云南岩陀岩白菜素含量变化及质量标准研究植物学硕士论文.docx
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云南岩陀岩白菜素含量变化及质量标准研究植物学硕士论文
硕士学位论文
云南岩陀岩白菜素含量变化及质量标准研究
VariationinBergeninContentofRhizomaRodgersiaeinYunnananditsQualityStandard
毕业设计(论文)原创性声明和使用授权说明
原创性声明
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所呈交的毕业设计(论文),是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。
尽我所知,除文中特别加以标注和致谢的地方外,不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果,也不包含我为获得及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。
对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体,均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。
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学位论文原创性声明
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所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。
除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。
对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。
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日期:
年月日
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涉密论文按学校规定处理。
作者签名:
日期:
年月日
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日期:
年月日
注意事项
1.设计(论文)的内容包括:
1)封面(按教务处制定的标准封面格式制作)
2)原创性声明
3)中文摘要(300字左右)、关键词
4)外文摘要、关键词
5)目次页(附件不统一编入)
6)论文主体部分:
引言(或绪论)、正文、结论
7)参考文献
8)致谢
9)附录(对论文支持必要时)
2.论文字数要求:
理工类设计(论文)正文字数不少于1万字(不包括图纸、程序清单等),文科类论文正文字数不少于1.2万字。
3.附件包括:
任务书、开题报告、外文译文、译文原文(复印件)。
4.文字、图表要求:
1)文字通顺,语言流畅,书写字迹工整,打印字体及大小符合要求,无错别字,不准请他人代写
2)工程设计类题目的图纸,要求部分用尺规绘制,部分用计算机绘制,所有图纸应符合国家技术标准规范。
图表整洁,布局合理,文字注释必须使用工程字书写,不准用徒手画
3)毕业论文须用A4单面打印,论文50页以上的双面打印
4)图表应绘制于无格子的页面上
5)软件工程类课题应有程序清单,并提供电子文档
5.装订顺序
1)设计(论文)
2)附件:
按照任务书、开题报告、外文译文、译文原文(复印件)次序装订
指导教师评阅书
指导教师评价:
一、撰写(设计)过程
1、学生在论文(设计)过程中的治学态度、工作精神
□优□良□中□及格□不及格
2、学生掌握专业知识、技能的扎实程度
□优□良□中□及格□不及格
3、学生综合运用所学知识和专业技能分析和解决问题的能力
□优□良□中□及格□不及格
4、研究方法的科学性;技术线路的可行性;设计方案的合理性
□优□良□中□及格□不及格
5、完成毕业论文(设计)期间的出勤情况
□优□良□中□及格□不及格
二、论文(设计)质量
1、论文(设计)的整体结构是否符合撰写规范?
□优□良□中□及格□不及格
2、是否完成指定的论文(设计)任务(包括装订及附件)?
□优□良□中□及格□不及格
三、论文(设计)水平
1、论文(设计)的理论意义或对解决实际问题的指导意义
□优□良□中□及格□不及格
2、论文的观念是否有新意?
设计是否有创意?
□优□良□中□及格□不及格
3、论文(设计说明书)所体现的整体水平
□优□良□中□及格□不及格
建议成绩:
□优□良□中□及格□不及格
(在所选等级前的□内画“√”)
指导教师:
(签名)单位:
(盖章)
年月日
评阅教师评阅书
评阅教师评价:
一、论文(设计)质量
1、论文(设计)的整体结构是否符合撰写规范?
□优□良□中□及格□不及格
2、是否完成指定的论文(设计)任务(包括装订及附件)?
□优□良□中□及格□不及格
二、论文(设计)水平
1、论文(设计)的理论意义或对解决实际问题的指导意义
□优□良□中□及格□不及格
2、论文的观念是否有新意?
设计是否有创意?
□优□良□中□及格□不及格
3、论文(设计说明书)所体现的整体水平
□优□良□中□及格□不及格
建议成绩:
□优□良□中□及格□不及格
(在所选等级前的□内画“√”)
评阅教师:
(签名)单位:
(盖章)
年月日
教研室(或答辩小组)及教学系意见
教研室(或答辩小组)评价:
一、答辩过程
1、毕业论文(设计)的基本要点和见解的叙述情况
□优□良□中□及格□不及格
2、对答辩问题的反应、理解、表达情况
□优□良□中□及格□不及格
3、学生答辩过程中的精神状态
□优□良□中□及格□不及格
二、论文(设计)质量
1、论文(设计)的整体结构是否符合撰写规范?
