推荐下载高效液相色谱法测定安眠补脑口服液.docx
- 文档编号:27353459
- 上传时间:2023-06-29
- 格式:DOCX
- 页数:27
- 大小:23.91KB
推荐下载高效液相色谱法测定安眠补脑口服液.docx
《推荐下载高效液相色谱法测定安眠补脑口服液.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《推荐下载高效液相色谱法测定安眠补脑口服液.docx(27页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
推荐下载高效液相色谱法测定安眠补脑口服液
[键入文字]
高效液相色谱法测定安眠补脑口服液
【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的
论说性文章。
论文网为您提供医药论文范文参考,以及论文写作指导和格式排版要
求,解决您在论文写作中的难题。
高效液相色谱法测定安眠补脑口服液
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定安眠补脑口服液中2,3,5,4,-四羟基二
苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷的含量。
方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈-水(15∶
85)作为流动相,检测波长为320nm,外标法定量。
结果2,3,5,4,-四羟基二苯乙
烯-2-О--D葡萄糖苷线性范围0.2484~4.968g(r=0.9999),平均回收率为98.73%。
结
论方法简便、快速、准确,适合于该产品质量检验分析。
【关键词】安眠补脑口服液;高效液相色谱法;2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О-
-D葡萄糖苷
1
[键入文字]
安眠补脑口服液原标准中测定制何首乌中水解产物大黄素的含量,由于大黄素的含
量因水解条件的不同而造成波动,影响测定结果的稳定性和规律性。
本文采用高效液
相色谱法,测定处方中主药制何首乌所含有效成分2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-
О--D葡萄糖苷的含量,参照《中国药典》2000年版一部制何首乌中2,3,5,4,-四
羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷的含量测定方法,建立了一种灵敏度高,专属性强的高
效液相色谱法测定制剂中2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷的含量方
法。
1仪器与试药
高效液相色谱仪:
Agilent1100SeriesVWD紫外检测器、依利特HyperisilC18色谱
柱(4.6mm250mm,10m,大连依利特),LC-350A型超声波中药处理机(济宁市中区鲁
超仪器厂);2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷对照品(含量测定用,批号
购自中国药品生物制品检定所),试剂均为分析纯和色谱纯,水为重蒸馏水。
2方法与结果
2.1耐用性实验
2
[键入文字]
2.1.1色谱条件影响因素的确定
检测波长的确定:
测定波长对测定方法的检测影响较大,故方法经实验进行确定。
参考文献[1]2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷检测波长为320nm,取
2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷适量,加稀乙醇溶解,以稀乙醇作空
白,在波长200~400nm之间扫描,结果2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄
糖苷在320nm处有最大吸收峰,与文献报道一致,从而确定本法采用320nm为检测
波长。
色谱条件确定:
色谱柱为大连依利特HyperisilC18(4.6mm250mm,10m),柱温30
℃,流速1.0ml/min,以上均采用常规条件。
流动相的确定:
参照《中国药典》2000年Ⅰ部和2005年版Ⅰ部制何首乌的含量测定
方法,选择乙腈-水(15∶85)作为流动相,对2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡
萄糖苷对照品分离较好,此条件下2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷与
