微生物学检验重点知识总结Word格式.docx
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G+菌、G-菌不同
革兰阳性菌细胞壁特殊组分:
磷壁酸
革兰阴性菌细胞壁特殊组分:
外膜
革兰阴性菌细胞壁肽聚糖:
聚糖骨架、四肽侧链
2.细胞壁的功能:
(1)维持细菌固有形态和抵抗低渗作用。
(2)物质交换作用。
(3)屏障作用。
(4)免疫作用。
(5)致病作用。
(6)与细菌药物敏感性有关。
G+菌与G-菌细胞壁结构比较
•细菌细胞膜的结构与真核细胞基本相同,由磷脂和多种蛋白质组成,但不含胆固醇。
•细菌细胞膜可形成一种特有的结构,称中介体。
2.细菌荚膜、鞭毛和菌毛的功能。
荚膜:
功能:
有抗吞噬和抵抗杀菌物质的杀菌作用,增强细菌的侵袭力,构成细菌致病力的重要因素之一。
②具有免疫原性。
③鉴别细菌和血清学分型
鞭毛:
细菌的运动器官
菌毛
普通菌毛:
具有黏附性,与细菌致病性有关。
性菌毛:
与细菌的遗传变异相关
3.芽胞结构特点、意义、与消毒灭菌的关系;
细菌L型的形态特征、检验要点。
芽胞:
某些细菌(主要为革兰阳性杆菌)在一定条件下,细胞质浓缩脱水而形成一个折光性很强,具有多层膜状结构、通透性很低的圆形或卵圆形的小体。
L型细菌:
细胞壁缺陷的细菌。
常发生在作用于细胞壁的抗菌药物治疗过程中。
根据细胞壁缺陷程度分:
原生质体(完全失去细胞壁,见于G+菌,仅在高渗环境中存活)
原生质球(细胞壁部分缺损,见于G-菌,在高渗或非高渗环境中均能存活)
4.G+菌和G-菌细胞壁结构的差异及其意义。
第二节细菌的生理
细菌的生长条件,生长周期及各期的特点;
IMViC试验的组成及机制;
细菌分解及合成代谢产物的种类及意义。
细菌的生长繁殖
(一)细菌生长繁殖的条件
1.充足的营养物质包括:
水、碳源、氮源、生长因子等。
2.适宜的酸碱度多为pH7.2~7.6。
3.合适的温度多数病原菌为35℃~37℃。
4.必要的气体环境主要是O2和CO2。
按细菌对O2的需要与否,将细菌分为:
细菌生长繁殖的规律
细菌的繁殖方式:
无性二分裂。
细菌的繁殖速度:
大多数细菌20~30分钟即可分裂一次。
2.细菌的营养类型和营养机制,自氧菌与异氧菌的概念。
3.细菌的生长曲线及其特点。
(一)能量代谢
细菌获取能量的途径——生物氧化。
细菌能量代谢的主要类型:
(二)分解代谢
检测细菌糖分解产物的常用试验:
糖发酵试验、甲基红试验、VP试验等。
检测细菌蛋白质和氨基酸分解产物的常用试验:
吲哚(靛基质)试验、硫化氢试验、苯丙氨酸脱氨酶试验等。
其他检测细菌分解产物的常用试验:
尿素分解试验、枸橼酸盐利用试验等。
第三节细菌与环境
1正常菌群的概念和生理功能;
条件致病菌的概念
2.正常菌群的生理功能;
3.消毒、灭菌、无菌、无菌操作等概念;
高温消毒灭菌法及其应用。
二、细菌的控制
(一)基本概念:
消毒杀死物体或介质中病原微生物的方法。
灭菌杀灭物体或介质中所有微生物的方法。
无菌无活菌存在的状态。
无菌操作防止微生物进入机体或物体的操作技术。
防腐防止或抑制细菌生长繁殖的方法。
4.常用物理和化学消毒灭菌方法及其应用;
噬菌体与宿主的相互关系。
第二章真菌的基本性状
真菌的概念
真菌的分类真菌孢子与细菌芽胞的区别
第三章病毒的基本性状
病毒的大小
病毒的结构
病毒的增殖
病毒的复制周期
第四章微生物与感染
细菌致病三大因素
细菌内外毒素的区别
毒血症、菌血症、败血症、脓毒血症的概念
全身感染的类型
第二篇微生物检验的基本技术
第五章细菌的检验技术
第一节细菌形态检验技术
细菌染色的一般程序
染色标本检查的一般程序
革兰氏染色法、抗酸染色法的原理、方法。
2.革兰染色法
【方法】
第二节细菌的接种与培养技术