□优□良□中□及格□不及格
2、是否完成指定的论文(设计)任务(包括装订及附件)?
□优□良□中□及格□不及格
三、论文(设计)水平
1、论文(设计)的理论意义或对解决实际问题的指导意义
□优□良□中□及格□不及格
2、论文的观念是否有新意?
设计是否有创意?
□优□良□中□及格□不及格
3、论文(设计说明书)所体现的整体水平
□优□良□中□及格□不及格
评定成绩:
□优□良□中□及格□不及格
教研室主任(或答辩小组组长):
(签名)
年月日
教学系意见:
系主任:
(签名)
年月日
摘要
中药材岩陀(Rhizomarodgersiae)为西南鬼灯檠(Rodgersiasambucifo1iaHemsl.)或羽叶鬼灯檠(R.pinnataFranch.)的干燥根状茎,具有镇咳祛痰等功效,用于治疗慢性支气管炎等疾病。
岩白菜素是岩陀的有效成分,岩陀被作为岩白菜素提取物的主要原料药材,云南省是岩陀药材的集中分布区和主产区。
但尚缺乏云南地区鬼灯檠属植物岩白菜素含量变化规律的系统研究。
岩陀作为一种大宗的提取物原料类药材,其质量标准仅见于云南省药品标准(1974、1996)和中国药典(1977),质量标准滞后成为限制岩陀药材应用的重要问题。
本研究对云南地区岩陀的2种原植物及其近缘种的4种鬼灯檠属植物种间及其居群间与居群内个体间的岩白菜素含量进行了较为系统的比较,对岩陀药材质量标准进行了研究,以期为岩陀种源的筛选及资源的开发利用奠定基础。
研究结果如下:
(1)超声波提取50min,采用C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱(0-20min,0-20%A),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长275nm,加样回收率和线性关系良好,可以作为测定岩陀药材岩白菜素含量的方法。
(2)云南地区鬼灯檠属植物4个种和变种的岩白菜素含量,西南鬼灯檠含量变化在4.73%~6.61%之间,平均为5.59%,富民居群最高,玉龙居群最低;羽叶鬼灯檠岩白菜素含量变化在2.97%-5.30%之间,平均为3.37%,鹤庆居群最高,洱源居群最低;七叶鬼灯檠(R.aesculifoliaBatalin)的富源居群含量5.39%,泸水居群含量为1.53%,平均为3.45%;光腹鬼灯檠(R.sambucifoliaHemsl.var.estrigosaJ.T.Pan)的宁蒗居群含量为4.79%,兰坪居群含量为4.22%,平均为4.51%;西南鬼灯檠同一居群内不同个体间的岩白菜素含量变异丰富,变化在2.50%~7.50%间,呈正态分布,变异系数为34.15%。
药材断面颜色越深,岩白菜素含量就越高,深色断面的药材含量最高。
岩陀原植物西南鬼灯檠的品质优于羽叶鬼灯檠,非岩陀原植物的同属植物七叶鬼灯檠和光腹鬼灯檠也具有作为岩陀提取岩白菜素的潜在价值。
同种不同地理居群及其同一居群的不同个体间岩白菜素含量存在较大差异,通过居群及其个体选择可筛选高岩白菜素含量的原植物基因型。
岩陀断面颜色可作为岩陀优质药材评价和育种选择的感官指标。
(3)基于岩陀药源植物形态、药材鉴定、显微鉴定、灰分含量、水分含量、浸出物和岩白菜素含量分析,建立了岩陀药材质量标准,相关指标暂定为:
水分含量不高于10.0%,总灰分不高于15.0%,酸不溶灰分不高于13.0%,水溶性浸出物含量不低于5.0%,岩白菜素含量不低于2.5%。
(4)建立了岩陀药材的HPLC指纹图谱,确定了12个共有峰,相对保留时间的RSD为0.005-0.019,相对峰面积的RSD为0.095-0.185,12批样品的相似度均大于0.90,方法简单可靠,可用于岩陀药材的质量控制。
关键词:
岩陀;岩白菜素;鬼灯檠属;质量标准
VariationinBergeninContentofRhizomaRodgersiaeinYunnananditsQualityStandard
ABSTRACT
RhizomaRodgersiae,oneofChinesemedicinalmaterials,isthedryrhizomefromRodgersiasambucifo1iaHemsl.orR.pinnataFranch..Itcanbeusedinthetreatmentofsomediseasesuchaschronicbronchitisbecauseitsantitussiveandexpectoranteffects.Bergenin,theeffectivecomponentofRodgersiaextract,isextractedfromrodgersiamainly.TheYunnanprovinceistheconcentrateddistributionareaandproductionareaofethnodrugR.sambucifoliaHemsl.Asakindoflargeamountrawmaterials,Rodgersia’squalitystandardswerefoundinYunnanprovincedrugstandard(1974、1996)andChinesePharmacopoeia(1977)only.ThebergenincontentoftwokindofRodgersiaoriginalplant,interspecificandinterindividualbergenincontentof4Rodgersiaspecieswerecomparedsystematicallyinthisresearch.Thequalitystandardwasstudiedtootolayafoundationofhighqualityresourcesselectionandresourcesdevelopmentandutilization.Theresultshowedthat:
