版人类免疫缺陷病毒艾滋病患者合并非结核分枝杆菌感染诊治专家共识全文Word文档下载推荐.docx
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见表1。
表1
非结核分枝杆菌分类和常见致病菌种
二、NTM的鉴定方法
生物化学方法对分枝杆菌的菌种鉴定曾经是经典方法,但由于操作复杂、耗时长且结果不够准确,目前除用于新菌种的确定外,已不常使用。
现在临床常用的鉴定方法依据鉴别能力分为:
仅能对结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis,
MTB)与NTM的初步菌种鉴定和能够将NTM鉴别至种的两大类方法。
(一)初步菌种鉴定方法
1.对硝基苯甲酸选择性培养基法:
绝大多数NTM在含有500mg/L对硝基苯甲酸的培养基中能够生长,而MTB却不能耐受。
因此,MTB与NTM混合感染时可能会造成鉴定结果不一致,需要注意。
2.MPB64抗原检测法:
MPB64抗原是MTB在液体培养基中生长时主要分泌的蛋白之一,NTM培养液中多不存在此分泌蛋白,由此可以进行初步菌种鉴定。
现已有多种相关商业检测试剂上市,多采用免疫层析法检测培养滤液中是否存在MPB64抗原,具有操作简单、用时短等优点[19,20]。
文献报道,该技术用于初步鉴定MTB与NTM的灵敏度和特异度均超过97%[21]。
但应注意以下情况:
①由于是检测MPB64抗原,因此需要首先获得阳性培养物;
②当MTB编码MPB64抗原的基因发生突变时,会出现假阴性;
③有些M.bovis卡介苗株(如巴斯德株、哥本哈根株等)缺乏分泌相应抗原的能力,检测呈阴性;
④检测灵敏度与MPB64抗原的分泌量有关,有些阴性结果标本延长培养时间后可获得阳性结果;
⑤个别NTM菌种,如海分枝杆菌和浅黄分枝杆菌可产生微量MPB64抗原,因此检测呈弱阳性;
⑥当MTB与NTM共同生长时,会出现阳性结果,因而无法反映NTM是否存在。
3.核酸扩增试验:
用于结核病诊断的PCR扩增的靶序列往往是MTB中特异性的DNA序列,如IS6110、MPB64、早期分泌靶抗原-6(earlysecretoryantigenictarget-6,ESAT-6)和培养滤液蛋白-10(culturefiltrateprotein-10,CFP-10)等。
将PCR技术与涂片和培养结合可用于NTM的初步筛查。
最新的GeneXpertMTB/利福平(rifampim,RIF)耐药检测技术对于涂片阳性或是培养阳性的痰液标本中MTB的检测具很高的灵敏度和特异度。
对于涂片阳性或是培养阳性的标本,平行的PCR扩增获得阳性结果提示样品中存在MTB,而PCR结果阴性时,应考虑存在NTM的可能,但需要进一步核实[22,23]。
(二)菌种鉴定方法
1.分子诊断技术:
包括直接和间接的同源基因或序列比较方法。
直接的同源基因或序列比较方法:
通过分析同源DNA序列组成差异鉴定细菌至种水平,是目前菌种鉴定的"
金标准"
最常用的同源序列有16SrRNA编码基因(16SrDNA)、16S~23SrRNA基因间区(internaltranscribedspacer,ITS)、RNA聚合酶的亚基(RNApolymerasesubunit,rpoB)和热休克蛋白65(hotshockprotein65,hsp65),鉴别能力依次为hsp65、rpoB、ITS、16SrDNA[24]。
虽然16SrDNA鉴别能力相对较低,但目前其相关数据库最为完整,因此推荐常规使用。
