人教版选修三 基因工程的基本操作程序 作业.docx
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人教版选修三基因工程的基本操作程序作业
基因工程的基本操作程序
1.下图是获得抗虫棉的技术流程示意图。
卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。
下列叙述正确的是()
A.构建重组质粒过程中需要限制酶和DNA连接酶
B.愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株
C.卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制酶的识别位点
D.抗虫棉有性生殖后代一定能保持抗虫性状的稳定遗传
2.以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。
据图分析,下列说法正确的是()
A.催化①过程的酶是DNA聚合酶
B.④过程发生的变化是引物与单链DNA结合
C.催化②⑤过程的酶都必须能耐高温
D.过程③需要解旋酶
3.下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是()
A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②
4.利用细菌大量生产人类胰岛素,下列叙述错误的是()
A.用适当的酶对运载体与人类胰岛素基因进行切割与粘合
B.用适当的化学物质处理受体细菌表面,将重组DNA导入受体细菌
C.通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌
D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录,并合成人类胰岛素
5.用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。
下列叙述不正确的是()
A.常用相同的限制性内切酶处理目的及意见和质粒
B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
6.1976年,美国的H.Boyer教授首次将人的生长抑制素释放因子的基因转移到大肠杆菌,并得表达。
此文中的“表达”是指该基因在大肠杆菌()
A.能进行DNA复制
B.能传递给细菌后代
C.能合成生长抑制素释放因子
D.能合成人的生长素
7.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是()
A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和运载体
B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列
C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快
D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达
8.在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个)放入DNA扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是()
A.540个B.8100个C.17280个D.7560个
9.如图所示,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因,并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb,1kb=1000对碱基)上相应的E﹣F区域(0.2kb),那么所形成的重组质粒pZHZ2.()
A.既能被E也能被F切开B.能被E但不能被F切开
C.既不能被E也不能被F切开D.能被F但不能被E切开
10.天然的玫瑰没有蓝色花,这是由于缺少控制蓝色色素合成的基因B,而开蓝色花的矮牵牛中存在序列已知的基因B.现用基因工程技术培育蓝玫瑰,下列操作正确的是()
A.提取矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因B
B.利用限制性核酸内切酶从开蓝色花矮牵牛的基因文库中获取基因B
C.利用DNA聚合酶将基因B与质粒连接后导入玫瑰细胞
D.将基因B直接导入大肠杆菌,然后感染并将入玫瑰细胞
11.应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。
请据图回答下列问题:
(1)在培育转人生长激素基因牛过程中,①过程需要的工具酶是,②过程常用的方法是。
(2)转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的首端必须含有_________________。
③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用________和____技术,培育出多头相同的转基因犊牛。
(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅱ最可能是___________细胞,Ⅲ代表的细胞具有____________________的特点。
(4)在抗虫棉培育过程中,④过程中的受体细胞如果采用,与采用叶肉细胞相比较,其优点是全能性高,⑤过程采用的技术是。
12.Bt毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中分离出来的抗虫基因,因其表达产物Bt毒蛋白具有杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的基因。
请回答下列有关转基因抗虫植物的问题:
(1)要从苏云金芽孢杆菌中获取Bt毒蛋白基因,可根据Bt毒蛋白基因的部分已知序列,设计特异性___________,再利用____________技术扩增出Bt毒蛋白基因。
(2)构建重组质粒时,常用Ti质粒作为载体,是因为Ti质粒上具有_______,它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)的___________上。
这种将基因表达载体导入受体细胞的方法是______________法。
(3)要确定抗虫基因导入棉花细胞后,是否赋予了棉花抗虫特性,在个体水平上还需要做________实验;若要检测具有抗虫基因的棉花是否产生了相应毒蛋白,在分子水平上可利用____________方法进行检测。
(4)目前,转基因植物的安全性问题是社会争论的热点。
如有些人认为转基因植物的种植会威胁环境安全;但也有人认为转基因植物的种植减少了________________的使用,有利于减轻污染。