1.Theultrasonicextractiontimewas10min.TheAgilentZorbaxXDB-C18column(4.6mm×150mm,5μm)andabinarymobilephaseofacetonitrileand0.02%phosphoricacidsolutionwereusedwithflowrateof1.0mL/minin30℃.Thedetectionwavelengthwas236nm.Theaveragerecoveryandlinearrelationshipweregood,sothismethodcouldbeusedforbergenincontentinethnodrugRhizomaRodgersiae.
2.Thebergenincontentof4RodgersiaspeciesandvarietiesfromYunnannareaisasfollows:
TheBergenincontentofR.sambucifo1iaHemsl.isintherangeof4.73%~6.61%withtheaveragecontentof5.59%.ThehighestandlowestpopulationareFuminandYulongrespectively.TheBergenincontentofRpinnataFranch.isintherangeof2.94%-5.30%withtheaveragecontentof3.37%.ThehighestandlowestpopulationcomefromHeqingandEryuanrespectively.ThebergenincontentofR.aesculifoliaBatalinFuyuanandLushuiare5.39%and1.53%respectivelywiththeaveragecontentof3.45%.ThebergenincontentofR.sambucifoliaHemsl.var.estrigosaJ.T.PaninNinglangandLanpingis4.79%and4.22%respectivelywiththeaveragecontentof4.51%.ThebergenincontentofR.sambucifo1iaHemsl.amongdifferentindividualswithinsamepopulationchangedgreatly.Thebergenincontentwasintherangeof2.50%~7.50%andshowednormaldistributionwiththevariationcoefficientof34.15%.Thesectionalcolorishiger,thebergenincontentisdarker,thebergenincontentishigher.ThequalityofrodgersiaoriginalplantR.sambucifo1iaHemsl.isbetterthanR.pinnataFranch.Thecongenericnon-originalplantR.aesculifoliaBataliandR.sambucifoliaHemsl.var.estrigosaJ.T.Panhavepotentialvalueforbergeninextract.ThereweregreaterdifferencesinbergenincontentofdifferentRodgersiacospeciespopulationsordifferentindividualsfromthesamepopulation.ThehighBergenincontentoriginalplantcouldbeselectedwithpopulationandindividualselection.Thesectionalcolorofrodgersiacouldbeusedassensoryindexforhighqualitymedicinalmaterialevaluationandbreeding.
3.ThequalitystandardofRhizomaRodgersiaewasestablishedbasedonRodgersiaplantmorphologicalidentification,medicinalmaterialidentification,microscopicidentification,definedtemporarilyasfollows:
watercontentnohigherthan10.0%,totalashcontentnohigherthan15.0%,acid-insolubleashcontentnohigherthan13.0%,waterextractcontentnolessthan5.0%,Bergenincontentnolessthan2.5%.