ITS、hsp65和rpoB基因鉴别能力相对较高,建议至少选择其中之一与16SrDNA平行使用,以提高菌种鉴定的分辨能力。
间接的同源基因或序列比较方法:
设计针对特定同源基因或序列(如16SrDNA、ITS等)的单核苷酸多态性位点的探针,并将探针标记在固相的基质上(如纤维素膜、芯片等),通过探针与待测序列的结合情况间接判断DNA序列的组成,从而达到鉴别菌种的目的[25,26]。
目前的商用试剂盒主要用于分离株的鉴定,获得结果的时间较长,临床获益有限,用于痰涂片阳性的标本时,会受到菌量的限制[27]。
2.依据细菌结构差异进行菌种鉴定:
较为成熟的技术有,高效液相色谱技术分析细菌细胞壁的分枝杆菌酸碳链结构和应用质谱分析多种蛋白成分在菌体中所占的比例。
细菌的脂质和蛋白质的组成具有种属特异性,这两种方法均已经建立了包含丰富菌种的图谱库用于结果比对,因此具有很高的鉴别能力。
主要用于分离株的鉴定,不利于临床的及时诊断,而且价格昂贵,性价比低[27]。
三、NTM病的临床表现
NTM病的全身中毒症状和局部损害表现与结核病相似,主要侵犯肺脏,合并HIV感染易出现肺外病变和播散性疾病,如对分枝杆菌不进行具体的菌型分析,可长期被误诊为结核。
1.NTM肺病:
NTM肺病最为常见,主要致病菌有MAC、脓肿分枝杆菌和偶然分枝杆菌。
NTM肺病的临床症状和体征与肺结核极为相似,全身中毒症状较肺结核轻。
患者的临床表现差别较大,部分患者无明显症状,体检发现时已进展为肺空洞;
多数患者发病缓慢,常表现为慢性肺部疾病的恶化;
也有患者急性发病,有咳嗽、咳痰、咯血、胸痛、气急、盗汗、低热、乏力、消瘦和萎靡不振等症状。
多数NTM肺病患者的影像学表现为以下3种病变:
①结节性支气管扩张,往往合并脊柱侧凸或者其他胸廓疾病,而没有肺部基础疾病,后期也会形成空洞,但一般比较小;
②结核样病变,通常累及肺上部位并伴有空洞形成;
③表现为过敏性肺泡炎,这种类型比较少见,也被称作热水缸肺,患者多有暴露于热水缸、游泳池和药浴经历,或有熔炼金属环境接触史,吸入了含高浓度NTM的气体后所致。
这种类型病变的影像学特点和症状与其他原因引起的过敏性肺泡炎无法区分[28]。
2.NTM淋巴结病:
由NTM引起的淋巴结炎远比淋巴结核多见,主要致病菌有MAC、嗜血分枝杆菌,次要致病菌有瘰疬分枝杆菌。
患者颈部、颌下、腋窝、腹股沟和腹膜后的淋巴结肿大,有触痛,进展缓慢,淋巴结破溃后形成窦道,恶化与好转反复交替,最后纤维化和钙化。
疾病后期往往出现全身多发淋巴结肿大。
3.NTM皮肤病:
引起皮肤病变的主要有偶然分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、龟分枝杆菌、海分枝杆菌和溃疡分枝杆菌,多发生在针刺伤口、开放性伤口或骨折处,表现为皮肤溃疡性病变,往往迁延不愈。
艾滋病患者单纯的NTM皮肤病变比较少见,多为全身疾病的皮肤表现[29]。
4.播散性NTM病:
是艾滋病患者合并NTM病的常见类型,引起播散性病变的主要菌种有MAC、堪萨斯分枝杆菌、脓肿分枝杆菌、嗜血分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌和戈登分枝杆菌。
常见的症状为持续性或间歇性不明原因发热、进行性体质量下降、盗汗、全身表浅或深部淋巴结肿大、轻度腹痛甚至持续性腹痛、不易缓解的腹泻和消化不良等,实验室检查表现为全血细胞减少,可同时伴有肝、肾功能损伤[10,15]。
四、HIV/AIDS患者合并NTM病的诊断
同时具备以下两项条件者可诊断为NTM感染:
①NTM皮肤试验阳性;
