常用蛋白质分子量标准参照物精.docx

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常用蛋白质分子量标准参照物精

十、常用蛋白质分子量标准参照物

高分子量标准参照      中分子量标准参物     低分子量标准参照

蛋白质

Mr

蛋白质

Mr

蛋白质

Mr

肌球蛋白

β－半乳糖苷酶

磷酸化酶B

牛血清清蛋白

过氧化氢酶

醛缩酶

212000

116000

97400

66200

57000

40000

磷酸化酶B

牛血清清蛋白

谷氨酸脱氢酶

卵清蛋白

醛缩酶

碳酸酐酶

大豆胰蛋白酶抑制剂

溶菌酶

97400

66200

55000

42700

40000

31000

21500

14400

碳酸酐酶

大豆胰蛋白酶制剂

马心肌球蛋白

溶菌酶

肌球蛋白（F1）

肌球蛋白（F2）

肌球蛋白（F3）

31000

21500

16900

14400

8100

6200

2500

十一、层析法常用数据表及性质

（一）离子交换纤维素

目前常用的离子交换纤维素列于下表

DEAE－

纤维素

形状

长度

（微米）

交换当量

（毫克当量/克）

蛋白吸附容量（毫克/克）

床体积（毫升/克）

胰岛素（pH8.5）

牛血清清蛋白（pH8.5）

pH6.0

pH7.5

DE-22

DE-23

DE-32

DE-52

CM-纤维素

CM-22

CM-23

CM-32

CM-52

改良纤维性*

同上（除细粒）

微粒性（干粉）

同上（溶胀）

改良纤维性

同上（除细粒）

微粒性（干粉）

同上（溶胀）

12~400

18~400

24~63

24~63

12~400

18~400

24~63

24~63

1.0±0.1

1.0±0.1

1.0±0.1

1.0±0.1

0.6±0.06

0.6±0.06

1.0±0.1

1.0±0.1

750

750

850

850

溶菌酶

（pH5.0）

600

600

1,260

1,260

450

450

660

660

7S－γ球蛋白（pH5.0）

150

150

400

400

7.7

8.3

6.0

6.0

pH5.0

7.7

9.1

6.8

6.8

7.7

9.1

6.3

6.3

pH7.5

7.7

9.1

6.7

6.7

*：

英国Whatman厂的型号，原来有旧型号如DE-1，为长纤维性，长度1000微米。

还有DE-11，纤维性，50～250微米，对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。

（二）聚丙烯酰胺凝胶的技术数据

型号

排阻的下限

（Mr）

分级分离的范围

（Mr）

膨胀后的床体积

（mL/g干凝胶）

膨胀所需最少时间

（室温，小时）

Bio-gel-P-2

Bio-gel-P-4

Bio-gel-P-6

Bio-gel-P-10

Bio-gel-P-30

Bio-gel-P-60

Bio-gel-P-100

Bio-gel-P-150

Bio-gel-P-200

Bio-gel-P-300

1600

3600

4600

10000

30000

60000

100000

150000

200000

300000

200~2000

500~4000

1000~5000

5000~17000

20000~50000

30000~70000

40000~100000

50000~150000

80000~300000

100000~400000

3.8

5.8

8.8

12.4

14.9

19.0

19.0

24.0

34.0

40.0

2~4

2~4

2~4

2~4

10~12

10~12

24

24

48

48

注：

上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在水和缓冲溶液中很容易膨胀，生产厂为Bio-RadLaboratories,Rich-mond,California,U.S.A.

（三）琼脂糖凝胶的技术数据

（琼脂糖是琼脂内非离子型的组分，它在0~4℃，pH4~9范围内是稳定的。

）

名称、型号

凝胶内琼脂糖百分

含量（W/W）

排阻的下限（Mr）

分级分离的范围（Mr）

生产厂商

Sagavac10

Sagavac8

Sagavac6

Sagavac4

Sagavac2

10

8

6

4

2

2.5×105

7×105

2×106

15×106

150×106

1×104~2.5×105

2.5×104~7×105

5×104~2×106

2×105~15×106

5×105~15×107

SeravacLaboratories,

Maidenhead,England

Bio-GelA-0.5M

Bio-GelA-1.5M

Bio-GelA-5M

Bio-GelA-15M

Bio-GelA-50M

Bio-GelA-150M

10

8

6

4

2

1

0.5×105

1.5×106

5×106

15×105

50×106

150×106

<1×104~2.5×106

<1×104~1.5×106

1×104~5×106

4×104~15×106

1×105~50×106

1×106~150×106

Bio-RadLaboratories,

California,U.S.A.