面对转基因技术的利弊,我们应持有的正确做法是________________。
13.根据基因工程的有关知识,回答下列问题:
(1)限制性内切酶主要来源于生物,切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有。
(2)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即
(3)反转录作用的模板是,若要在体外获得大量反转录产物,常采用技术,该技术所需要的条件有模板DNA、引物、、原料和能量等。
(4)基因工程中除质粒外,和动植物病毒也可作为运载体。
(5)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,而是应该用进行处理。
14.植物甲具有极强的耐旱性,其耐旱性与某个基因有关。
若从该植物中获得该耐旱基因,并将其转移到耐旱性低的植物乙中,有可能提高后者的耐旱性。
回答下列问题:
(1)理论上,基因组文库含有生物的基因;而cDNA文库中含有生物的基因。
(2)若要从植物甲中获得耐旱基因,可首先建立该植物的基因组文库,从中筛选出所需的耐旱基因是比较复杂的事情,简单的说就是根据。
(3)将耐旱基因导入农杆菌,并通过农杆菌转化法将其导入植物(甲/乙)的体细胞中,经过一系列的过程得到再生植株。
要确认该耐旱基因是否在再生植株中翻译出蛋白质,应用相应的进行抗原-抗体杂交,如果检测结果呈阳性,再在田间试验中从水平检测再生植株的是否得到提高。
(4)假如用得到的二倍体转基因耐旱植株自交,子代中耐旱与不耐旱植株的数量比为3∶1时,则可推测该耐旱基因整合到了(填“同源染色体的一条上”或“同源染色体的两条上”)。
参考答案
1.A
【解析】质粒与目的基因结合时需要用同一种限制性核酸内切酶切割,用DNA连接酶连接,A正确;愈伤组织由相同细胞分裂形成,分化后产生相同基因型的植株,B错误;卡那霉素抗性基因作为标记基因不能有限制性核酸内切酶的切割位点,C错误;抗虫棉有性生殖后代可能会发生性状分离,抗虫性状不一定能稳定遗传,D错误。
【考点定位】基因工程
【名师点睛】基因工程的基本操作程序:
1、目的基因的获取
(1)目的基因是指:
编码蛋白质的结构基因。
(2)获取方法:
①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因。
2、基因表达载体的构建
(1)目的:
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)组成:
目的基因+启动子+终止子+标记基因。
①启动子:
是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。
②终止子:
也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。
③标记基因的作用:
是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
常用的标记基因是抗生素基因。
(3)基因表达载体的构建过程:
3、将目的基因导入受体细胞
(1)转化的概念:
是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
(2)常用的转化方法:
生物种类
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用方法
农杆菌转化法
显微注射技术
Ca2+处理法
受体细胞
体细胞
受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达
将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物
Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子
(3)重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
4、目的基因的检测和表达
(1)首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。
(2)其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。
(3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原--抗体杂交。
(4)有时还需进行个体生物学水平的鉴定。
如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
2.B
【解析】分析题图:
图示为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图,其中①是由RNA形成单链DNA的过程,为逆转录过程;②是以单链DNA合成双链DNA的过程,是DNA分子复制过程;③④⑤是多聚酶链式反应扩增DNA片段,其中③是变性、④是复性、⑤是延伸阶段.加热使DNA变性,不需要解旋酶。
【考点定位】DNA复制、PCR
3.
【解析】限制性核酸内切酶能将DNA链的磷酸二酯键打开,故用①表示。
DNA聚合酶能将单个游离的脱氧核苷酸聚合到DNA链上,应用④表示。
DNA连接酶是能将DNA片段连接起来,可以用图②表示,故D错误。
解旋酶能将DNA双链解开,故用图③表示,因此C正确。
【考点定位】
4.C
【解析】需要用限制酶对运载体与含有人类胰岛素基因的DNA分子进行切割,并用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA分子,A正确;将目的基因导入受体细菌时,需要感受态细胞,即用CaCl2处理细菌细胞使之处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,B正确;通常通过检测目的基因产物来检验重组DNA是否表达,而用DNA分子杂交技术检测重组DNA是否已导入受体细菌,C错误;重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录,这样才能合成人类胰岛素,D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术;基因工程的应用
【名师点睛】基因工程技术的基本步骤:
1、目的基因的获取:
方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
2、基因表达载体的构建:
是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
3、将目的基因导入受体细胞:
根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
4、目的基因的检测与鉴定:
(1)分子水平上的检测:
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.