②组织、器官受到NTM侵犯的依据。
具备以下条件之一,即可考虑为疑似NTM病:
①痰抗酸杆菌阳性而临床表现与肺结核不相符者;
②痰液中发现菌体异常的分枝杆菌;
③标本中分枝杆菌培养阳性,但其菌落形态和生长情况与MTC有差异;
④接受正规抗结核治疗无效而反复排菌的患者,且肺部病灶以支气管扩张、多发性小结节、薄壁空洞为主;
⑤经支气管卫生净化处理后痰分枝杆菌不能阴转者;
⑥有免疫缺陷但已除外肺结核的肺病患者;
⑦医源性或非医源性软组织损伤或外科术后伤口长期不愈而找不到原因者。
NTM病的诊断应通过临床表现、影像学表现、细菌学及病理检查结果进行综合判断[18]。
1.临床标本的留取:
从无菌部位分离到NTM往往意味着致病,但从非无菌部位如痰液和支气管灌洗液中分离的NTM要排除标本污染或呼吸道定植的可能。
例如,血培养发现偶然分枝杆菌往往诊断为播散性偶然分枝杆菌病,但痰标本分离出偶然分枝杆菌多为呼吸道定植或标本污染。
由于绝大多数NTM由痰标本分离获得,因此需慎重地分析其临床意义[30]。
对于疑似NTM肺病患者,可检测痰液、诱导痰、支气管冲洗液、支气管肺泡灌洗液或支气管活组织标本,应尽可能选择无创或微创方法采样以降低操作风险,呼吸道标本应在采集24h内进行检测(若不能及时处理,应4℃保存)。
不应使用口咽拭子培养或血清学检测来诊断NTM肺部感染。
若痰培养阴性,但临床高度怀疑NTM感染可能时,可应用纤维支气管镜行支气管灌洗获取肺泡灌洗液进行检测,条件许可情况下,在B型超声或CT引导下进行病灶穿刺,获取穿刺液标本。
服用抗菌药物(氨基糖苷类、大环内酯类、四环素、复方新诺明、利奈唑胺)会影响NTM生长。
若考虑患者有NTM感染的可能,在留置标本前,应停用上述抗菌药物2周。
淋巴结肿大的患者可以进行淋巴结穿刺,留取穿刺液或活组织检查标本。
对于不明原因发热、淋巴结肿大的艾滋病患者应常规留取血液标本进行分枝杆菌培养。
2.NTM肺病:
患者有呼吸系统和(或)全身症状,放射影像学检查发现肺内病变,排除其他疾病,在确保标本无外源性污染的前提下,符合以下条件之一者,可诊断NTM肺病:
①痰NTM培养2次均为同一致病菌;
②痰NTM培养阳性,1次抗酸杆菌涂片阳性;
③支气管灌洗液NTM培养1次阳性,抗酸杆菌涂片阳性(++)以上;
④支气管肺活组织NTM培养阳性;
⑤肺活组织检查见与NTM改变相似的肉芽肿、痰或支气管灌洗液NTM培养阳性[31]。
3.肺外NTM病:
有局部和(或)全身症状,经相关检查发现有肺外组织或器官病变,已排除其他疾病,在确保标本无外源性污染的前提下,病变部位组织中NTM培养阳性,即可做出肺外NTM病的诊断。
具有相关的临床症状,经相关检查发现有肺或肺外组织与器官病变,血培养NTM阳性,和(或)骨髓、肝脏、胸腔或腹腔淋巴结穿刺物培养NTM阳性[10,15]。
5.菌种鉴定和药物敏感试验:
所有NTM阳性样本应通过可靠的分子或质谱技术,分离至少达到菌株水平。
可在菌种鉴定结果后选择性进行药物敏感试验,特别是针对性方案治疗效果不佳时强烈推荐,药物敏感试验的检测和报告均应遵循临床实验室标准协会指南进行。
开始治疗前,应对MAC分离菌株进行克拉霉素和丁胺卡那霉素的药物敏感试验,对堪萨斯分枝杆菌进行利福平的药物敏感试验,对脓肿分枝杆菌进行克拉霉素、头孢西丁、阿米卡星(有条件时,最好也能包括:
替加环素、亚胺培南、米诺环素、多西环素、莫西沙星、利奈唑胺、复方新诺明和氯苯吩嗪)的药物敏感试验。
若治疗无效或培养转阴后再次转阳时,应再次进行相关药物的敏感试验。