（四）凝胶过滤层析介质的技术数据

凝胶过滤介质名称

分离范围

颗粒

大小

（μm）

特性/应用

pH稳定性工作

耐压（Mpa）

最快

流速

（cm/h）

Superdex30

Superdex75

Superdex200

Superose6

Superose12

Sephacryl

S-100HR

Sephacryl

S-200HR

Sephacryl

S-300HR

Sephacryl

S-400HR

Sepharose6

FastFlow

Sepharose4

FastFlow

Sepharose2B

Sepharose4B

Sepharose6B

Sepharose

CL-2B

Sepharose

CL-4B

Sepharose

CL-6B

<10000

3000~70000

300010000~600000

5000~5×106

1000~300000

1000~100000

5000~250000

10000~1.5×106

20000~8×106

10000~4×106

60000~20×106

70000~40×106

60000~20×106

10000~4×106

70000~40×106

60000~20×105

10000~4×106

24~44

24~44

24~44

20~40

20~40

25~75

25~75

25~75

25~75

平均90

平均90

60~200

45~165

45~165

60~200

45~165

45~165

肽类、寡糖、小蛋白等

重组蛋白、细胞色素

单抗、大蛋白

蛋白、肽类、多糖、核酸

蛋白、肽类、寡糖、多糖

肽类、小蛋白

蛋白，如清蛋白

蛋白、抗体

多糖、具延伸结构的大分

子如蛋白多糖、脂质体

巨大分子

巨大分子如重组乙型肝

炎表面抗原

蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖（蛋白多糖）

蛋白、多糖

蛋白、多糖

蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖（蛋白多糖）

蛋白、多糖

蛋白、多糖

3~12

3~12

3~12

3~12

3~12

3~11

3~11

3~11

3~11

2~12

2~12

4~9

4~9

4~9

3~13

3~13

0.3

0.3

0.3

0.4

0.7

0.2

0.2

0.2

0.2

0.1

0.1

0.004

0.008

0.02

0.005

0.012

0.02

100

100

100

30

30

20~39

20~39

20~39

20~39

300

250

10

11.5

14

15

26

30

凝胶过滤介质名称

分离

范围

颗粒

大小

（μm）

特性/应用

pH

稳定性

工作

干凝胶

溶胀体积

（mL/g）

溶胀最少

平衡时间（h）

最快

流速

（cm/h）

室温

沸水

SephadexG-10

SephadexG-15

SephadexG-25Coarse

SephadexG-25Medium

SephadexG-25Fine

SephadexG-25Superfine

SephadexG-50

Coarse

SephadexG-50Medium

SephadexG-50Fine

SephadexG-50Superfine

SephadexG-75

SephadexG-75Superfine

SephadexG-100

SephadexG-100

Superfine

SephadexG-150

SephadexG-150

Superfine

SephadexG-200

SephadexG-200

Superfine

<700

<1500

1000~5000

1000~5000

1000~5000

1000~5000

1500~30000

1500~30000

1500~30000

1500~30000

3000~80000

3000~70000

4000~1.5×105

4000~1×105

5000~3×105

5000~1.5×105

5000~6×105

5000~2.5×105

干粉40~120

干粉40~120

干粉100~300

干粉50~150

干粉20~80

干粉10~40

干粉100~300

干粉50~150

干粉20~80

干粉10~40

干粉40~120

干粉10~40

干粉40~120

干粉10~40

干粉40~120

干粉10~40

干粉40~120

干粉10~40

脱盐及交换缓冲液用

脱盐及交换缓冲液用

脱盐及交换缓冲液用

脱盐及交换缓冲液用

小分子蛋白质分离

小分子蛋白质分离

小分子蛋白质分离

小分子蛋白质分离

中等蛋白质分离

中等蛋白质分离

中等蛋白质分离

中等蛋白质分离

稍大蛋白质分离

稍大蛋白质分离

较大蛋白质分离

较大蛋白质分离

2~13

2~13

2~13

2~13

2~13

2~13

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~10

2~3

2.5~3.5

4~6

4~6

4~6

4~6

9~11

9~1