乙肝病毒感染不同阶段HBsAgHBeAgHBVDNA定量检测研究.docx
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乙肝病毒感染不同阶段HBsAgHBeAgHBVDNA定量检测研究
外文略词表
外文略语
外文全文
中文释义
HBSAg
HePatitiSBSurfaCeantigen
乙肝表面抗原
HBeAg
HePatitiSBeantigen
乙肝e抗原
HBV
HePatitiSBVirUS
乙型肝炎病毒
HCV
HePatitiSCVirUS
丙型肝炎病毒
HDV
HePatitiSDVirUS
丁型肝炎病毒
HIV
HUmanLiiinunodeficiency
∖lnιs
人类免疫缺陷病毒
LC
HePatitiSBaSSOCiated
IiVerCinilOSiS
乙肝肝硬化
HCC
PnmalyIlePatiC
CarCiilOllla
原发性肝癌
EASL
EUrOPeailassociationfortheStIIdyOftheIiVer
欧洲肝脏研究学会
AASLD
AIneriCailassociationfortheStUdyOfIiVerdiseases
美国肝脏病研究协会
CTL
CytOtOXiCIyInPIlOCyte
细胞毒性T淋巴细胞
CCCDNA
COVingeIltlyClOSed
CirCUIarDNA
共价闭合环状DNA
ORF
OPenReadillgframe
开放阅读框架
PCR
POlymeraSeCllaill
聚合酶链反应
ReaCtiOn
CP
COrePrOtenlpromoter
核心蛋口启动子
IT
ImllIUnetolerantPIlaSe
免疫耐受期
IC
ImmUneCIearanCePiIaSe
免疫清除期期
LR
LOWIeVelCOPyPhaSe
非/低水平复制期
ENH
HBeAgIlegatiVe
HBeAg阴性肝炎期
IlePatitiS
IFN
IlIterferOn
干扰素
PEG-IFN
PegyIateclinterferon
聚乙二醇化干扰素
ADV
ACkfbVirdiphoxil
阿德福韦酯
LAM
LanIi∖ιιdine
拉米夫定
LDT
TelbhIIdine
替比夫定
ETV
EntUCaVir
恩替卡韦
CHE
CIlOliIleSteraSe
胆碱酯酶
ALB
AlblImin
白蛋白
AFP
AIPlla-fetoprotein
甲胎蛋口
ALT
AlaIlille
丙氨酸氨基转移酶
aminotransferase
PTA
PrOtlIl,ombiιιactmty
凝血酶原活动度
YMDD
TJTOSine-metlιioιιine
酪氨酸-蛋氨酸-天门冬
一aspartate一
氨酸
aspartate
天门冬氨酸
GRF
GlOmelldarfiltration
肾小球滤过滤
rate
乙肝病毒感染不同阶段HBSAg、HBeAgHBV-DNA定量检测研究
摘要
目的:
乙肝炎病毒简称乙肝病毒,是一种D∖A病毒,属于嗜肝D∖A病毒科,完整的乙肝病毒成颗粒状,也会被称为丹娜颗粒(Dane)O中国的乙肝病毒感染率约60%-70%;乙肝表面抗原携带率约占总人口的7.18%,以此计算,全国约有9300万人携带乙肝病毒,其中慢性乙型肝炎患者约2000万例。
因而,探究慢性乙肝不同阶段感染期的乙肝表面抗原定量,乙肝e抗原定量,HBV-DNA定量的相关性及其变化趋势尤为重要。
方法:
收集天津市笫四中心医院体检科慢性乙肝感染患者未治疗血清283例,将其分为四组,分别为慢性乙型病毒性肝炎,代偿期乙肝肝硕化,失代偿期乙肝肝硬化,原发性肝癌阶段四类,分别于基线水平进行HBSAg定量,HBeAg定量以及HBV-DNA定量检测。