其它组分均能达到基线分离。
不同品牌色谱柱测定结果:
分别选用HypersilC18(4.6mm250mm,10m,大连依利
特制造)和AzchRoMC18(4.6mm250mm,5m)配制一定量2,3,5,4,-四羟基二苯
乙烯-2-О--D葡萄糖苷对照品溶液,分别进样10l,色谱峰对称性较好,测定理论塔板
数,根据测定结果,理论板数按2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷峰计
3
[键入文字]
算,应不低于4000。
见表1。
表1理论塔板数测定结果
2.1.2供试品溶液的制备因该药味在处方中为水提物,成分在成型的液体制剂中应属
溶解状态,故制备时将溶液制成含醇量为50%,适合2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-
2-О--D葡萄糖苷溶解的溶液中即可。
取本品5ml置10ml量瓶中,加乙醇至刻度,摇
匀,静置,即得。
2.1.3稳定性和重复性实验为对供试液稳定性和方法系统适用性实验中重复性进行考
察,取供试品溶液10l注入液相色谱仪中,重复进样5次,结果峰面积积分值的相对
标准偏差RSD2.0%,表明本方法稳定性和重复性良好。
结果见下表2。
表2精密度实
验结果
2.2线性关系考察精密称取干燥至恒重的2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡
萄糖苷6.21mg,置25ml量瓶中,加稀乙醇适量溶解,并稀释至刻度,摇匀(0.2484
mg/ml)。
分别精密吸取1.0,3.0,5.0,12.0,20.0l,注入液相色谱仪中测定,得线性
方程为Y=911.69X-78.88(其中Y为积分值,X为进样量),相关系数r为0.9999,表明
2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷进样量在0.2484~4.968g之间范围内
与峰面积呈良好的线性关系。
结果见表3。
表3线性关系考察结果
2.3精密度实验按照分析方法验证指导原则,对方法的精密度按重复性内容进行考
察。
取本品(批号20050306)6份,按标准草案正文所述方法,制成供试液,依法测定含
4
[键入文字]
量,结果相对标准偏差2.0%,表明本方法重复性良好。
结果见表4。
表4重复性实
验结果
2.4专属性实验按一个处方量配制缺制何首乌药材的阴性样品,吸取上述溶液5l,
注入高效液相色谱仪中测定,可得缺制何首乌阴性样品色谱图,与供试品及对照品溶
液同法制成的供试品色谱图和对照品色谱图中相比较,供试品及对照品溶液中对照品
峰保留时间相同,阴性样品无干扰。
2.5最小检出限测定按正文所述色谱条件,将2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--
D葡萄糖苷对照品溶液稀释配制至浓度为2.020g/ml,分别进样2,5,10l,结果当进
样量为2l时,2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷对照品的色谱峰面积约
为基线噪音的3倍,故最小检出量为2.024g/ml210-3ml=4.04810-3g,表明高效液相
色谱仪测定2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷灵敏度较高。
2.6准确度采用加样回收法,取已知含量样品(20050306,含量平均值为0.2971
mg/ml)共6份,每份3ml,分别置10ml量瓶中,各加入2,3,5,4,-四羟基二苯乙
烯-2-О--D葡萄糖苷对照品溶液(0.2484mg/ml)5ml,按正文所述方法测定,以下式计
算回收率,结果表明本方法具有良好的回收率。
结果见表5。
计算公式:
5
[键入文字]
回收率(%)=测出对照品量-制剂中原有对照品量添加对照品量表5回收率测定结果
2.7样品含量测定及限度确定取样品10批,按草案正文含量测定方法,测定,计算
含量。
结果见表6。
表610批样品含量测定结
根据上述实验结果,考虑到生产实际以及制何首乌药材质量差异,本标准暂定本品
每支含制何首乌以2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷(C9H8O4)计不得少
于0.12mg。
2.8范围的确定为了确定方法能达到的准确测定的区间,实验考察了拟定范围的极端
的准确度和精密度。
实验根椐测定样品结果和由此拟定的限度。
tips:
感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。
仅供参阅!
