国家或地方技术规范:小黄鱼种质要求.pdf
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ICS07.080CCSB6133浙江省地方标准DB33/T24332022小黄鱼种质要求Requirementsforgermplasmoflittleyellowcroaker2022-01-29发布2022-03-01实施浙江省市场监督管理局发布DB33/T24332022I前言本标准按照GB/T1.12020标准化工作导则第1部分:
标准化文件的结构和起草规则的规定起草。
请注意本标准的某些内容可能涉及专利。
本标准的发布机构不承担识别专利的责任。
本标准由浙江省农业农村厅提出并组织实施。
本标准由浙江省水产标准化技术委员归口。
本标准起草单位:
浙江省海洋水产研究所、浙江省农业科学院。
本标准主要起草人:
楼宝、谢庆平、刘峰、詹炜、徐冬冬、陈睿毅、王立改、柴学军。
DB33/T243320221小黄鱼种质要求1范围本标准规定了小黄鱼(Littleyellowcroaker)的学名与分类、主要形态构造特征、生长与繁殖、细胞遗传学特性、分子遗传学特性、检测方法和判定规则。
本标准主要适用于小黄鱼的种质检测与鉴定。
2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分:
检验规则GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分:
抽样方法GB/T18654.3养殖鱼类种质检验第3部分:
性状测定GB/T18654.4养殖鱼类种质检验第4部分:
年龄与生长测定GB/T18654.6养殖鱼类种质检验第6部分:
繁殖性能测定GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分:
染色体组型分析GB/T22213水产养殖术语3术语和定义GB/T22213界定的术语和定义适用于本标准。
4学名与分类地位学名4.1小黄鱼(LarimichthyspolyactisBleeker,1877),俗名小鲜、厚鳞仔、黄花鱼、小黄花、仔梅鱼。
分类地位4.2属硬骨鱼纲(Osteichthyes),鲈形目(Perciformes),石首鱼科(Sciaenidae),黄鱼属(Larimichthys)。
5形态特征外部形态5.1DB33/T243320222小黄鱼体背灰褐色,腹部银白色或金黄色,各鳍灰黄色。
体延长,侧扁,背腹缘均广弧形,体形似大黄鱼。
头大,吻短而尖钝,具发达黏液腔,吻上孔3个4个,不显著,吻缘孔5个,中吻缘孔圆形,位于吻缘上方,侧吻缘孔裂缝状。
眼中大,上侧位,位于头的前半部;眼间隔宽而圆凸,大于眼径。
口前位,口裂大而斜,上下颌约等长,颌骨向后伸达眼之后缘下方。
头部、胸鳍下部及腹鳍前部被圆鳞,躯干其余部分至尾柄被栉鳞,尾鳍基部也被小圆鳞。
侧线发达,前部稍弯曲,后部平直,伸达尾鳍后端。
侧线上鳞5行7行。
尾柄短而宽。
小黄鱼的外形见图1。
图1小黄鱼外形图可数性状5.2小黄鱼可数形状如下:
背鳍:
D.,-2936;臀鳍:
A.II-910;胸鳍:
P.1117;腹鳍:
I-5;侧线鳞数:
56枚70枚,侧线上鳞数5枚7枚;侧线下鳞数(5-A)枚(7-A)枚。
鳃耙数:
左侧第一鳃弓外侧鳃耙数7枚11枚+16枚20枚。
可量性状5.3可量性状的比例值见表1。
表1小黄鱼可量性状比例值体长/体高体长/头长头长/吻长头长/眼径尾柄长/尾柄高头长/眼间距体长/尾柄长体长/尾柄高3.54.13.04.23.65.33.76.32.52.92.63.04.45.011.813.4内部构造5.4鳔大,1室,几乎与体腔等长,前端长圆形,后端尖细,银白色,鳔侧具26对34对缨须状侧支。
鳔支管腹分支下小支的前小支和后小支两分支不等长(见图2)。
耳石近椭圆形,前端宽圆,后端狭尖,DB33/T243320223里缘及外缘弧形;背面隆起,有横行嵴棱;腹面有一蝌蚪形印记。
腹膜,灰黑色。
脊椎骨数27枚30枚。
图2小黄鱼鳔支管特征6生长与繁殖生长6.1养殖小黄鱼初次性成熟1年龄和2年龄性成熟期平均全长,体长和体重指标见表2。
表2养殖小黄鱼生长指标年龄全长(cm)体长(cm)体重(g)120.53.317.63.173.5927.02224.53.821.63.7120.5957.02小黄鱼体重与体长关系式分别见式
(1)和式
(2):
养殖小黄鱼:
W=0.025L2.809,R2=0.908,样本量(123)
(1)野生小黄鱼:
W=0.019L2.967,R2=0.962,样本量(89)
(2)式中:
W体重,单位为克(g);L体长,单位为厘米(cm);R相关系数。
繁殖6.26.2.1性成熟年龄一般雌雄同步,1年龄性成熟。
6.2.2产卵类型小黄鱼鳔支管分2支2分支不等长DB33/T243320224每年性成熟产卵一次,在繁殖期可分批产卵。
6.2.3怀卵量1龄性成熟雌鱼绝对怀卵量(4010012400)粒,2龄性成熟雌鱼绝对怀卵量为(9900021800)粒。
6.2.4受精卵受精卵呈圆球状,无色透明,卵浮性,单油球,卵径(141373)m,油球径(46523)m。
7细胞遗传学特征小黄鱼染色体共48条,核型为2n=6sm+42t,NF=54。
小黄鱼染色体核型见图3。
图3小黄鱼染色体核型图8分子遗传学特征小黄鱼线粒体COI片段的碱基序列如下:
CATAAAGATATTGGCACCCTCTATCTAATTTTTGGTGCATGAGCCGGAATAGTGGGCACC50GGCCTAAGTCTCATTATTCGAGCAGAGCTAAGCCAGCCCGGCTCGCTTCTCGGAGACGAC100CAGATTTTTAACGTAGTTGTTACGGCACATGCCTTCGTTATAATCTTCTTTATAGTAATA150CCCGTAATAATCGGAGGGTTCGGAAACTGACTCGTGCCTTTAATAATTGGCGCCCCCGAC200ATAGCATTTCCCCGAATAAATAACATAAGCTTCTGACTTATCCCCCCTGCTTTCATTATG250CTCGCAGCCTCATCAGCGGTTGAAGCAGGGGCCGGAACAGGGTGAACAGTCTACCCCCCA300CTTGCTGGAAATCTCGCACACGCAGGAGCTTCAGTCGACTTAGCCATTTTCGCTCTGCAC350CTTGCGGGTGTCTCTTCAATCCTGGGGGCCATCAACTTCATCACAACAATTCTTAACATA400AAACCCCCTGGCATAACCCAATACCAAACACCCCTGTTTGTGTGATCCGTTCTGATTACA450GCAGTCCTCCTCCTACTATCACTGCCCGTCCTAGCTGCCGGCATCACAATGCTTTTAACA500GACCGCAACCTCAACACAACCTTTTTTGACCCCTCAGGTGGAGGCGATCCCATCCTTTAT550CAACACCTATTCTGATTTTTTGGTCACC688线粒体COI序列分析方法见附录A。
DB33/T2433202259检测方法检验规则9.1按GB/T18654.1的规定执行。
抽样方法9.2按GB/T18654.2的规定执行。
性状测定9.3按GB/T18654.3的规定执行。
年龄鉴定9.4按GB/T18654.4的规定执行。
年龄鉴定材料为耳石。
怀卵量的测定9.5按GB/T18654.6的规定执行。
染色体和核型检测9.6按GB/T18654.12的规定执行。
分子遗传学检测9.7按第8章执行。
10判定规则检测结果不符合第5章和第6章,则判定为不合格项,有不合格项的样品为不合格样品。
DB33/T243320226附录A(资料性)线粒体COI序列分析方法取小黄鱼肌肉组织剪碎并用10%蛋白酶K消化后,按照标准的酚氯仿抽提法或者使用试剂盒进行总DNA的提取。
扩增引物序列为COI-F(5-CATAAAGATATTGGCACC-3)和COI-R(5-GGTGACCAAAAAATCAGAA-3)。
反应体系为50L,每个反应体系包括1.25U的TaqDNA聚合酶;各种反应组份的终浓度为200nmol/L的正反向引物;200mol/L的每种dNTP,10PCR缓冲液200mmol/LTris-HCl,pH8.4;200mmol/LKCl;100mmol/L(NH4)2SO4;15mmol/LMgCl25L,加Milli-QH2O至50L。
基因组DNA约为20ng。
每组PCR均设阴性对照用来检测是否存在污染。
PCR参数包括94预变性4分钟,94变性40秒,58退火30秒,72延伸1分钟,循环35次,然后72后延伸10分钟。
所有PCR均在PCR仪上完成。
扩增产物经纯化后经测序仪直接测序,为了保证序列的准确性,对所有样品均进行双向测序。
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- 国家 地方 技术规范 小黄鱼 种质 要求
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