生化技术.docx
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生化技术
生化技术基础知识
1、名词解释
1生化技术
答案:
生化技术是对组成人体的生物活性物质及其代谢产物,如蛋白质(氨基酸)、核酸(核苷酸)、酶、维生素、糖类物质等进行分离提取、含量测定、活性鉴定、生化分析、制备与改造等的技术。
2膜分离技术
答案:
膜分离技术是指利用具有一定膜孔和选择透过特性的天然或人工合成的分离膜,在某种推动力(浓度差、压力差、电位差等)的作用下,实现物质分离纯化或浓缩的一种操作技术。
2、填空题
1超滤法主要可应用于和。
答案:
脱盐;浓缩
2800B台式低速离心机最高转速可达rpm。
答案:
4000
3Ultrafiltration指_______。
答案:
超滤
4尿中毒的病人通常采用生化技术中的_______技术来排出血液中的毒素。
答案:
透析
5过滤是用来分离_______和_______的一种方法。
若用来收集滤液,必须保证_______的一面干净。
答案:
固体,液体,朝向漏斗那一面
6使用离心机时,必须要注意:
(1)_____________________;
(2)__________________;(3)__________________;(4)____________________________________等问题。
答案:
负荷平衡、对称放置;开机前检查转速是否已调至最小;缓慢升速;待离心机停稳后,方可打开离心机盖取出样品
7强腐蚀性的废弃试剂、药品、废纸及其他固体废物或带有渣滓沉淀的废液均应倒入_________内,不能倒入_________内,否则会_________。
答案:
垃圾桶内,水槽,堵塞和腐蚀下水道
8要量取3.5mL的溶液,应选取量程为_________mL吸量管最佳。
答案:
5
9为便于准确快速选取所需吸量管,ISO统一规定了吸量管的色环颜色,量程0.5、1、2、5和10mL的吸量管,色环颜色分别为、、、和。
答案:
绿色,黄色,黑色,红色,桔红色
3、判断题1用微量取液器量取液体时,应将“取液、放液按钮”按至第一档取液。
答案:
正确
2新购来的玻璃仪器,表面常附有一层游离的碱性物质,最好要用1~2%的HCl浸泡。
答案:
正确
3用200μL的微量取液器量取140μL液体时,应将窗口读数调为“014”。
答案:
错误
41mL吸量管的色环颜色为红色。
答案:
错误
5取液器主要是用来精确量取大体积的溶液。
答案:
错误
6在实训中,实训结果的记录很重要,因此最好是将实训结果及原始数据牢记在心中。
答案:
错误
7保持实训室环境和仪器的整洁是做好实训的重要条件及关键。
答案:
正确
8取出的试剂和标准溶液,如未用尽,可以倒回原试剂瓶中,避免浪费。
答案:
错误
9新购来的玻璃仪器,表面常附有一层游离的碱性物质,最好要用浓HCl浸泡。
答案:
错误
10重铬酸钾洗液的清洁作用主要是应用其强还原性和强酸性。
答案:
错误
11在吸量管的上端标有“快”或“吹”字的吸量管,称为不完全流出式,在管尖上的液体不必吹出。
答案:
错误
12吸量管上的彩色环,是国际标准化组织统一规定的容积标志。
答案:
正确
13强酸或强碱的废液可以倒入水槽中。
答案:
错误
14挪动干净玻璃仪器时,勿使手指接触仪器内部。
答案:
正确
15玻璃仪器只要用自来水冲洗干净后,晾干即可使用。
答案:
错误
16盛过蛋白质溶液的器皿、量具等应马上洗,或马上浸泡入清水中,以免干涸后难以清洗。
万一干涸后,必须要用高浓度的盐水浸泡,等蛋白质溶解后再用清水洗。
答案:
错误