(2)个体水平上的鉴定:
抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
5.B
【解析】基因工程中,为了使目的基因和质粒的连接,一般使用相同的限制性内切酶处理,A正确;基因工程的工具酶只有限制酶和DNA连接酶,构建重组质粒时必需的工具酶是DNA连接酶,B错误;用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了质粒或重组质粒,是利用了质粒上有标记基因(即抗生素抗性基因),C正确;即使目的基因导入受体细胞,也不一定能复制、转录、翻译(表达),所以基因工程的最后步骤才是目的基因的检测与鉴定,如果导入就能表达就不需要最后这一步了.D正确。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】基因工程中限制性核酸内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶.质粒作为载体必须具有标记基因,导入的目的基因不一定能成功表达,还要进行修饰或者其他处理。
6.C
【解析】根据题干信息可知,H.Boyer教授采用基因工程技术将人的生长抑制素释放因子的基因转移到大肠杆菌细胞内.由于自然界所有生物共用一套遗传密码子,所以“表达”是指该基因在大肠杆菌细胞内转录、翻译合成了生长抑制素释放因子。
【考点定位】遗传信息的转录和翻译
【名师点睛】基因控制蛋白质的合成.因为自然界中所有生物共用一套遗传密码子,所以人的生长抑制素释放因子的基因转移到大肠杆菌细胞内,也可以转录、翻译形成相应的蛋白质,即生长抑制素释放因子。
7.C
【解析】基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶,运载体不属于工具酶,A错误;一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列,即具有特异性,B错误;细菌繁殖快、易培养、遗传物质少,常用作受体细胞,C正确;目的基因进入受体细胞需要检测和鉴定,不一定能成功实现表达,D错误。
【考点定位】基因工程的原理及技术
【名师点睛】DNA重组技术至少需要三种工具:
限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶、运载体.常用的运载体:
质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。
限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形成黏性末端和平末端两种。
8.B
【解析】目的基因共有1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个,则A=T=460个,C=G=540个.因此,目的基因扩增4代,需要胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是(24-1)×540=8100个
【考点定位】DNA分子的复制
【名师点睛】已知DNA分子中的某种脱氧核苷酸数,求复制过程中需要的游离脱氧核苷酸数:
(1)设一个DNA分子中有某核苷酸m个,则该DNA复制n次,需要该游离的该核苷酸数目为(2n-1)×m个。
(2)设一个DNA分子中有某核苷酸m个,则该DNA完成第n次复制,需游离的该核苷酸数目为2n-1×m个。
9.A
【解析】
试题分析:
限制酶具有专一性,能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂,形成黏性末端和平末端两种.并且同种限制酶切割形成的黏性末端相同.
解:
由于限制酶具有特异性,同种限制酶切割形成的黏性末端相同.因此由题意可知,限制酶E和F分别切割目的基因和质粒后,目的基因上的两个黏性末端与质粒上的两个黏性末端分别完全相同,因此形成重组质粒后,仍然具有这两种酶的识别序列,所以既能被E也能被F切开.
故选:
A.
考点:
基因工程的原理及技术.
10.A
【解析】
试题分析:
本题考查基因工程应用的有关知识,矮牵牛蓝色花的mRNA,经逆转录获得互补的DNA,再扩增基因B,控制蓝色色素的合成,从而培育出蓝玫瑰.
解:
A、是可行方案的前半部分,后面应该包括把扩增到的基因B克隆到双元载体,转基因到玫瑰花细胞的操作,A正确;
B、如果已经从基因文库中筛选出含有基因B的克隆,可以用限制性核酸内切酶酶切获取基因B片段,实际上,对序列未知的情况下,这样得到的序列比逆转录后扩增更少突变,能更准确得到基因B的序列;基因文库的序列含有内含子,虽然都是植物,但不一定有相同的转录后加工系统,而且含有内含子的序列往往长很多,不利于完成后面的克隆表达实验操作,B错误;
C、通常用T4DNA连接酶将基因B与质粒连接,利用DNA聚合酶来连接是不行的,但如果把答案中的连接理解为重组克隆,现在是有办法用DNA聚合酶克隆的,但用这种方法一般是转到有修复缺刻功能细菌,直接转玫瑰细胞不行,C错误;
D、基因B如果已经拿到并克隆到载体上,也应该转化大肠杆菌后通过三亲本杂交或二亲本杂交把基因转入农杆菌,或直接把DNA分子转入农杆菌.因为大肠杆菌不能完成感染并把基因转入玫瑰细胞,D错误.
故选:
A
考点:
基因工程的应用.
11.
(1)限制酶、DNA连接酶显微注射法
(2)(乳腺蛋白基因的)启动子胚胎分割胚胎移植
(3)浆(或效应B)既能无限增殖又能产生特定抗体
(4)愈伤组织细胞植物组织培养
【解析】
(1)分析图解可知:
①过程表示基因表达载体的构建,需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶。
②过程目的基因导入动物的受体细胞,常用的方法是显微注射法。
(2)为了让目的基因控制的产物随分泌的乳汁排出,目的基因的首端必须含有乳腺蛋白基因的启动子。
③过程包含早起胚胎培养和胚胎移植等,为了培育出多头相同的转基因犊牛,可以将培养到桑椹胚或囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割,在移植到多头受体母牛体内完成后期发育。
(3)根据图示分析,Ⅱ最可能是能分析特定抗体的浆细胞;Ⅲ代表的是既能无限增殖又能产生特定抗体的细胞。
(4)在抗虫棉培育过程中,如果④过程中采用的受体细胞是愈伤组织细胞,而不是叶肉细胞,由于前者全能性高,更容易培育成功。
⑤过程采用的技术是植物组织培养技术。
【考点定位】基因工程、胚胎工程和细胞工程
【名师点睛】本题需要学生对现代生物工程技术(基因工程、胚胎工程和细胞工程)的基本知识要点熟记并能结合图解信息合理作答。
12.
