1、医疗器械工艺用水检验规程前 言本公司工艺用水主要由纯化水组成；纯化水由饮用水经反渗透法制得的工艺用水，不含任何添加剂。本检验规程是依据GB5749-2006生活饮用水标准、GB/T 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法、中国药典2015版、GB5749-2006生活饮用水标准、GB/T601-2002化学试剂 标准滴定溶液的制备、GB/T602-2002化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备、GB/T603-2002化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备等标准修订而成，同时引用本厂相关操作规程。本规程适用于本公司工艺用水检测。本规程由质管科编制。本规程主要起草人：#本规程审核人：￥本规程
2、批准人： %本规程实施日期：年月日目 录1目的 第1页2适用范围 第1页3责 任 第1页4工艺用水标准要求第1页5检验依据第1页6检测设备与仪器第1页7试剂、试液第2页8取样第2页9检测项目与方法第3页9.1性状第3页9.2酸碱度 第3页9.3硝酸盐第4页9.4亚硝酸第4页9.5氨第5页9.6电导率第5页9.7易氧化物第6页9.8不挥发物第6页9.9重金属 第6页9.10微生物限度 第8页10.检验规则第9页文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第1页1.目的确定工艺用水检测的操作程序和方法，确保合格的纯化水投入生产。2.适用范围适用于本公司
3、生产过程中所需的工艺用水常规检测及验证检测。3.责 任检验员有责任按照本操作规程对生产过程中所需的纯化水进行检验、判定，并对检验结果负责。4.工艺用水标准要求纯化水相关性能指标应符合中国药典2015版二部要求。5.检验依据GB5749-2006生活饮用水标准中国药典 第二部2015版纯化水水中国药典 第二部2015版附录 S中国药典 第二部2015版附录 E中国药典 第二部2015版附录 JGB/T601-2002化学试剂 标准滴定溶液的制备GB/T602-2002化学试剂 杂质测定用标准溶液的制备GB/T603-2002化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6682-2008分析实验
4、室用水规格和试验方法监视与测量设备操作、维护及保养规程化学试剂配置操作规程6.检测设备与仪器锥形瓶、烧杯、量筒、试管、蒸发皿、比色管、移液管、刻度吸管、电子天平、电导仪、PH计、超净工作台、酒精灯、电炉、烘箱、水浴锅、霉菌培养箱、恒温培养箱、压力蒸汽消毒器、微生物限度过滤专用系统等。7.试剂、试液文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第2页表1检测项目试液、指示液、标准缓冲液名称纯化水酸碱度甲基红、溴麝香草酚蓝指示液。硝酸盐10%氯化钾溶液、0.1%二苯胺硫酸溶液、浓硫酸、标准硝酸盐溶液、无硝酸盐的水。亚硝酸盐（1100）对氨基苯磺酰胺的稀盐
5、酸溶液、（0.1100）盐酸萘乙二胺溶液、标准亚硝酸盐溶液、无亚硝酸盐的水。氨碱性碘化汞钾试液、氯化铵溶液、无氨水。易氧化物稀硫酸、（0.02mol/L）高锰酸钾滴定液重金属(pH3.5)醋酸盐缓冲液、加硫代乙酰胺试液、标准铅溶液微生物限度pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液、营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、8. 取样8.1取样员按“工艺用水管理制度”规定的频次进行取样。8.2带上消毒酒精棉球、无菌三角瓶到指定地点取样。8.3按无菌操作的基本要求进行取样，并保证在运送过程中不受污染。8.3.1采取纯水样时，用消毒酒精棉球擦拭3遍。8.3.2将水龙头完全打开，放水5-10分钟，以排除管道内积存
6、的死水。8.3.3用酒精消毒棉球擦拭手和手指甲缝，擦拭洁净无菌瓶外壁。8.3.4打开盖（注意瓶塞不要碰任何物品和手掌），将瓶口对准管口水流，使水直接灌入瓶内（注意瓶内水面与塞底部应留有一段空隙，以便在检验时可以充分振摇混匀水样），接够检验量后，移开瓶口，立即盖紧瓶塞，关上水龙头。8.3.5取样后在瓶上注明取样地点，取样时间，取样人等。8.3.6一般从取样到检验不超过2个小时，条件不允许立即检验时，应冷藏保存，但不能超过6小时。9.检测项目与方法9.1性状操作：将样品移取25毫升纳式比色管中，置白色背景上用目力观察样品颜色，把鼻子靠近管口,用手向鼻子扇动,闻其气味，应符合药典要求。标准要求：应为
7、无色的澄明液体，无臭、无味。文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第3页9.2酸碱度原理:酸遇甲基红显红色，碱遇溴麝香草酚蓝显蓝色。操作:用移液管移取样品10ml置试管中，用胶头滴管滴加甲基红指示液2滴，观察颜色变化，样品颜色不得显红色；同法另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，观察颜色变化不得显蓝色。标准要求：显色应满足加甲基红指示液时不得显红色，加溴麝香草酚蓝不得显蓝色。9.2.1试剂配制:甲基红指示液：取甲基红0.1g加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释成200ml，即得。0.05mol/L氢氧化钠溶液：100