17用20μL的微量取液器量取11.9μL液体时,应将窗口读数调为“011”,然后将微调调至9。
答案:
错误
18在吸量管的上端标有"快"或"吹"字的吸量管,为完全流出式,在管尖上的液体要吹出。
答案:
正确
19吸量管、滴定管、容量瓶等洗涤时应用合适毛刷蘸取去污粉或肥皂水刷洗内外壁,流水冲洗至内壁光洁,不挂水珠后,再用纯水冲洗2~3次,然后置干燥箱中烘干或晾干备用。
答案:
错误
20重铬酸钾洗液铬酐越多,硫酸越浓,清洁效力越强,但洗液变绿色后则不宜再使用。
答案:
正确
21配制重铬酸钾洗液时应注意自身安全防护,动作轻缓,用热水溶解重铬酸钾后,慢慢边加边搅拌加入工业用硫酸中。
答案:
错误
22吸量管放液时,管尖应接触受器内壁(不要插入受器内原有液体中),放松食指,让液体自然流入受器内,放完后稍停留一会。
答案:
正确
23电磁搅拌混匀法是通过磁力搅拌混匀液体,适用于难溶性固体物质溶解、透析、酸碱自动滴定、pH梯度滴定等。
答案:
正确
24倒转混匀法适用于有塞量筒和容量瓶,当试管内容物较多,也可用手指肚封口以防液体溢出。
答案:
错误
25用取液器量取溶液时应慢吸、快放,放液时应将“取液、放液按钮”按至第二档。
答案:
正确
26欲量取0..75mL溶液时,可选取1mL吸量管,准确取液至吸量管上的“0.75”mL刻度线,然后准确放液至受器。
答案:
错误
27使用吸量管时应注意准确量取溶液,因此在调准刻度和放液时都应用食指堵住和控制上口,慢慢放液,保证量取量准确。
答案:
错误
28膜分离技术可用于纯化水、淡化水、去除热原(脂多糖)和除菌过滤等。
答案:
正确
29膜分离技术不可用于进行空气过滤。
答案:
错误
30电渗析法的推动力主要是压力差。
答案:
错误
31错流过滤是指膜孔与滤液流动方向垂直,膜孔不易堵塞。
答案:
正确
32常规过滤是指膜孔与滤液流动方向平行,膜孔不易堵塞。
答案:
错误
4、单选题
1我们在制备鸡血红蛋白时,是使用()方法使其红细胞破裂的。
A:
激烈搅拌
B:
高渗
C:
低渗
D:
等渗
答案:
C
2尿中毒的病人通常采用生化技术中的()技术来排出血液中的毒素。
A:
超滤技术
B:
层析技术
C:
透析技术
D:
电泳技术
答案:
C
3使用取液器取液时,若将“取液、放液按钮”按至“第二挡”,会使取液量比欲量取体积()。
A:
增大
B:
减少
C:
没有影响
D:
可能增大,也可能减少
答案:
A
4要量取1.5mL的溶液,应选取量程为()mL吸量管最佳。
A:
1
B:
2
C:
5
D:
10
答案:
B
5使用取液器放液时,若将“取液、放液按钮”按至“第一挡”,可能会使取液量比欲量取体积()。
A:
偏大
B:
偏少
C:
没有影响
D:
可能增大,也可能减少
答案:
B
6肥皂水、洗衣粉、去污粉溶液等清洗原理是利用其两性性质,即(),形成乳化作用,而使脂肪、蛋白质及其他黏着性物质溶解松弛。
A:
酸性和碱性
B:
极性和非极性
C:
导电性和绝缘性
D:
溶解性和不溶性
答案:
B
7调节取液器体积至所需时,可通过螺旋旋钮进行调节,但切勿超量程调节,否则将损坏取液器,如使用1000μL取液器时,取液器窗口数值最大不能超过()μL。
A:
1
B:
10
C:
100
D:
1000
答案:
D
8当沉淀黏稠、颗粒太小或总容量太少而又需定量测定时,要分离沉淀和溶液,通常采用()法。
A:
透析
B:
超滤
C:
过滤
D:
离心
答案:
D
9台式低速离心机最高转速一般可达()r/min。
A:
1000
B:
4000
C:
8000
D:
12000
答案:
B
10超滤的英文是()。
A:
Filtration
B:
Micrfiltration
C:
