幽门螺杆菌在胃癌发生过程中的作用机制Word格式文档下载.docx
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Hp阳性慢性胃炎、不典型增生和胃癌组织中iNOS,VEGF和p21的表达显着高于Hp阴性组,Hp阳性不典型增生及胃癌组织中p185的表达显着高于Hp阴性组;
慢性胃炎、不典型增生和胃癌组织中Hp与iNOS,VEGF和p21表达呈正相关,不典型增生和胃癌组织中Hp与p185表达呈正相关.结论:
Hp的致癌作用与其HpcagA的过度表达,增强胃黏膜细胞中iNOS和VEGF的表达,促进胃黏膜细胞癌基因cerbB2和ras的活化密切相关.
【关键词】胃肿瘤;
血管内皮生长因子类;
一氧化氮合酶;
癌基因;
螺杆菌,幽门;
细胞毒素相关基因
0引言
幽门螺杆菌感染与胃癌的发生发展密切相关[1,2],但Hp确切的致癌机制尚不清楚.我们通过对慢性胃炎、胃黏膜不典型增生及胃癌组织中Hp和细胞毒素相关基因阳性株感染率,诱导型一氧化氮合酶,血管内皮生长因子,cerbB2和ras癌基因产物p185和p21蛋白表达情况及Hp与iNOS,VEGF,p185和p21蛋白表达的相关性研究,探讨Hp可能的致癌机制.
1材料和方法
材料
解放军第5医院200201/200312纤维内窥镜活检存档蜡块标本96例,胃癌39例,男32例,女7例,平均年龄岁;
胃黏膜不典型增生24例,男17例,女7例,平均年龄岁;
慢性胃炎33例,男14例,女19例,平均年龄岁.
方法
标本40g/L甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋,4μm厚连续切片.Hp感染采用WarthinStarry嗜银染色,Hp呈棕黑色,弯曲成弧形、S形或海鸥状,多位于胃粘膜表面和/或胃小凹及胃癌旁黏膜腺窝内.HpcagA基因的检测采用PCR法.cagA引物序列:
引物1:
5′GATAACAGGCAAGCTTTTGAGG3′,引物2:
5′CTGCAAAAGATTGTTTGCGAGA3′,由上海生工生物工程技术服务有限公司合成;
TagDNA酶、PCR染液购自北京赛百圣基因技术有限公司;
dNTP购自南京生兴生物技术有限公司.取石蜡块切片3片,经二甲苯脱蜡后,消化液消化,酚氯仿抽提DNA,-20℃备用.PCR反应体系为50μL,包括DNA模板2μL,cagA引物1μL,cagA引物2 μL,TagDNA酶μL,10×
Tag缓冲液5μL,PCR染液5μL,dNTP1μL,ddH2O35μL.PCR反应条件:
95℃预变性4min后,95℃变性60s,50℃退火60s,72℃延伸60s,共30个循环,循环结束后72℃延伸7min.反应结束后取13μL扩增水相用15g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定,在349bp出现电泳带为阳性,否则为阴性.
iNOS,VEGF,p185和p21的表达采用免疫组化SP法.实验试剂iNOS兔抗人多克隆抗体、人抗兔免疫组化试剂盒、iNOS阳性对照片购自武汉博士德公司;
VEGF,p185和p21鼠抗人mAb,免疫组化试剂盒及DAB显色液,iNOS,VEGF,p185和p21阳性对照片购自福州迈新生物技术有限公司.阴性对照以PBS代替第一抗体,操作方法均按试剂盒说明书进行.iNOS和VEGF主要为细胞质着色,p185和p21癌基因蛋白主要表达在细胞质和/或细胞膜,以上部位出现棕黄色颗粒视为阳性细胞,计数5个高倍视野,以阳性细胞数所占比例分为“-”:
阳性细胞数5%;
“+”:
5%≤阳性细胞数25%;
“”:
25%≤阳性细胞数50%.
统计学处理:
采用计算机统计分析软件进行,胃黏膜组织Hp和HpcagA+表达情况,Hp与iNOS,VEGF,p185和p21表达的关系采用χ2检验,iNOS,VEGF,p185和p21表达情况采用秩和检验,Hp与iNOS,VEGF,p185和p21表达的相关性采用Spearman等级相关分析.