对大环内酯类耐药的MAC分离菌株和对利福平耐药的堪萨斯分枝杆菌应进行多种抗菌药物的药物敏感试验,但结果仅用于指导用药,应结合患者病情考虑治疗方案[32]。
艾滋病合并NTM感染筛查的推荐流程见图1。
图1
人类免疫缺陷病毒/艾滋病患者合并NTM感染筛查的推荐流程
五、NTM病治疗的主要药物
1.新型大环内酯类药物:
克拉霉素和阿奇霉素是治疗NTM病最重要的新药,尤其是对MAC、偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌和脓肿分枝杆菌等均具有较强的抗菌作用。
阿奇霉素组织渗透性好,各种组织内浓度可达同期血药浓度的10~100倍,克拉霉素与阿奇霉素相比,血药浓度相对较高。
阿奇霉素对肝功能的损伤较克拉霉素轻[33]。
2.利福霉素类药物:
利福平是治疗NTM病的常用药物,利福布汀在新型利福霉素类药物中最具代表性,对MAC、堪萨斯分枝杆菌、偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌和脓肿分枝杆菌等均有一定抗菌作用,其最大优点是对肝脏细胞色素P450-3A系统的诱导作用较弱,对艾滋病患者同时进行ART时,利福布汀较利福平有更大的优越性[34]。
3.乙胺丁醇:
乙胺丁醇是治疗NTM病最常用的基本药物。
乙胺丁醇可抑制分枝杆菌RNA的合成,破坏分枝杆菌细胞壁,对MAC、堪萨斯分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌和海分枝杆菌等均有一定抗菌活性。
乙胺丁醇与其他抗分枝杆菌药物间无交叉耐药性,与链霉素、利福平、氟喹诺酮类药物等联合应用具有协同作用[34]。
4.氨基糖苷类药物:
阿米卡星对MAC具有较强的抗菌活性,多数MAC菌株对阿米卡星所能达到的血清浓度值敏感,阿米卡星对其他NTM也有一定的抗菌作用,是治疗NTM病常用和有效的药物;
妥布霉素类对龟分枝杆菌的抗菌活性强于阿米卡星。
5.氟喹诺酮类药物:
新型氟喹诺酮类药物中的氧氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星和莫西沙星等对NTM均有一定的抗菌作用,其中莫西沙星和加替沙星的抗菌活性最强,莫西沙星和加替沙星对MAC、偶然分枝杆菌的作用最为显著。
一种新开发的氟喹诺酮类药物(DC-159a)对大多数NTM均显示出良好的抗菌作用[35]。
6.头孢西丁:
头孢西丁对偶然分枝杆菌、脓肿分枝杆菌等快速生长分枝杆菌具有较强的抗菌作用[36]。
7.其他药物:
四环素类的多西环素和米诺环素等对偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和海分枝杆菌有一定的抗菌活性。
磺胺甲口恶唑对偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和海分枝杆菌有一定抑菌作用。
碳青霉烯类的伊米培南/西司他丁对偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌和脓肿分枝杆菌等快速生长型分枝杆菌具有较强的抗菌作用。
新型抗菌药物替加环素和利奈唑胺对脓肿分枝杆菌等具有较强的抗菌作用[37,38]。
8.贝达喹啉:
Ji等[39]检测了利福平、链霉素、阿米卡星、莫西沙星、贝达喹啉、利奈唑胺、PA-824等7种药物对29株溃疡分枝杆菌的敏感度,其中贝达喹啉抑制50%受试菌所需最低抑菌浓度[(minimalinhibitoryconcentration,MIC)MIC50]和抑制90%受试菌所需MIC(MIC90)最低。