Ultrafiltration
D:
Dialysis
答案:
C
11过滤是用来分离()的。
A:
固体与固体
B:
固体与液体
C:
固体与气体
D:
液体与气体
答案:
B
12若要通过过滤来获得滤渣,滤纸应该()干净。
A:
朝向漏斗一面
B:
背向漏斗一面
C:
两面都要
D:
两面都可以不
答案:
B
13强腐蚀性的废弃试剂、药品、废纸及其他固体废物或带有渣滓沉淀的废液均应倒入(),不能倒入()。
A:
水槽,垃圾桶内
B:
垃圾桶,水槽内
C:
水槽,储液罐
D:
储液罐,垃圾桶
答案:
B
14要量取0.35mL的溶液,应选取量程为()mL吸量管最佳。
A:
0.4
B:
0.5
C:
0.8
D:
1
答案:
B
15为便于准确快速选取所需吸量管,ISO统一规定了吸量管的色环颜色,量程0.5、1、2、5和10mL的吸量管,色环颜色分别为()。
A:
绿色,黄色,黑色,桔红色,红色
B:
红色,桔红色,黑色,绿色,黄色
C:
绿色,黄色,黑色,红色,桔红色
D:
黑色,红色,桔红色,黄色,绿色
答案:
C
16纳米过滤的英文是()。
A:
Nanofiltration
B:
Micrfiltration
C:
Ultrafiltration
D:
Dialysis
答案:
A
17接近于无孔的膜是()。
A:
透析膜
B:
超滤膜
C:
微孔滤膜
D:
反渗透膜
答案:
D
18电渗析的推动力主要是()。
A:
浓度差
B:
压力差
C:
电位差
D:
浓度差和压力差
答案:
C
5、多选题
1生物化学技术的主要技术包括()等。
A:
层析技术
B:
电泳技术
C:
离心技术
D:
分光光度技术
E:
沉淀技术
答案:
A,B,C,D,E
2生物化学技术研究的内容有()。
A:
组成生物体物质的含量测定
B:
组成生物体物质的分离提取
C:
组成生物体物质的活性测定
D:
组成生物体物质的生化分析
E:
组成生物体物质的功能研究
答案:
A,B,C,D
3随着生物技术及生物制药行业的发展,生物化学技术的应用越来越广,目前其主要能应用于()。
A:
药品生产
B:
药品检验
C:
疾病诊断
D:
疾病治疗
E:
科学研究
答案:
A,B,C,D,E
4下列哪些方法不正确?
()
A:
试管刷或粗糙的布或纸擦洗比色皿
B:
NaOH溶液或强氧化剂清洗
C:
盐酸溶液清洗比色皿
D:
乙醇溶液清洗比色皿
E:
重铬酸钾洗液清洗比色皿
答案:
A,B,E
5下列吸量管的操作哪些不正确?
()
A:
调准刻度时应将吸管没入液面
B:
放液时管尖接触受器内壁,不能插入受器内原有液体中
C:
取液应插入待取液中适当深度
D:
应预先捏扁洗耳球再放到吸量管上口吸液
E:
放液时吸量管应保持45°角
答案:
A,E
6超滤法主要可应用于()。
A:
除去热原
B:
除菌过滤
C:
脱盐
D:
浓缩
E:
除去阳离子
答案:
A,C,D
7使用离心机时,必须要注意()问题。
A:
离心管(及其套管)负荷平衡
B:
离心管(及其套管)对称放置
C:
开机前检查转速是否已调至最小
D:
缓慢升速
E:
待离心机停稳后,方可打开离心机盖取出样品
答案:
A,B,C,D,E
8透析的分离机理主要涉及()。
A:
离子迁移
B:
扩散
C:
筛分
D:
溶解
E:
以上都有
答案:
B,C
9膜分离技术的用途包括()等。
A:
精制纯化(脱盐、分级分离)
B:
浓缩
C:
除菌过滤
D:
空气过滤
E:
去除热原
答案:
A,B,C,D,E
10以下属于膜分离技术的有()。
A:
透析
B:
微滤
C:
超滤
D:
电渗析
E:
反渗透
答案:
A,B,C,D,E
6、简答题
1实验结果应如何记录?