【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的
论说性文章。
论文网为您提供医药论文范文参考,以及论文写作指导和格式排版要
6
[键入文字]
求,解决您在论文写作中的难题。
关于败毒生肌油治疗烧伤的药效学研究
【摘要】目的观察败毒生肌油对动物烧伤、抗炎及镇痛作用。
方法制作实验鼠深Ⅱ
度蒸气烧伤模型,创面上涂败毒生肌油(0.02ml/cm2),连续26d,计算创面愈合百分
率;涂以二甲苯造成小鼠耳肿胀,败毒生肌油(15l)处理后检测小鼠耳肿胀率及其肿胀抑
制率。
小鼠两只后足浸入受试药液中,给药后30,60,120,240min分别测小鼠热板
痛阈值。
结果败毒生肌油能提高创面愈合百分率,有明显的抗炎作用,且有明显的镇
痛作用。
结论败毒生肌油是一种治疗烧伤有效的制剂。
【关键词】败毒生肌油;烧伤;抗炎;镇痛
Abstract:
ObjectiveToobservethetherapeuticeffectBai-Du-Sheng-Jioilonempyrosisin
ratsanditsanti-inflammatoryandanalgesicactions.MethodsEmpyrosisofratswas
establishedwithhotvaporof98℃for9s,sodiumhydroxide,skincuttingrespectively.Bai-
Du-Sheng-Jioilwasadministeredatadoseof0.02ml/cm2for26d.Therawsurfacerecovery
ratewascounted.Swellingofmouseearwascausedbydimethylbenzene,Bai-Du-Sheng-Ji
oilwasadministeredatadoseof15l/ear,andswellingrateofearandinhibitionratewere
counted.Thehot-platepainthresholdwasmeasuredin30,60,120,240minafterthetwo
postpedesdippedintoBai-Du-Sheng-Jioil.ResultsBai-Du-Sheng-Jioilhadevidenteffectson
7
[键入文字]
empyrosis.Itcouldraiserawsurfacerecoveryrate,inhibitinflammationandproduce
analgesiceffecteffectively.ConclusionBai-Du-Sheng-Jioilisaneffectivepreparationon
empyrosis.
Keywords:
Bai-Du-Sheng-Jioil;Empyrosis;Anti-inflammatoryaction;Analgesia
败毒生肌油是南昌公安消防医院研制的现代中药复方制剂,由大黄、黄连、旱莲
草、红花、薄荷、蝉蜕、冰片等多味中药组成,功能消炎止痛,活血去淤,清热败
毒,去腐生肌,燥湿收敛;临床用于治疗烧伤、烫伤、挫伤、褥疮、疖痈、湿疹等。
本
课题通过抗炎、镇痛、抗菌和大鼠深Ⅱ度烧伤实验,对败毒生肌油进行药效学研究,
旨在对败毒生肌油抗炎抗感染、镇痛、促进烧伤创面愈合的功效作出客观评价。
1材料
1.1受试药物败毒生肌油,250ml/瓶,南昌市公安消防医院制剂室提供,批号:
060324。
1.2动物Wistar大鼠,雌雄各半,体重210~250g,江西中医学院实验动物中心提
供,许可证号:
SCXK(赣)2006-0001;昆明种小鼠,体重18~22g,均由江西中医学院
动物中心提供,合格证号:
SCXK-2005-0001。
8
[键入文字]
1.3试剂戊巴比妥钠,中国医药集团上海试剂公司产品,25g,批号:
F20030816。
二甲苯,CA,湖北大学化工厂产品,批号:
060818;基质:
菜籽油,市售。
京万红,天
津达仁堂达二药业有限公司产品,批号:
050821。
2方法
2.1药物制备取上述药物(冰片除外),经挑选加工,除去杂质,分别用粉碎机打碎
过40目筛,药粉充分混匀后用菜籽油浸泡1d后,用文火(110~130℃)加热煎煮4
h,稍冷,用4层无菌纱布过滤,滤液沉淀后,滤去药沫,将油用沙布滤过至带盖的盛冰
片的容器中,搅匀,密封,冷却后分装成250ml/瓶,湿热灭菌法灭菌,即得败毒生肌
油。
2.2败毒生肌油对大鼠深Ⅱ度蒸气烧伤创面的影响[1]大鼠实验前24h用8%Na2S脱
去大鼠后背臀部毛,约4cm4cm,禁食1d,自由饮水。
用1%戊巴比妥钠(30mg/kg)
麻醉,取仰卧位将大鼠脱毛区置于带侧枝的圆底烧瓶口上(内径25mm,瓶口温度98
℃),蒸气熏蒸9s,造成深Ⅱ度蒸气烧伤模型。
造模24h后活检取材,鉴定为深Ⅱ度