8、ml水中加0.2g纯氢氧化钠固体。溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释成200ml，即得。9.3硝酸盐原理： 经还原后生成，与二苯胺反应生成蓝色化合物。操作：取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000 006%）标准要求：检验液显色不得深于浓度为0.000006%的标准对照液。9.3.1试剂配
9、制:10%氯化钾溶液：称取氯化钾10.0g，加水使溶解成100ml，即得0.1%二苯胺硫酸溶液：称取二苯胺0.10g，加浓硫酸使成100ml，即得。标准硝酸盐溶液：取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释成100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，精密量取5ml，加水稀释成50ml，摇匀,即得。无硝酸盐的水：取无氨水或去离子水即得。无氨水：取纯化水1000ml，加稀硫酸1ml与高锰酸钾试液1ml，蒸馏即得。稀硫酸：取硫酸57ml，加水稀释至1000ml，即得。9.4亚硝酸盐文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第4页原理： 与
10、对氨基苯磺酸-萘胺反应呈色。 操作：取样品10ml，置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1100）1ml及盐酸萘乙二胺溶液（0.1100）1ml，产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶0.2ml，加无硝酸盐的水9.8ml，用同一方法处理后的颜色比较。标准要求：检验液显色不得深于浓度为0.000002%的标准对照液。9.4.1试剂配制:亚硝酸盐的水：取无氨水或去离子水即得。对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1100）：称取对氨基苯磺酰胺1.0g，加稀盐酸溶液使溶解成100ml。稀盐酸：234ml盐酸 加水稀释至1000ml，即得。盐酸萘乙二胺溶液（0.1100）：称盐酸萘乙二胺0.1g，加水使溶解成10
11、0ml。标准亚硝酸盐溶液：取亚硝酸钠0.750g（按干燥品计算）加水使溶解，稀释至100ml摇匀，精密量取1ml加水稀释成100ml，摇匀，精密量取1ml加水稀释成50ml, 摇匀,即得。9.5氨 原理：碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡黄棕色胶态化合物。操作：取本品50ml，加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液（取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml）1.5ml，加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较。标准要求：纯化水显色不得深于浓度为0.00003%的标准对照液。9.5.1试剂配制:碱性碘化贡钾试液：取碘化钾10g，加水1
12、0ml溶解后，缓缓加入二氯化汞的饱和水溶液，随加随搅拌，至生成的红色沉淀不再溶解，加氢氧化钾30g，溶解后，再加二氯化汞的饱和水溶液1ml或1ml以上，并用适量的水稀释变成200ml，静置，使沉淀，即得。用时，倾取上层的澄明液应用。氯化铵溶液：取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml。（取0.0315g氯化铵在100ml水中，在取5ml稀释至50ml）。9.6电导率原理：水的电导率与其所含无机酸、碱、盐的量有一定的关系，当它们的文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第5页浓度较低时，电导率随着浓度的增大而增加；根据水溶液中
13、电解质的浓度不同，则溶液导电的程度也不同。通过测定溶液的导电度来分析电解质在溶解中的溶解度。操作：电导仪预热完成后, 进行电极冲洗，准备完成后，取样品100mL于烧杯中，将电极插入样品中，当显示数据稳定后进行记录。标准要求：见表2。表2温度/纯化水电导率/Scm-102.4103.6204.3255.1305.4406.59.7易氧化物原理：高锰酸钾经还原后生成锰酸钾，使粉红色消失。操作：用量筒量取样品100mL于烧杯中，移取稀硫酸10ml加入样品中摇匀，煮沸后，加高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）0.10ml，再煮沸10分钟，观察颜色变化。标准要求：检验液粉红色不得完全消失。9.7.1试剂