Ø
答案:
专用记录本,简要,准确如实
2如何防止药品污染、混杂?
答案:
及时盖盖,多取的勿倒回
3使用贵重、精密仪器应注意什么?
Ø
答案:
按操作规程,故障及时报告,用后登记
4废弃的强酸、强碱如何处置?
Ø
答案:
稀释后再倒入水槽
5含渣滓的废液如何处置?
Ø
答案:
倒入垃圾桶
6盛蛋白质的玻璃仪器用完应注意什么?
答案:
马上洗或浸泡,万一干涸,用生理盐水或尿素洗液浸泡
7使用比色杯应注意什么?
答案:
用后即洗;手勿接触光面;不能用刷或粗糙的纸擦;勿用较强碱或强氧化剂清洗
8重铬酸钾洗液的清洗原理和使用注意?
答案:
强酸性和强氧化性;防腐蚀,延长使用寿命
9吸量管使用主要应注意什么?
答案:
选管正确,取液插入深度适宜,取液量、放液准确,防污染
10简述如何使用取液器?
答案:
选枪→调体积→安装吸头→取液→放液→退枪尖→洗枪尖
11欲量取12.5μL、98.6μL、384μL,选何样的取液器,如何调节?
答案:
量程:
201001000μL
调节为:
125098(6)038(4)
12混匀的方法有哪些?
混匀时应注意什么?
答案:
旋转、指弹、倒转、吸量管、玻棒、甩动、电磁搅拌、振荡器等。
勿溅、无污染、勿用手接触溶液
13过滤时为什么要保证滤纸一面干净?
答案:
防止样品被污染
14简述如何使用低速台式离心机?
答案:
检查(开关、调速旋钮、软垫等)→平衡(带套管)→对称放置→缓慢升速→到时降速→停稳取管→收尾
15使用低速台式离心机应特别注意哪些问题?
答案:
套管中有无软垫;负荷平衡、平衡管对称放置;缓慢升速;停稳取样
16透析时,若发现透析袋内容物中的大分子物质出现在透析液中,可能是什么情况?
如何解决?
答案:
透析袋破裂或透析夹未夹紧;重新将透析液作为待透析液透析或浓缩后再透析
17在读取刻度尺、滴定管、吸量管,以及刻度式分光光度计时,应如何读数?
答案:
要搞清楚刻度范围和精度,并注意有效数字,必须读出(也只能读出)一位估计数
18有一个同学不小心将牛血清白蛋白和一瓶硫酸钠溶液放混在一起,你可以将其分开吗?
如何做?
如果不小心将这2瓶溶液混合在一起了,你可以采用什么生化技术将其分离开吗?