调配—溶化—调Ph—过滤澄清—分装—灭菌—检定—保存
细菌在各种培养基上的生长现象及观察要点。
培养基的概念
培养基的分类
第三节细菌的生化鉴定技术
糖(醇,苷)类发酵试验、O/F试验、MR试验、VP试验的原理、操作、结果判定要点及其应用;
I试验、C试验、氧化酶、触酶、血浆凝固酶氢氧化钾拉丝试验及KIA和TSI的试验原理、操作要领、观察结果要点及其应用。
一、碳水化合物的代谢试验
1、糖(醇、苷)类发酵试验
原理:
多糖→单糖→丙酮酸→酸性产物(或产气)
→pH↓→呈酸性变色(或出现气泡
2、O/F试验
根据细菌在分解葡萄糖的代谢过程中对氧分子需求的不同,将细菌分为氧化、发酵和产碱型三类
3、甲基红试验
细菌发酵葡萄糖,产生丙酮酸,进一步分解生成大量混合酸,使培养pH下降至4.4以下,加入甲基红后,呈现红色反应。
为甲基红试验阳性。
4、V-P试验
细菌分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇,在碱性环境中,乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰,二乙酰与胍基化合物结合,生成红色化合物,是为V-P试验阳性。
5、β-半乳糖苷酶试验(ONPG)
有的细菌可产生β-半乳糖苷酶,能分解邻硝基酚β-D半乳糖苷(ONPG)而生成黄色的邻硝基苯酚,该试验也称为ONPG试验。
6、七叶苷水解试验
某些细菌能分解七叶苷产生葡萄糖与七叶素,七叶素与培养基中的Fe2+结合后,形成黑色的化合物,使培养基变黑。
二、蛋白质和氨基酸的代谢
2、硫化氢试验
细菌产生酶,分解含硫氨基酸生成硫化氢,硫化氢与培养基中的亚铁盐或铅盐结合生成黑色化合物。
3、尿素酶试验
细菌产生脲酶,水解尿素生成氨和二氧化碳,培养基呈碱性反应
4、苯丙氨酸脱氨酶试验
细菌产生苯丙氨酸脱氨酶,使苯丙氨酸脱氨形成苯丙酮酸,苯丙酮酸与三氯化铁作用,形成绿色化合物
三、碳源利用试验
枸橼酸盐利用试验
有的细菌能利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源,细菌在生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐,使培养基呈碱性反应
四、酶类试验
1、氧化酶(细胞色素氧化酶)试验
某些细菌具有氧化酶(细胞色素氧化酶),能将二甲基对苯二胺或四甲基对苯二胺氧化生成红色的醌类化合物
2、触酶试验
细菌产生的触酶(过氧化氢酶)能催化过氧化氢放出初生态氧,继而形成氧分子出现气泡。
3、凝固酶试验(试管法)
金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白。
4、凝固酶试验(玻片法)
金黄色葡萄球菌能产生凝固酶,使血浆中的纤维蛋白原转变为不溶性的纤维蛋白
5、硝酸盐还原试验
某些细菌能还原培养基中的硝酸盐为亚硝酸盐,亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的对氨基苯磺酸作用生成重氮磺酸,再与α-萘胺结合,生成N-α-萘胺偶氮苯磺酸(红色化合物
第六章真菌检验技术
真菌感染性疾病的微生物学检查原则
第七章病毒检验技术
病毒标本的采集和运送注意事项;
第八章细菌对抗菌药物敏感试验
药物敏感试验的基本概念、常用方法
抗菌药物敏感试验方法纸片扩散法稀释法E-test法
需氧菌及兼性厌氧菌的药物敏感试验(K-B法和稀释法的原理、方法、结果判断及正确发报告)。
第三篇常见微生物鉴定技术
第十章需氧和兼性厌氧球菌
葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌的主要形态特征、培养特性、分类依据及分类;