Philley等[40]报道,10例治疗失败的NTM肺病患者接受贝达喹啉治疗后6个月,6例患者有微生物学应答,5例患者细菌培养阴性。
另有文献报道,肺移植的NTM病患者采用贝达喹啉治疗后病情好转,对大环内酯类药物耐药的MAC肺病患者接受包含贝达喹啉方案的抗菌治疗后有效[41,42]。
贝达喹啉对MAC的MIC显著低于阿米卡星、克拉霉素、莫西沙星和利奈唑胺[43]。
因此该药可以作为一个有前途的抗NTM药物。
六、NTM病的治疗原则
1.如有菌种鉴定结果,根据不同菌种选择敏感药物,治疗效果不佳者,根据菌种进行药物敏感试验。
2.如无菌种鉴定结果,则选择选择5~6种药物联合治疗,强化期6~12个月,在NTM培养结果阴转后继续治疗12个月以上。
3.不同NTM病的用药种类和疗程可有所不同[27]。
七、NTM病的治疗
(一)缓慢生长型NTM的治疗
1.鸟-胞内分枝杆菌病:
推荐对CD4+T淋巴细胞计数<
100个/μL的患者进行一级预防,阿奇霉素(1200mg口服,每周1次)或克拉霉素(500mg口服,2次/d)或利福布汀(300mg口服,1次/d),直至CD4+T淋巴细胞计数>
100个/μL。
治疗方案:
在克拉霉素/阿奇霉素(500mg口服,1次/d)+乙胺丁醇[15mg/(kg·
d)]的基础上再加上3~4种药物(阿米卡星、链霉素、左氧氟沙星或莫西沙星)联合治疗。
推荐检测克拉霉素和阿奇霉素敏感性。
疗程结束继续使用阿奇霉素或克拉霉素或利福布汀进行二级预防。
直至CD4+T淋巴细胞计数>
100个/μL[44]。
2.堪萨斯分枝杆菌病:
对利福平敏感的堪萨斯分枝杆菌病患者,应联合使用利福平(600mg口服,1次/d)、异烟肼(300mg口服,1次/d)、乙胺丁醇[25mg/(kg·
d)×
2个月,然后改为15mg/(kg·
d)]加大环内酯类药物(克拉霉素或阿奇霉素)。
对利福平耐药的堪萨斯分枝杆菌病患者,建议异烟肼(900mg口服,1次/d)、维生素B6(50mg口服,1次/d)、乙胺丁醇[25mg/(kg·
d)]加磺胺甲口恶唑(1g,3次/d)或联用大环内酯类药物。
疗程至培养阴性后15个月。
堪萨斯分枝杆菌对吡嗪酰胺均耐药。
体外对利奈唑胺高度敏感。
疗效不佳者可加用左氧氟沙星或莫西沙星等其他敏感药物[45]。
3.玛尔摩分枝杆菌病:
肺病患者应联合使用利福平、乙胺丁醇和大环内酯类(克拉霉素或阿奇霉素),每日口服给药治疗。
重症玛尔摩分枝杆菌肺病(如:
呼吸道标本抗酸杆菌涂片阳性、影像学检查提示存在空洞、严重感染、临床症状严重或有全身性疾病体征和播散性疾病患者)应注射氨基糖苷类药物(阿米卡星或链霉素)。
若无法注射使用氨基糖苷类药物、存在注射禁忌或需长期使用氨基糖苷类药物的玛尔摩分枝杆菌肺病患者,可考虑阿米卡星雾化治疗。
在培养转阴12个月后,玛尔摩分枝杆菌病患者应继续抗菌药物治疗至少12个月。
4.嗜血分枝杆菌病:
需用强化培养基分离。
在体外对环丙沙星、环丝氨酸、利福布汀和莫西沙星敏感[46]。
可选择环丙沙星+利福布汀+克拉霉素。
对于局部的淋巴结炎,外科清创可能是必要的[46]。
5.戈登分枝杆菌病:
可考虑利福平+乙胺丁醇、卡那霉素或环丙沙星、利奈唑胺[34]。
戈登分枝杆菌通常为寄生菌,并不致病,对异烟肼耐药。
6.海分枝杆菌病:
克拉霉素或米诺环素或多西环素或复方磺胺甲口恶唑或利福平+乙胺丁醇共3个月。
对异烟肼和吡嗪酰胺耐药。
体外试验显示对环丙沙星、莫西沙星中度敏感[47]。
7.瘰疠分枝杆菌病:
手术切除。