层析分离技术
1、名词解释
1层析技术
答案:
利用混合物中各组分的物理、化学性质不同使各组分以不同程度分布在两相中而达到分离的技术。
2固定相
答案:
其位置固定不动的一相。
3流动相
答案:
能进行流动的一相,当其流过固定相时各组分能以不同的速度移动。
4吸附层析法
答案:
固定相是固体吸附剂,利用各组分与吸附剂表面的吸附能力不同而分离的层析法。
5分配层析法
答案:
固定相是液体,利用各组分在两互不相溶液相中分配系数不同而分离的层析法。
6离子交换层析法
答案:
固定相是离子交换剂,利用各组分对离子交换剂亲和力不同而分离的层析法。
7亲和层析法
答案:
固定相能与混合物中某一种待分离组分高度亲和结合,而与其他组分没有亲和力,是利用各种待分离组分的生物学性质不同而分离的层析法。
8凝胶过滤法
答案:
固定相是固定在一种多孔性凝胶颗粒中的液体,利用各组分的分子形状和大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度不同而分离的层析法。
9吸附剂
答案:
能够将其他物质聚集到其表面上的物质。
10被吸附剂物
答案:
能聚集于吸附剂表面的物质。
11解吸作用
答案:
在一定条件下,被吸附物离开吸附剂表面的现象。
12洗脱
答案:
上样后,加入溶剂冲洗层析柱的过程。
13洗脱剂
答案:
洗脱用的溶剂。
14薄层层析
答案:
是将固定相的支持物或吸附剂涂布于支持板上(一般为玻璃板)制成薄层而进行的层析技术。
15柱层析
答案:
是将固定相或其支持物装填于层析柱中,并通过流动相的洗脱,使待分离物质以不同程度从柱中流出的层析技术。
16分配系数
答案:
指一种溶质在两种互不相溶的溶剂中溶解达到平衡时,该溶质在两相溶剂中的浓度比值。
17纸层析
答案:
以滤纸作为支持物,以滤纸纤维的结合水作为固定相,以有机溶剂作为流动相的层析技术。
18气相层析
答案:
以气体作为流动相(载气,高压气瓶供给),以吸附于惰性固体上的液体作为固定相的层析技术。
19阳离子交换剂
答案:
带酸性基团,可解离出H+等阳离子的交换剂,能与其他进行阳离子交换。
20阴离子交换剂
答案:
带碱性基团,可解离出OH-等阴离子的交换剂,能与其他进行阴离子交换。
21配基
答案:
固定在亲和层析介质骨架(载体或基质)上的结合分子。
22载体
答案:
高分子不溶性物质,可在其上连接活性基团或配基等。
23洗脱体积
答案:
表示某一组分物质从加进层析柱到最高峰出现时,所流出的洗脱液体积。
24脱盐
答案:
从高分子(如:
蛋白质、核酸、多糖等)溶液中去除低分子量盐杂质的过程。
2、填空题
1我们在进行薄层吸附层析时,倒板稍晾干后,置110℃烘箱内加热30分钟,称为______,其目的是________。
答案:
活化,除去游离水、提高吸附活性
2常用的吸附剂有______、_________、_______等。
答案:
氧化铝,硅胶,活性炭
3层析技术中的两相是指________相和______相。
其中位置固定不动的称为_______相,而________的称为_______相。
在纸层析法分离氨基酸的实训中,我们是利用_______作为_______相,而利用_______为_______相。
答案:
固定相,流动相,固定相,能进行流动的一相,流动,水,固定,正丁醇(有机溶剂),流动
4具有酸性基团的交换剂可离解出_______离子,能与其他_______离子交换,故称为_______。
答案:
H+,阳,阳离子交换剂
5糖的薄层层析实训中所用的固定相是_______,流动相是_______。
答案:
硅胶G,乙酸乙酯等
6常用的抗凝剂有_______、_______等,在本次实训中是使用_______来作为鸡血抗凝剂的。
对不加抗凝剂的血液进行离心,得到的淡黄色液体称为_______。
答案:
柠檬酸钠,草酸钾,柠檬酸钠或肝素钠,血清
7对不加抗凝剂的血液进行离心,得到的淡黄色液体称为。
血红蛋白存在内,可通过方法使其释放出来。