4.TheHPLCfingerprinthasbeenestablishedinthisresearch.Therewere12commonpeakhasbeendetermined,theralativeretentiontimeRSDis0.005-0.019andtherelativepeakareaRSDis0.095-0.185.Thesimilarityof12batchesofsamplewashigherthan0.90.Themethodissimpleandreliable,couldbeusedforthequalitycontrolofRhizomaRodgersiae.
Keywords:
RhizomaRodgersiaeBergeninRodgersiaQualityStandard
目录
1前言1
1.1植物岩白菜素含量测定方法1
1.1.1提取方法1
1.1.2检测方法1
1.2植物的岩白菜素含量分布与变化2
1.2.1岩白菜素含量的分布2
1.2.2岩白菜素含量的变化3
1.3岩陀岩白菜素含量分布与变化研究进展4
1.3.1鬼灯檠属植物不同种间岩白菜素含量的差异4
1.3.2鬼灯檠属植物岩白菜素含量的产地差异4
1.3.3岩陀中岩白菜素含量的差异5
1.4岩陀质量标准研究进展5
1.4.1中药材质量评价的研究5
1.4.2岩陀质量标准研究的现状6
1.5本研究的目的意义6
2材料与方法7
2.1试验材料与仪器7
2.1.1试验材料7
2.1.2试剂与仪器10
2.2试验方法10
2.2.1岩陀岩白菜素提取及含量测定条件优化10
2.2.1.1HPLC色谱条件优化10
2.2.1.2标准曲线回归方程与相关系数10
2.2.1.3方法精密度测定10
2.2.1.4方法准确度测定11
2.2.1.5加样回收试验11
2.2.1.6稳定性试验11
2.2.2岩陀岩白菜素含量变化规律11
2.2.2.1不同种及其居群鬼灯檠属植物岩白菜素含量测定11
2.2.2.2同一居群不同个体的岩白菜素含量变化规律11
2.2.2.3岩陀块根断面颜色与岩白菜素含量的关系12
2.2.3岩陀药材质量标准研究12
2.2.3.1岩陀的采集鉴定12
2.2.3.2水分测定12
2.2.3.3灰分测定12
2.2.3.4浸出物测定13
2.2.4中药材岩陀指纹图谱的构建13
3结果与分析14
3.1岩陀岩白菜素含量测定方法的优化14
3.1.1色谱条件选择14
3.1.2标准曲线回归方程与相关系数15
3.1.3方法精密度16
3.1.4方法准确度16
3.1.5加样回收率16
3.1.6稳定性试验16
3.2岩陀岩白菜素含量的变化16
3.2.1鬼灯檠属不同种及其居群岩白菜素含量16
3.2.2岩陀居群内个体间岩白菜素含量的分布18
3.2.3岩陀块根断面颜色与岩白菜素含量的关系18
3.3岩陀药材质量标准的研究19
3.3.1原植物形态及药材性状19
3.3.2显微鉴定22
3.3.3水分含量23
3.3.4药材灰分测定24
3.3.4.1总灰分测定24
3.3.4.2酸不溶灰分测定25
3.3.5浸出物25
3.3.6岩白菜素含量26
3.4岩陀指纹图谱的构建26
3.4.1精密度试验相似性分析26
3.4.2重复性试验的相似性分析27
3.4.3稳定性试验的相似性分析28
3.4.4色谱分析28
4讨论31
4.1岩陀岩白菜素含量的HPLC测定方法的优化31
4.2云南岩陀及其近缘植物岩白菜素含量的差异31
4.3云南鬼灯檠属植物同种不同产地的差异31
4.4云南岩陀居群内不同个体岩白菜素含量的变化32
4.5云南岩陀断面颜色与岩白菜素含量相关性32
4.6岩陀药材质量标准33
5结论35
参考文献36
攻读硕士学位期间撰写的论文41
致谢42
1前言
岩陀为西南鬼灯檠(Rodgersiasambucifo1iaHemsl.)或羽叶鬼灯檠(RodgersiapinnataFranch.)的干燥根状茎,是云南地区傈僳族、苗族、白族习用的药物,味苦、涩,性平,具有镇咳祛痰等功效,用于治疗慢性支气管炎等疾病[12]。
岩白菜素(Ber
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