1、海带粉碎成粉,过筛60称重滤液浓缩抽滤微波功率500W,提取时间5:00,温度50集中收集,一起浓缩滤渣继续提取,提取3次称100ml的空锥形瓶,称取5g的样品加入到100ml的锥形瓶中沸水加热1小时加10mL0.5mol/L 氢氧化钠乙醇溶液,在瓶口上插一小漏斗,漏斗上再盖一块玻璃反应完成后移去漏斗,继续加热除去乙醇。再加人10mL 蒸馏水,加热,使皂化物溶解成混合液。加入10ml,0.5mol/L的硫酸,在瓶口上插一小漏斗,漏斗上再盖一块玻璃加人10mL 蒸馏水加热1小时加浓盐酸(约5mL)使之呈酸性加热,可见脂肪酸呈油状浮于上层时,用分液漏斗分开上下层油状物分层,用分液漏斗分开上下层,上
2、次用热水重复洗涤三次,洗去甘油、硫酸等,静置澄清,上清液即为脂肪酸上层用热水重复洗涤三次,每次用水100m1,除去混杂于脂肪中的无机盐、甘油、盐酸等,静置澄清,上清液即为脂肪酸加入25ml,0.5mol/l的KOH-CH3OH,25ml石油醚加入甲醇7ml和3-4滴BF3-乙醚冷却加热60,处理30min加入2g经预处理的样品1称量两个100ml圆底烧瓶中加入为处理的2g未经预处理的样品冷却后加入25ml饱和NaCl溶液至中性,取上层清夜,称重加入25ml,10:1的浓硫酸-CH3OH再加蒸馏水至瓶颈,取出上清,再用2ml石油醚洗多次,合并上清,放入小瓶中待测,称重加入2ml石油醚1.脂肪化学
3、名甘油三酯,脂肪是由甘油和脂肪酸组成的三酰甘油酯,其中甘油的分子比较简单,而脂肪酸的种类和长短却不相同。脂肪酸分三大类:饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸。 脂肪在多数有机溶剂中溶解,但不溶解于水。2.多不饱和脂肪酸指含有两个或两个以上双键且碳链长度为1822个碳原子的直链脂肪酸。通常分为omega3和omega6,在多不饱合脂肪酸分子中,距羧基最远端的双键在倒数第3个碳原子上的称为omega3;在第六个碳原子上的,则称为omega63.单不饱和脂肪酸,在分子结构中仅有一个双键;多不饱和脂肪酸,在分子结构中含两个或两个以上双键脂肪转化为脂肪酸的方法:1.脂肪在碱性溶液底下水解生成脂肪酸
4、钠,然后加入硫酸,溶于水,不溶于乙醇。无水物是白色晶体或粉末,浓缩把乙醇蒸出,得到脂肪酸脂肪酸提取:称200g的海带粉,加入固液比为1:5的乙醇在50,500W的条件下用微波法提取,抽滤,取滤液静置,滤渣再加入1:4的乙醇溶剂进行二次提取,提取条件为50,500W的条件下进行,提取后抽滤,静置至一段时候后,充分析出白色固体后抽滤进行浓缩,在浓缩前可适当加入甲醇,再经行浓缩现象:甲酯化:酸化甲酯化1.加入正己烷4 ml,浓度2 mol的氢氧化钾一甲醇溶液2 ml,剧烈振摇12 min,30度水浴反应20 min。加入三氟化硼-甲醇溶液,3 000 rmin离心10min。取上清液待测。其中三氟化
5、硼法能利用快速皂化使脂肪酸盐直接转化成脂肪酸甲酯,减少酸化提取手续2.取13 g浸膏,加05molLKOH-CH3OH溶液25 mL,苯一正己烷(体积比为1:1)溶液25 mL,室温下振荡5min后,加热至60,处理20 min,冷却后,加入饱和NaCI溶液25 mL,静置分层后取上层清液进行GCMS分析。3.样品5 g ,于小烧杯中,加入乙醚16.7mL,正己烷8.3mL,使脂肪完全溶解后转入250mL 容量瓶,加入甲醇25mL,再加入0.8mol/L 甲醇-KOH 溶液25mL,摇匀后静置10min。加蒸馏水至刻度,吸取上层溶液,待作GC-MS 分析。气相条件:进样口温度270,温100,
6、以10/min升到170保持1min 后,以3/min 升到250,保持4min;流速:恒流模式2.4mL/min,分流进样分流比为50:1。测定方法:将沙棘油进行氢氧化钾- 甲醇室温酯化法处理后进样分析,进样量0 . 2L。按气相条件,用GC-MS 测定样品后得到色谱图。利用气质联用仪所带的标准图谱库的质谱数据进行自动检索,同时根据质谱图及相关文献鉴定出主要色谱峰对应的物质名称,并使用数据处理系统对色谱峰进行面积归一化处理,从而计算出各物质相对含量。加入3-4滴BF3-乙醚溶液,将混合物放置在70的水浴中加热3分钟,冷却后,加入1ml正己烷,振摇使甲酯转入正己烷层4.称取20 mg提取出的茶
7、籽油于小样品瓶中,加入15 mL正己烷溶解油样,摇匀,加入60“L乙酸甲酯,摇匀静置10 min。用移液枪往每个小瓶中加入100“L 27 mgmL甲醇钠甲醇溶液,在振荡器上振荡2 min,然后静置20 min以上使甲酯化完全,加入饱和草酸60L使甲酯化终止,摇匀静置于一24冰箱内20 min。取出,将样液通过无水硫酸钠微柱脱水,用小瓶收集滤液约12 mL上机测定。5.取1ml样品,加2N的甲醇氢氧化钾溶液0.5ml,然后加10ml正庚烷在120度的温度下加热半小时就可以直接进样了.也可以用比较复杂的方法进行,样品大约20克,无水甲醇50ml左右,加浓硫酸5ml,在不低于95度的水浴中回流六小时以上,然后萃取甲酯.萃取后甲酯用无水乙醇以1:3或1;5比列稀释后进样即可.6.加入3ml的KOH甲醇溶液,70水浴加热回流5min;取出冷却至室温(可用水冷),加入5ml三氟化硼溶液,70水浴加热回流5min;取出冷却至室温,加入3ml正己烷,70水浴加热回流5min;取出冷却至室温,加入适量饱和食盐水溶液,静止35min,取上层油样1ml于试样瓶中,进GC分析