血清钙测定——EDTA 滴定法.docx
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血清钙测定——EDTA 滴定法.docx
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授课对象:
11级检验1.5班
课时:
2学时
血清钙测定
EDTA滴定法
【实验目的】
1. 掌握甲基麝香草酚蓝比色法测血清钙的原理。
2. 熟练地进行血清钙的测定。
3. 了解血钙测定的临床意义和注意事项。
【实验用品】
722型分光光度计,刻度吸管,比色杯(均需用去离子蒸馏水处理),一次性试管等,血清,钙标准液(2.5mmol∕L),KOH(0.25mmol∕L),钙指示剂。
【实验原理】
血清中的钙离子在碱性溶液中与钙梭指示剂结合成可溶性复合物,使溶液变成红色。
EDTA—Na2对钙离子的亲合力很大,能与该复合物中的钙离子络合,使钙斐指示剂重新游离,溶液变成蓝色。
以EDTA-Na2的滴定用量计算血清钙的含量。
【操作步骤】
EDTA滴定法测定血清总钙操作表
加入物(ml)
标准管
测定管
血清
——
0.2
钙标准液(2.5mmol∕L)
0.2
——
0.25moVLKOH溶液
2.0
2.0
钙红指示剂(滴)
2
2
【计算】:
血清钙mmol/L=
×2.5
测定管EDTA■Na?
消耗体积(ml)
标准管EDTA-Na?
消耗体积(ml)
【参考范围】
成人:
2.25~2.75mmol/L
婴儿:
2.50~3.0mmol/L
【临床意义】
1.血钙增高常见于:
继发性甲状旁腺功能亢进;维生素D过多症;多发性骨髓瘤;肿瘤广泛骨转移等。
2.血钙降低常见于:
甲状旁腺功能减退;吸收不良性低血钙症;慢性肾炎尿毒症;大量输入柠檬酸盐抗凝血;佝偻病等。
【注意事项】
1.标本加碱后应及时滴定,时间过长会推迟终点的出现,特别是室温高于30°C时,影响更严重。
2.钙梭指示剂终点明显,不受血清中镁离子的干扰,因血清中的镁离子在强碱溶液中(pH12~13)以Mg(OH)2形式沉淀.
3.采血后应尽快分离血清并立即滴定,久置使滴定终点的灵敏度大为降低。
4.指示剂在碱性溶液中不稳定,故在加指示剂后应立即滴定。
5.血清中脂类增多而呈现混浊时,或严重溶血的血清都影响滴定结果。
6.EDTA-Na2快速简便,用血量少,最大的缺点是终点不易掌握。
课后小结:
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