很少需要药物治疗。
体外试验对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、阿米卡星、环丙沙星耐药,对克拉霉素、链霉素、红霉素敏感,可选择克拉霉素+氯法齐明,加用或不加用乙胺丁醇。
8.溃疡分枝杆菌病:
WHO推荐利福平+链霉素共8周。
利福平+环丙沙星可作为替代治疗。
体外试验对利福平、链霉素、氯法齐明、克拉霉素、环丙沙星、氧氟沙星、阿米卡星、莫西沙星、利奈唑胺敏感。
小样本研究发现,利福平+链霉素4周,然后改为利福平+克拉霉素4周的方案与利福平+克拉霉素8周方案的疗效相近[48,49]。
9.蟾分枝杆菌病:
体外试验对克拉霉素和利福布汀,以及多种标准抗分枝杆菌药物敏感。
推荐大环内酯类药物+利福平或利福布汀+乙胺丁醇和(或)链霉素方案或利福平+异烟肼和(或)乙胺丁醇方案。
研究表明,多数感染此菌的艾滋病患者不需治疗[50]。
(二)快速生长型NTM的治疗
1.脓肿分枝杆菌病:
脓肿分枝杆菌对阿米卡星、克拉霉素、头孢西丁、氯法齐明、头孢美唑、利福布汀、氟喹诺酮、阿奇霉素、亚胺培南、环丙沙星、米诺环素、多西环素和替加环素敏感,对头孢西丁、氟喹诺酮类耐药,替加环素在体外有很强的活性。
单次分离出脓肿分枝杆菌常常不意味着致病。
需警惕克拉霉素诱导性耐药产生。
皮肤脓肿分枝杆菌病治疗:
克拉霉素(500mg口服,2次/d)共6个月。
肺或播散性脓肿分枝杆菌病治疗:
包括起始抗菌药物治疗阶段(包括静脉和口服抗菌药物)和维持抗菌药物治疗阶段。
(1)起始阶段
对克拉霉素敏感的脓肿分枝杆菌感染或证实为诱导型大环内酯类耐药患者,起始阶段静脉应用阿米卡星、替加环素、亚胺培南(若耐受),口服克拉霉素或阿奇霉素(若耐受)联合治疗4周。
对脓肿分枝杆菌复合体大环内酯类耐药的患者,起始阶段静脉应用阿米卡星、替加环素和亚胺培南(若耐受)联合治疗4周。
应根据感染严重程度、治疗反应和对药物的耐受程度决定静脉治疗时间。
为了减少治疗相关的恶心和呕吐,在应用替加环素和(或)亚胺培南时,可加用止吐药昂丹司琼和(或)阿瑞吡坦。
若无法注射应用氨基糖苷类药物、存在注射禁忌或需长期使用氨基糖苷类药物的脓肿分枝杆菌肺病患者,可考虑阿米卡星雾化治疗。
对阿米卡星耐药的脓肿分枝杆菌或脓肿分枝杆菌分离株中存在可导致耐药的16SrRNA基因突变,应停用阿米卡星,改用其他抗菌药物。
(2)维持阶段
对克拉霉素敏感的脓肿分枝杆菌感染或证实为诱导型大环内酯类耐药患者,维持阶段雾化阿米卡星和大环内酯类(口服阿奇霉素或克拉霉素),同时根据药物敏感试验及患者耐受度联合使用下列1~3种口服药物:
氯苯吩嗪、利奈唑胺、米诺环素或强力霉素、莫西沙星或环丙沙星、复方新诺明。
脓肿分枝杆菌复合体大环内酯类耐药的患者,维持阶段雾化阿米卡星,同时根据药物敏感试验,以及患者耐受度联合使用下列1~3种口服药物:
对阿米卡星耐药的脓肿分枝杆菌或脓肿分枝杆菌分离株中存在可导致耐药的16SrRNA基因突变,应停用阿米卡星,改用其他口服抗菌药物。
培养转阴12个月后,脓肿分枝杆菌病患者应继续应用抗菌药物治疗至少12个月。
若培养无法转阴,患者也能从长期抑菌治疗中获益[51]。
2.龟分枝杆菌病:
龟分枝杆菌对阿米卡星、克拉霉素、阿奇霉素、妥布霉素、亚胺培南、莫西沙星、环丙沙星、米诺环素、多西环素、利奈唑胺敏感,对头孢西丁、氟喹诺酮类耐药,替加环素在体外有很强的活性[52,53]。
皮肤:
克拉霉素(500mg口服,
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