 Eicosenoic acid, methyl est
16、 154536 1 000333-63-8 99er11-Eicosenoi acid, methyl ester 154532 00394S)8-5 99 cis-13-Eicosenoic acid, methyl est 154535 1000333-52-1 99 er2128.809 0.35 D:NIST08.LMethyl 8,10-octadecadiynoate 129248 1000336-48-2 589.12-Octadecadiynoic acid, methyl 12S270 1000333-56-4 55 esterI0,12.0ctadecadiynoic ac
17、id 118366 007333-25-7 502228987 1.48 D:NIST08.LMethyl 10.12-octadecadiynoate 129252 1000336-47-7 87Methyl 8,10-octadecadiynoate 129248 1000336-4B-2 589.12-Octadecadiynoic acid, methyl 129270 1000333-S6-4 58 ester2329.168 0.05 D:NISTO8.L9-Hydroxypentadecanoic acid, methy 115237 067401-19-8 74 I ester
18、Octadecanoic acidv 9*hydroxy-, met *147395 002447-53-2 49 hyi esterThiazoiidme. 2-(2-furyl)- 27512 051859-0-0 382429.262 0.20 D:NIST08.LMethyl 16-metnyinonadecanoate 136020 1000352-20-C 99Eicosanoic acid, methyl ester 156024 001120-28-1 99Eicosanoic acid, methyl ester 156023 001120-28-1 992529.544 0
19、.33 D:NIST08.L8,11 -Ei cosad lenoic acid. methyl es 153172 056599-56-5 99 teriso-Propyl 9- cis .11- trans -octa 153178 1000336*68-5 93 decadienoate11J 3-Ei-cosadienoic acidT methyl e 153174 056599-57-6 93 ster2630.108 0.13 D:NIST08.L8,11-Eicosadienoic acid, methyl es 153172 056599-56-5 W ter10.13-Ei
20、cosadienoic acid, methyl e 153175 03022S-50-8 94 ster11.13-Eicosadienoic acid, methyl e 153174 056599-57-6 94 ster2730.791 0.10 D:NIST08.LNaphthalene, decahydro-1.1-dinnethy 34469 035431-04-0 47 kBenzene. 4ethyt1.2图 1 檀香籽油主要成分分析谱图表 1 檀香籽油主要成分及其质量分数编号保留时间 tR / min化合物( Compound )分子式( Molecular Formula
21、r )质量分数Relative Content / %120.940(Z)- 十六烯酸甲酯 methyl (9E)-hexadec-9-enoateC18H38O4S.NaC17H32O20.10%221.031(Z)- 十六烯酸甲酯11-Hexadecenoic acid methyl esterC18H38O4S.NaC17H32O20.03%321.128(Z)- 十六烯酸甲酯 methyl (9E)-hexadec-9-enoateC18H38O4S.NaC17H32O20.81%421.459棕榈酸甲酯 ; 十六酸甲酯 ;十六烷酸甲酯C17H34O21.30%524.67310,13
22、-Octadecadienoic acid methyl ester9,12-Octadecadienoicacid, methyl esterC19H34O20.27%624.847油酸甲酯； Methyl 9-(Z)-octadecenoateC19H36O212.88%724.906Methyl 9-(Z)-octadecenoate ；METHYL 11-OCTADECENOATEC19H36O20.36%825.1267,10,13-Hexadecatrienoic acid, methylesterC17H28O20.07 %925.261硬脂酸甲酯 ; 十八碳酸甲酯C19H38O
23、21.43%1025.4679-炔十八酸甲酯C19H34O22.04%1125.554顺式 - 十八碳烯酸9,17-Octadecadienal,(9Z)-;9,17-Octadecadienal,(Z)-;(Z)-9,17-Octadecadienal反油酸 ;反式-9-十八碳烯酸 ;凝油酸 ;洋橄榄 油酸C18H34O2C18H32OC18H34O20.19%1225.655亚油酸甲酯 ; (Z,Z)-9,12- 十八烷二烯酸甲 酯; 9,12- 十八烷二烯酸甲酯 ;顺-9,12- 十八 碳二烯酸甲酯C19H34O20.57%1326.121C19H34O20.07%1426.4631.4
24、1%1527.3682,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo2.2.1heptane.;2,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo2.2.1heptane.;2,2-Dimethyl-5-methylenenorbornane45.84%1627.4692,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo2.2.1heptane.;2,2-Dimethyl-5-methylenebicyclo2.2.1heptane.;2,2-Dimethyl-5-methylenenorbornane27.60%1727.925花生四烯酸 ;5,8,11,
25、14- 二十碳四烯酸C20H32O21.24%1828.4861,3-Cyclododecadiene,(1E,3Z)-;1,3-Cyclo dodecadiene,(E,Z)-(8CI,9CI);cis,trans-1,3-CyclododecadieneC12H200.14%1928.5800.43%2028.76111-Icosenoic acid methyl esterC21H40O20.46%2128.8090.35%2228.9871.48%2329.1680.05%2429.262二十酸甲酯 ; 花生酸甲酯C21H42O20.20%2529.544methyl icosa-8,
26、11-dienoate11,13-Icosadienoic acid methyl esterC21H38O20.33%2630.108methyl icosa-8,11-dienoate10,13-Eicosadienoicacid, methyl ester;Methyleicosa-10,13-dienoate ； 11,13-Icosadienoic acid methyl esterC21H38O20.13%2730.7910.10%2831.0871,3-Cyclododecadiene,(1E,3Z)-;1,3-Cyclo dodecadiene,(E,Z)-(8CI,9CI);
27、cis,trans-1,3-CyclododecadieneC12H200.12%五、实验讨论1.气质联用的优越性体现在哪里？质谱分析法是唯一可以确定分子式的方法， 具有很强的定性能力， 能够根据 各类有机化合物的断裂规律， 通过扫描分子碎片离子锋来提供较丰富的有关有机 化合物结构的信息。 但是质谱分析法只能对纯物质进行定性， 然而大部分有机物 均以混合物的形式存在。 通过气相色谱仪与质谱仪联用， 能够利用气相色谱仪对 待测的混合物进行分离， 使得混合的成分能够按一定顺序进入质谱仪， 从而达到 对混合物中的成分一一进行分析， 为有机化合物的分析提供了行之有效的便利方 法，解决了大多色谱无法分析混合物的课题。 同时由于质谱仪具有较高的灵敏度， 气质联用能够对混合物中微量的成分进行较为准确的定性分析。2.气相色谱的