(1)引物(对)(1分)PCR(1分)
(2)T-DNA(可移动的DNA)(1分)染色体DNA农杆菌转化法
(3)抗虫接种抗原—抗体杂交
(4)农药趋利避害,不能因噎废食
【解析】
(1)利用PCR技术扩增目的基因的前提是,要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便依据这一序列设计引物。
(2)农杆菌转化法的原理是:
农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA,在侵染植物细胞时能整合宿主染色体DNA上。
在实验中将目的基因整合到Ti质粒上的T-DNA上,T-DNA转移时,便携带目的基因完成转化。
(3)个体水平检测常用抗虫接种法;分子水平上检测能否表达成功,利用抗原-抗体杂交法。
(4)抗虫抗病转基因植物,能减少农药的使用,有利于减轻污染;我国对转基因技术的态度是“趋利避害,不能因噎废食”
【考点定位】基因工程、转基因生物安全性。
13.
(1)原核黏性末端和平末端
(2)E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶
(3)mRNAPCRTaq酶(热稳定DNA聚合酶)
(4)入噬菌体的衍生物
(5)Ca2+
【解析】
(1)经限制性核酸内切酶切割后能形成两种类型的末端,即平末端和黏性末端.
(2))DNA连接酶分为两类:
E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶.这二者都能连接黏性末端,此外T4DNA连接酶还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低.(3)反转录是以mRNA为模板逆转录先合成单链DNA,再合成双链DNA,利用PCR技术进行大量扩增.;(4)基因工程常用的运载体:
质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒.
(5)当受体细胞是细菌时,为了增大导入的成功率,常用Ca2+处理,得到感受态细胞,此时细胞壁和细胞膜的通透性增大,容易吸收重组质粒.未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱.
【考点定位】基因工程
【名师点睛】基因工程的基本操作程序:
1、目的基因的获取
(1)目的基因是指:
编码蛋白质的结构基因。
(2)获取方法:
①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因。
2、基因表达载体的构建
(1)目的:
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)组成:
目的基因+启动子+终止子+标记基因。
①启动子:
是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。
②终止子:
也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。
③标记基因的作用:
是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
常用的标记基因是抗生素基因。
(3)基因表达载体的构建过程:
3、将目的基因导入受体细胞
(1)转化的概念:
是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
(2)常用的转化方法:
生物种类
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用方法
农杆菌转化法
显微注射技术
Ca2+处理法
受体细胞
体细胞
受精卵
原核细胞
转化过程
将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达
将含有目的基因的表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物
Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子
(3)重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。
4、目的基因的检测和表达
(1)首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。
(2)其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。
(3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原--抗体杂交。
(4)有时还需进行个体生物学水平的鉴定。
如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。
14.
(1)全部部分
(2)目的基因的有关信息
(3)乙抗体个体耐旱性
(4)同源染色体的一条上
【解析】
(1)基因组文库含有某种生物的全部基因;cDNA文库中只含有该种生物的部分基因.
(2)根据目的基因的有关信息筛选出所需的耐旱基因;(3)无图(4)如耐旱基因整合到同源染色体的两条上,则子代将全部表现耐旱;如果耐旱基因整合到同源染色体的一条上,则转基因植株的基因型可以用A0表示,(A表示耐旱基因,0表示另一条染色体上没有相关基因),A0产生的配子有两种A和0,所以自交子代为AA:
A0:
00=1:
2:
1,即耐旱∶不耐旱=3∶1。
【考点定位】基因工程
【名师点睛】基因工程的基本操作程序:
1、目的基因的获取
(1)目的基因是指:
编码蛋白质的结构基因。
(2)获取方法:
①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因。
2、基因表达载体的构建
(1)目的:
使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)组成:
目的基因+启动子+终止子+标记基因。
①启动子:
是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。
②终止子:
也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。
③标记基因的作用:
是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
常用的标记基因是抗生素基因。
(3)基因表达载体的构建过程:
3、将目的基因导入受体细胞
(1)转化的概念:
是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
(2)常用的转化方法:
生物种类
植物细胞
动物细胞
微生物细胞
常用方法
农杆菌转化法
显微注射
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