烧伤。
在每只大鼠背部中线两侧各制作一个直径25mm的深Ⅱ度烧伤创面。
大鼠烧伤
后注意保持室温在23~25℃,直至大鼠苏醒。
造模后,大鼠随机分成3组,每组10个
创面。
造模后当天涂药,每鼠以药液不流失为宜(约0.02ml/cm2),涂药前如有必要用
0.1%新洁尔灭溶液清创。
用每种药前3d,3次/d,3d后,2次/d,连续26d。
分别于
9
[键入文字]
造模后24h及6,11,16,21,26d用游标卡尺测量创面纵长与横长直径,按AB/4
公式换算面积,并按下式计算创面愈合百分率。
创面愈合百分率(%)=给药前创面面积-给药后创面面积给药前创面面积100%
2.3败毒生肌油对二甲苯所致小鼠炎性耳肿的影响[2]每组小鼠右耳前后两面各涂受
试药物15l,共4次,间隔为1h。
末次给药1h后用温水擦净药物,对照组涂以相同量
菜籽油,给小鼠右耳涂以二甲苯0.05ml/只,左耳作对照,15min后处死动物,用直径
6mm的打孔器将双耳同部位切下,用天平分别称重,以左右耳片重量差值表示炎性肿
胀程度,计算肿胀率及肿胀抑制率。
肿胀抑制率(%)=
生理盐水对照组平均肿胀率-用药组平均肿胀率用药组平均肿胀率100%
2.4败毒生肌油对小鼠热板所致痛阈的影响[3]雌性小鼠50只,将恒温水浴调节至
(550.5)℃,金属盘底接触水面,加热后作为热刺激,用秒表记录小鼠自投入热板至出
现舔后足的时间作为该鼠的痛阈值,以痛阈值在5~30s内为合格,筛得小鼠共30
只,按其痛阈值进行随机分组,分组同上,将小鼠两只后足浸入受试药液中2min,给
药4次,每次间隔30min。
于末次给药后30,60,120,240min分别测小鼠痛阈值,
10
[键入文字]
计算其痛阈提高百分率,痛阈提高率用下公式计算。
痛阈提高率(%)=给药后平均痛阈值-给药前平均痛阈值给药前平均痛阈值100%
tips:
感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。
仅供参阅!
2.8.1将范围下限设在限度
约-50%左右处即取样为0.12mg/ml5ml50%=0.3mg的相当量,在此量处进行准确度的
考察。
方法是取已知含量样品(20050306,含量平均值为0.2971mg/ml)共6份,每份1
ml,分别置10ml量瓶中,各加入2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷对
照品溶液(0.248g/ml)1ml,按正文所述方法测定,以下式计算回收率,结果表明本方
法具有良好的回收率。
结果见表7。
计算公式:
回收率(%)=测出对照品量-制剂中原有对照品量添加对照品量
表7范围测定回收率结果
11
[键入文字]
样品
号取样量
m/g制剂中原有
对照品量m/mg加入对照
品量m/mg测出对照
品量m/mg回收率
(%)平均回收
率(%)RSD
(%)110.290.24840.537799.72210.290.24840.536999.40310.290.24840.537
12
[键入文字]
799.7299.370.4410.290.24840.536699.28510.290.24840.535398.75
n=5
2.8.2将范围上限设在限度约200%左右处即取样为0.12mg/ml5ml200%=1.2mg的相
当量,在此量处进行准确度的考察。
方法是取已知含量样品(20050306,含量平均值为
0.2971mg/ml)共6份,每份5ml,分别置具塞量瓶中,各加入2,3,5,4,-四羟基二
苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷对照品溶液(0.2484mg/ml)5ml,按正文所述方法测定,以下式
计算回收率,结果表明本方法具有良好的回收率。
结果见表8。
计算公式:
回收率(%)=测出对照品量-制剂中原有对照品量添加对照品量表8回收率测定结果
3讨论
2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-О--D葡萄糖苷易溶解于稀乙醇溶液中,且诸药味
在处方中为水提物,在本制剂中溶解状态,因此制备时将溶液制成含醇量为50%的溶
液即可提取完全。
根据文中的色谱条件实验表明该方法专属性及重复性良好,可以较
13
[键入文字]
好地控制安眠补脑口服液中何首乌的含量。
【参考文献】
[1]国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:
化学工业出版社,2005:
122.
医药卫生栏目
tips:
感谢大家的阅读,本文由我司收集整编。
仅供参阅!
14
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 推荐 下载 高效 色谱 测定 安眠 口服液