14、配制:稀硫酸：取硫酸57ml，加水稀释至1000ml，即得。0.02mol/L高猛酸钾滴定液：取高猛酸钾3.2g，加水1000ml，煮沸15分钟，密塞，静置2日以上，用垂熔玻璃滤器滤过，摇匀9.8不挥发物操作：量取本品100ml，置105恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干，并在105干燥至恒重，记录并进行对比。标准要求：遗留残渣不得过1mg。9.9重金属原理：硫代乙酰胺试在弱酸条件下：水解，产生硫化氢，于重金属离子生文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第6页成黑色硫化物悬浊液。操作：量取样品100ml，加水19ml，蒸发至20ml，放冷，加醋酸盐
15、缓冲液(pH3.5)2ml与加水适量使成25ml，加硫代乙酰胺试液2ml，摇匀，放置2分钟，与标准铅溶液1.0ml加水19ml用同一方法处理后的颜色比较。标准要求：检验液显色，颜色不得深于浓度为0.00001标准对照液。9.9.1试剂配制:0.02mol/L高猛酸钾滴定液：取高猛酸钾3.2g，加水1000ml，煮沸15分钟，密塞，静置2日以上，用垂熔玻璃滤器滤过，摇匀醋酸盐缓冲液（PH3.5）：取醋酸铵25g，加水25ml，溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100ml，即得。硫代乙酰胺试液：取硫代乙
16、酰胺4g，加水使溶解成100ml，置冰箱中保存，临用前取混合液（由1mol/L氢氧化钠溶液15ml，水5.0ml甘油20ml组成）5.0ml，加上述硫代乙酸酰胺溶液1.0ml，置水浴（100）上加热20秒钟，冷却，立即使用。醋酸盐缓冲液（PH3.5）和硫代乙酰胺试液，放在塑料瓶中，冰箱冷藏，有效期一年，7mol/L盐酸溶液：取盐酸630ml，加水溶解至1000ML。摇匀，即得2mol/L盐酸溶液：取盐酸180ml，加水溶解稀释至1000ml。摇匀，即得1 升 5 摩尔的氨水溶液：量350毫升浓氨水，稀释至一升（买来的浓氨水的浓度是 14。3 M ，V= 5/14.3=0.35 L = 350
17、mL）标准铅溶液：称硝酸铅0.1599g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密量取贮备液10ml,置1000ml量瓶中加水至刻度，摇匀即得（每1ml相当于10ug的铅）本溶液仅供当日使用。配制与贮存用的玻璃容器均不得含铅。9.10微生物限度1）供试品的制备：取纯化水10mL，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100mL,混匀，作为供试液。2）培养基的处理：分别制备细菌培养基-营养琼脂培养基、霉菌培养基-玫瑰红钠培养基，灭菌后备用。文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第7页 3）薄膜
18、过滤法 采用薄膜过滤法，滤膜孔径应不大于 0.45m，直径为 50mm。选择滤膜材质时应保证供试品及其溶剂不影响微生物的充分被截留。滤器及滤膜使用前应经过高压蒸汽灭菌器灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。为发挥滤膜的最大过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量不超过 100ml，总冲洗量不得超过 1000ml，以避免滤膜上的微生物受损伤。 冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基和玫瑰红钠琼脂培养基平板上培养。每种培养基至少制备一张滤膜。 4）阴性对照试验 取试验
19、用的稀释液 1ml 照上述薄膜过滤法操作，作为阴性对照。阴性对照不得有菌生长。 5）培养和计数 细菌培养 3 天，霉菌、酵母菌培养 5 天。逐日观察菌落生长情况；点计菌落数。必要时，可适当延长培养时间至 7 天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不小于 15，则两个平板的菌落数不能相差 1 倍或以上。 一般营养琼脂培养基用于细菌计数；玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌及酵母菌计数。在特殊情况下，若营养琼脂培养基上长有霉菌和酵母菌、玫瑰红钠琼脂培养基上长有细菌，则应分别点计霉菌和酵母菌、细
20、菌菌落数。然后将营养琼脂培养基上的霉菌和酵母菌数或玫瑰红钠琼脂培养基上的细菌数，与玫瑰红钠琼脂培养基中的霉菌和酵母菌数或营养琼脂培养基中的细菌数进行比较，以菌落数高的培养基中的菌数为计数结果。6）菌数报告规则 以相当于 1g、1ml 或 10cm2供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌落生长，以1 报告菌数（每张滤膜过滤 1g、1ml 或 10cm2供试品），或1 乘以最低稀释倍数的值报告菌数。 7）标准要求：纯化水细菌、霉菌、酵母菌总数每1mL不得大于100个。10.检验规则纯化水全性能检测每周检测一次，常规检测每班一次。检测项目见表3.文件名称实验室操作维护及保养规程文件编号%标 题工艺用水检测版 本00/00页 次共8页，第8页表3检验规程检测项目工艺用水全性能检测用量/mL工艺用水常规检测用量/mL纯化水纯化水性状150150酸碱度6060硝酸盐15/亚硝酸盐30/氨150150电导率200200易氧化物300/不挥发物300/重金属300/微生物限度100/合计1600560