答案:
血清,红细胞,低渗(加纯水)
8对加入抗凝剂的血液进行离心后,所得到的淡黄色上清液体称为。
答案:
血浆
9层析法的英文为。
答案:
Chromatography
10TLC表示。
答案:
薄层层析(ThinLayerChromatography)
11LC是指。
答案:
液相层析(LiquidChromatography)
12HPLC是指。
答案:
高效液相层析法(HighPerformanceLiquidChromatography)
13Sepharose是指。
答案:
琼脂糖凝胶
14层析技术常利用混合物中各分子的物理化学性质不同来进行分离,常利用的物理化学性质主要、、、和。
答案:
形状和大小,极性,吸附力,亲和力,分配系数
15混合物中不同组分,由于与吸附剂的吸附力与解吸附力不同,在吸附柱内或薄板上的移动距离不同从而可以得以分离,当某物质与吸附剂的吸附力较小时,解吸附力,移动较。
答案:
较强,快
3、判断题
1买来的商品凝胶泡水后马上可以进行装柱。
答案:
错误
2层析技术种类很多,包括分配层析、吸附层析、柱层析、薄层层析、液相层析等等。
答案:
错误
3阴离子交换剂是指自身带负电,能吸附其它阳离子并发生交换的物质。
答案:
错误
4若进行吸附柱层析,与吸附剂吸附能力低的组分,则解吸力高,移动慢,从柱内洗脱出来晚。
答案:
错误
5在进行薄层层析时,展开剂应浸过点样线。
答案:
错误
6磺酸基苯乙烯树脂是属于阴离子交换剂。
答案:
错误
7分离性质极为相似的生化物质可考虑采用凝胶过滤层析法。
答案:
错误
8分子筛效应即为筛选效应,分子小的物质能较容易通过网状结构的凝胶,移动速度快。
答案:
错误
9反相层析法简称RP-HPLC,其固定相为非极性键合相,常见的有十八烷基(C18)、辛烷基(C8)等。
答案:
正确
10层析法,也称色谱法,是主要用来分离有色物质的技术。
答案:
错误
11FPLC是指蛋白质快速液相层析。
答案:
正确
12硅胶G是在硅胶中掺入13%的煅石膏(CaSO4)而制成的。
答案:
正确
13连接层析柱出口至紫外检测仪时应上进下出。
答案:
错误
14层析技术是指利用混合物中各组分的物理、化学性质不同使各组分以不同程度分布在两相中而达到分离的技术。
答案:
正确
15固定相是指物理状态固定不发生改变,也就是不动的一相。
答案:
错误
16流动相是指能进行流动的一相,当其流过固定相时各组分能以不同的速度移动。
答案:
正确
17吸附层析法的固定相是固体吸附剂,利用各组分与吸附剂表面的吸附能力不同而分离的层析法。
答案:
正确
18分配层析法的属于液液层析,其固定相是液体,利用各组分在两互不相溶液相中分配系数不同而分离的层析法。
答案:
正确
19离子交换层析法的固定相是离子交换剂,利用各组分对离子交换剂亲和力不同而分离的层析法。
与离子交换剂能发生交换的分子先被洗脱。
答案:
错误
20亲和层析法是指固定相能与混合物中某一种待分离组分高度亲和结合,而与其他组分没有亲和力,是利用各种待分离组分的生物学性质不同而分离的层析法。
答案:
正确
21凝胶过滤法的固定相是固定在一种多孔性凝胶颗粒中的液体,利用各组分的分子形状和大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度不同而分离的层析法。
答案:
正确
22吸附剂是指能够将其他物质聚集到其表面上的物质。
答案:
正确
23被吸附剂物是能聚集于吸附剂表面的物质。
答案:
正确
24解吸作用是指在一定条件下,被吸附物离开吸附剂表面的现象。
答案:
正确
25洗脱只是样品上样后,加入溶剂(即洗脱剂)冲洗层析柱的过程。
答案:
正确
26洗脱剂是指洗脱用的溶剂。
答案:
正确
27薄层层析是将固定相的支持物或吸附剂涂布于支持板上(一般为玻璃板)制成薄层而进行的
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