2结果
胃黏膜不典型增生和胃癌组织中Hp和HpcagA+株感染率显着高于慢性胃炎组织;
不典型增生和胃癌组织中iNOS,VEGF,p185和p21的表达显着高于慢性胃炎组织;
Hp阳性慢性胃炎、不典型增生和胃癌组织中iNOS,VEGF和p21的表达显着高于Hp阴性组,Hp阳性不典型增生及胃癌组织中p185的表达显着高于Hp阴性组;
慢性胃炎、不典型增生和胃癌组织中Hp与iNOS,VEGF和p21表达呈正相关,不典型增生和胃癌组织中Hp与p185表达呈正相关.表1胃黏膜组织Hp和HpcagA(+)株感染率表2胃黏膜组织iNOS,VEGF,p185和p21的表达表3胃黏膜组织Hp与iNOS,VEGF,p185和p21表达的关系表4Hp与iNOS,VEGF,p185和p21表达的相关分析
3讨论
Hp感染后可能是通过其产生的细胞毒素,使组织损伤,胃黏膜上皮恶性转化.CagA表达的cagA蛋白是Hp产生的主要细胞毒素.CagA阳性的菌株感染与胃癌的发生密切相关[3,4].本研究结果显示,胃黏膜不典型增生和胃癌组织中Hp和HpcagA+株感染率显着高于慢性胃炎组织,证实Hp感染是慢性胃炎向胃黏膜不典型增生及胃癌发展的重要启动因子,cagA的存在与Hp的致癌作用密切相关.iNOS通过促进细胞增生,促进肿瘤血管形成,增加肿瘤细胞侵袭、转移等机制参与胃癌的发生、发展过程[5].VEGF是一种内皮细胞的特异有丝分裂原,可特异性促进血管内皮细胞分裂增殖并增加血管通透性,与胃癌发生、发展密切相关[6].我们研究发现,不典型增生和胃癌组织中iNOS和VEGF的表达显着高于慢性胃炎组织;
Hp阳性慢性胃炎、胃黏膜不典型增生及胃癌组织中iNOS和VEGF的表达显着高于Hp阴性组;
慢性胃炎、胃粘膜不典型增生及胃癌组织中Hp感染与iNOS和VEGF的表达呈正相关.表明iNOS和VEGF在胃癌的发生发展过程中起促进作用;
Hp感染可增强胃黏膜细胞中iNOS和VEGF的表达.在正常情况下癌基因cerbB2和ras处于非激活状态,与细胞生长分化过程中信号转导有关.当受到某些致癌因素作用后,其构型改变或表达失控而被激活,导致细胞信号转导发生障碍,引起胃癌发生[7,8].癌基因cerbB2和ras通过其产物基因蛋白p185和p21来表达其功能.本结果显示,不典型增生和胃癌组织中p185和p21的表达显着高于慢性胃炎组织,证实癌基因cerbB2和ras的扩增导致p185和p21蛋白过度表达与胃癌的发生、发展有关.我们还发现,Hp阳性胃黏膜不典型增生及胃癌组织中p185蛋白的表达显着高于Hp阴性组;
胃黏膜不典型增生及胃癌组织中Hp与p185蛋白表达呈正相关.Hp阳性慢性胃炎、胃黏膜不典型增生及胃癌组织中p21蛋白的表达显着高于Hp阴性组,慢性胃炎、胃黏膜不典型增生及胃癌组织中Hp与p21蛋白的表达呈正相关.说明Hp感染可引起胃黏膜细胞的癌基因cerbB2和ras活化或突变,使细胞增殖加快,促进胃癌发生发展.
【参考文献】
[1]TakeuchiK,OhnoY,TsuzukiY,etal.Helicobacterpyloriinfectionandearlygastriccancer[J].JClinGastroenterol,2003;
36:
321-324.
[2]YaoYL,XuB,SongYG,etal.OverexpressionofcyclinEinMongoliangerbilwithHelicobacterpyloriinducedgastricprecancerosis[J].WorldJGastroenterol,2002;
8:
60-63.
[3]WuAH,CrabtreeJE,BernsteinL,etal.RoleofHelicobacerpyloriCagA+strainsandriskofadenocarcinomaofthestomathandesophagus[J].IntJCancer,2003;
103:
815-821.
[4]张勇,曾维政,蒋明德,等.胃癌组织中HpcagA基因表达[J].第四军医大学学报,2002;
23:
451-454.
ZhangY,ZengWZ,JiangMD,etal.ExpressionofHpcagAgeneingastriccarcinomatissues[J].JFourthMilMedUniv,2002;
[5]ShenJ,WangRT,WangLW,etal.Anovelgeneticpolymorphismofinduciblenitricoxidesynthaseisassociatedwithanincreasedriskofgastriccancer[J].WorldJGastroenterol,2004;
10:
3278-3283.
[6]GongW,WangL,YaoJC,etal.Expressionofactivatedsignaltransducerandactivatoroftranscription3predictsexpressionofvascularendothelialgrowthfactorinandangiogenicphenotypeofhumangastriccancer[J].ClinCancerRes,2005;
11:
1386-1393.
[7]JiangYA,ZhangYY,LuoHS,etal.Mastcelldensityandthecontextofclinicopathologicalparametersandexpressionofp185,estrogenreceptor,andproliferatingcellnuclearantigeningastriccarcinoma[J].WorldJGastroenterol,2002;
1005-1008.
[8]SeoYH,JooYE,ChoiSK,etal.Prognosticsignificanceofp21andp53expressioningastriccancer[J].KoreanJInternMed,2003;
18:
98-103.
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- 幽门 螺杆 胃癌 发生 过程 中的 作用 机制