病原性球菌标本采集种类、检验鉴定程序、鉴定要点、检验鉴定依据及报告要点。
第十一章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌
第一节肠杆菌科
概述
肠杆菌科细菌:
1.G-杆菌,多数有鞭毛、菌毛
2.发酵葡萄糖,兼性厌氧
3.氧化酶阴性
4.还原硝酸盐为亚硝酸盐
5.触酶(+)
肠道选择性培养基:
麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂、SS琼脂等
肠杆菌科抗原:
O抗原(菌体抗原),K抗原(荚膜抗原),H抗原(鞭毛抗原)等
肠杆菌科鉴定依据:
1.革兰染色
2.触媒、氧化酶、硝酸盐还原
3.KIA、MIU、IMViC,其他生化反应
4.血清玻片凝集(鉴定到种、型或血清型)
IMViC试验:
吲哚(I)、甲基红(M)、VP(V)、枸橼酸盐利用(C)四种试验,常用于鉴定肠道杆菌。
二、埃希菌属
形态染色:
1.短杆菌
2.革兰染色阴性
3.有鞭毛
4.有菌毛
培养特性:
符合肠杆菌特点
EMB——紫黑色有金属光泽乳糖发酵菌落
S-S——桃红色乳糖发酵菌落
生化反应:
IMViC(++--)
大肠杆菌KIA:
AA+-
血清型表示法:
O:
K:
H
ETEC肠毒素:
耐热肠毒素(ST)
不耐热肠毒素(LT),65oC30min被破坏
引起腹泻的大肠埃希菌:
肠产毒性大肠埃希菌ETEC
肠致病性大肠埃希菌EPEC
肠侵袭性大肠埃希菌EIEC
肠出血性大肠埃希菌EHEC
肠凝聚性大肠埃希菌EAEC
EIEC毒力测定试验:
豚鼠眼结膜试验
卫生学标准:
每ml饮水中细菌总数≤100个,每1000ml水中大肠杆菌菌群数≤3个,每100ml瓶装汽水、果汁中,大肠杆菌菌群数≤5个。
三、沙门菌属
对人类有致病性:
肠热症;
食物中毒;
败血症
G-杆菌;
周身鞭毛
培养和生化反应:
不分解乳糖分解葡萄糖;
分解蛋白质,产生H2S
伤寒沙门菌菌落特征(EMB、MAC):
无色透明菌落
伤寒沙门菌菌落特征(SS):
无色透明或半透明,中心黑色菌落
伤寒沙门菌KIA:
KA-+
标本采取:
第1-2W,血、骨髓;
第2-3W,粪便、尿;
全程取骨髓
肥达反应:
用已知伤寒沙门菌O、H和甲型副伤寒沙门菌和乙型副伤寒沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验,用以辅助诊断肠热症。
TO≥1:
80,TH≥1:
160;
PA、PB均≥1:
80才有意义。
动态观察:
双份血清抗体四倍升高有诊断意义
四、志贺菌属
符合肠杆菌特征,有菌毛,无鞭毛,无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别点
培养特性:
肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落
抗原分类:
根据O抗原分4群,40余型,我国常见B群
A群——痢疾志贺菌B群——福氏志贺菌
C群——鲍氏志贺菌D群——宋氏志贺菌
不分解乳糖分解葡萄糖
菌落特征(EMB、MAC):
KIA:
KA--
MIU:
---
外毒素:
A群(Ⅰ、Ⅱ型)产生志贺毒素(ST)有3种生物活性
1.肠毒素:
类似ETEC毒素、霍乱肠毒素作用——水样泻
2.细胞毒性:
对人肝细胞、肠黏膜细胞有毒性,引起变性坏死
3.神经毒性:
损伤动物神经系统(麻痹、死亡)
快速诊断:
荧光菌球试验;
协同凝集试验
六、变形杆菌属
有周鞭毛
扩散生长,有迁徙生长现象。
在培养基中(含
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