结果:
根据对283例基线水平HBSAg定量,HBeAg定量以及HBV-DNA定量检测结果显示:
仅HBeAg(-)慢性乙型肝炎阶段HBSAg与HBV-DNA定量呈正相关,反之HBeAg(÷)慢性乙型肝炎,乙肝肝硬化及原发性肝癌阶段HBSAg与HBV-DNA定量两者无关联;HBeAg(+)慢性乙型肝炎及乙肝肝硬化阶段HBeAg与于HBV-DXA定量呈正相关,反之HBeAg(-)慢性乙型肝炎,原发性肝癌阶段两者无关联:
随着慢性HBV感染山慢性肝炎进入肝硬化,原发性肝癌阶段HBeAg定量、HBV-DNA定量呈现逐渐下降趋势。
结论:
慢性乙肝BlNGDU感染患者在慢性肝炎及肝硬化阶段乙肝e抗原定量与乙型肝炎病毒DNA定量正相关,而随着慢性乙型肝炎患者进入肝硬化和原发性肝癌阶段时,乙肝e抗原定量与乙型肝炎病毒DNA定量逐渐降低。
关键词:
慢性乙型肝炎病毒:
乙型肝e抗原;乙型肝炎病毒表面抗原;乙型肝炎病毒DNA
QUantitatiVedetectionOfHBsAg5HBeAgandHBV-DNAin
differentStageSOfhepatitisBVlrUSInfeCtiOn
ABSTRACT
1前言
LI询,HBV感染是一个全球性的问题并且严重威胁到人类的健康皿,HBV是引起急性慢性肝炎,肝硬化和原发性肝细胞癌的重要致病因⑶,根据2015年世界卫生组织(WHo)发布第一个慢性乙型肝炎防治指南指出,全世界IJ前约有2.4亿慢性乙肝感染者,每年约有65万人死于慢性乙肝感染⑷。
我国HBV的携带者约1.2亿,是乙型肝炎率相对较高的国家之一,现患乙型肝炎患者达3000多万。
临床对于乙型肝炎的诊断、抗病毒药物的的应用及观察主要依鼎血清学指标及HBV-DNA的检测。
血清学检测指标主要有病毒表达产物及其抗原抗体系统,即血清HBsAg.抗-HBs、HBeAg.抗-HBe和抗-HBc五项标志物。
病毒学检测指标主要有血清HBV-DNA和肝组织中共价闭合环装DNA,即CCCDNA等。
两对半的检测价值主要可以明确HBV是否感染,HBV-DNA是反映HBV传染性及明确其病毒的复制水平的重要指标,在确定慢性HBV感染自然史、监测抗病毒药物疗效以及评估急慢性乙型肝炎感染的预后等均具有重要意义⑸。
血清HBV-DNA的检测方法主要基于分子水平,如实时荧光定量聚合酶链反应法(fluorescenceQUantitatiVePCRJFQ-PCR)等⑹。
□前国内外常用的HBVDNA定量检测的商品化试剂灵敏度高、准确性好、方便快速,但实验室要求较为严格,价格相对昂贵,不易普及。
HBVCCCDNA检测需做肝活检,作为一种有创检查,患者接受度较差,且目前尚无正式批准的商品试剂盒,不宜在临床上开展。
此外,由于乙型肝炎病毒血清学标志物组合模式的复杂性和多样性,导致临床上对部分患者的HBV感染复制状况难以判断,甚至漏检其主要原因可能是山于抗原抗体含量低于线性方法的可检出水平,由此可见这些标志物的检测水平直接关系到患者的诊断与观察。
近年来,越来越多研究表明,在慢性乙肝患者抗病毒治疗基线和治疗早期,对血清HBsAg.HBeAg.核心抗体定量检测可以在一定范圉上预测患者的远期治疗应答状况。
随着检测方法的不断进步与成熟,已经实现了HBSAg和HBeAg的定性检测发展到定量检测,与传统FQ-PCR技术比较,其操作方法简便,耗时较短,成本低廉,易于检测。
本研究对慢性HBV感染不同阶段基线水平HBSAg定量、HBeAg定量、与HBV-DNA定量相关性进行分析,从而为慢性乙肝病毒感染者提供更加精确严谨,实用的检测指标。
结果显示:
HBeAg(-)慢性乙型肝炎中HBSAg定量与HBV-DNA定量存在一定关联,即P<0.05,提示对于HBeAg(-)的慢性乙型肝炎患者可将HBSAg定量检测作为评估临床疗效良好的参照指标;HBeAg(+)慢性乙型肝炎、失代偿期乙肝肝硬化阶段HBeAg定量与HBV-DNA定量明显相关,即P<0.01,提示出于上述阶段的乙肝病毒感染者HBeAg定量检测更有临床价值。
2资料与方法
2.1研究对象及分组
收集2015年至2017年天津第四中心医院体检科门诊未进行抗病毒治疗的361例慢性HBV感染者男性272例,女性89例,男女比例3.1:
Io根据患者感染HBv后的不同发病阶段分为慢性乙型肝炎152例,其中HBeAg(+)80例,HBeAg(-)72例,代偿期乙肝肝硬化46例,失代偿期乙肝肝硬化组131例,原发性肝癌32例。
对其中283例患者进行基线水平HBSAg定量,HBeAg定量以及HBV-DNA定量检测。
所有操作严格按照说明书进行。
排除屮、丙、丁、戊型肝炎,重叠感染,服用抗病毒药物,人类免疫缺陷病毒等因素干扰。
2.2仪器与试剂
(1)乙肝表面抗原定量检测
试剂:
乙肝表面抗原定量检测试剂盒,应用化学发光微粒子免疫分析法(CHIA)定量检测人血清和血浆中乙型肝炎表面抗原(HBSAg)
设备名称:
全自动免疫分析仪品牌型号:
ArChiteCti200OSr设备编号:
S.928.034-04产地:
美国雅培制药有限公司
(2)乙肝e抗原定量检测
试剂:
乙型肝炎病毒e抗原测定试剂盒,应用化学发光微粒子免疫分析法(CMlA定量检测人血清和血浆中乙型肝炎e抗原(HBeAg)
设备名称:
全自动免疫分析仪
品牌型号:
ArChiteCti200OSr
编号:
S.928.034-04
产地:
美国雅培制药有限公司
(3)HBV-DNA定量检测
试剂:
中山大学达安基因公司乙肝病毒(HBV)核酸扩增荧光检测试剂盒设备名称:
ROCheLightCyCIer荧光PCR检测仪
2.3诊断标准
诊断符合2010年中医学会肝病学分会和中华医学会感染病学分会修订的《慢性乙型肝炎防治指南》的诊断标准㈢。
原发性肝癌诊断标准参照1990年全国肿瘤防治办公室和中国抗癌协会合编的《原发性肝癌诊断标准》。
对乙肝肝硬化患者肝脏储备功能进行Ch订d-Pugh分级,分为A级、B级和C级。
2.3.1HBeAg阳性慢性乙型肝炎
血清HBsAg.HBVDNA和HBeAg阳性,抗-HBe阴性,血清ALT持续或反复升高,或肝组织学检查有肝炎病变。
2.3.2HBeAg阴性慢性乙型肝炎
血清HBsAg.HBV-DNA阳性,HBeAg持续阴性,抗-HBe阳性或阴性,血清ALT持续或反复异常,或肝组织学检查有肝炎病变。
2.3.3代偿期乙肝肝硬化
一般属于Ch订d-PughA级。
影像学、生物化学或血液学检查有肝细胞合成功能障碍或门静脉高压症(如脾功能亢进及食管胃底静脉曲张)证据,或组织学符合肝硬化诊断,但无食管胃底静脉曲张破裂出血、腹水或肝性脑病等严重并发症。
2.3.4失代偿期乙肝肝硕化
一般属于Child-PughB.C级。
患者已发生食管胃底静脉曲张破裂出血、肝性脑病、腹水等严逼并发症。
ALT和AST伴随不同程度的上升,凝血酶原活动度减低。
2.3.5原发性肝癌
1.肝癌血清标记物检测
(1)血清屮胎蛋白(AFP)测定本法对诊断本病有相对的特异性。
放射免疫法测定持续血清AFP≥400μg∕L,并能排除妊娠、活动性肝病等,即可考虑肝癌的诊断。
临床上约30%的肝癌病人AFP为阴性。
如同时检测AFP异质体,可使阳性率明显提高。
(2)血液酶学及其他肿瘤标记物检查肝癌病人血清中Y-谷氨酰转肽酶及其同功酶、异常凝血酶原、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶同功酶可高于正常。
但缺乏特异性。
2.影像学检查
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