小麦白粉病潜在生防菌的筛选与控病特性研究.docx
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小麦白粉病潜在生防菌的筛选与控病特性研究
小麦白粉病潜在生防菌的筛选与控病特性研究
沈阳农业大学,2005—10,36(5):
541—545
JournalofShenyangAgriculturalUniversity,2005-10,36(5):
541—545
小麦白粉病潜在生防菌的筛选与控病特性研究
范瑛阁,曹远银术,魏松红,王美玲
(沈阳农业大学植物免疫研究所,沈阳110161)
摘要:
2001—2004年从山东,河南等ll省采集土样78份,通过稀释平板法共分离菌株282株.其中真菌138株.细菌72株,放线
菌6l株.通过小麦白粉菌的孢子萌发抑制试验和小麦离体叶病害抑制试验的初步筛选.共得到l2株防效较好的菌种.将所筛选
的l2个菌株进行温室盆栽苗病害控制试验.结果表明:
细菌菌种PE4,C26,C27与真菌菌种P17—1对小麦白粉病抑制能力较强.
防治效果分别达74.96%,70.1%,67.33%和64.71%.并对不同处理的小麦株高和千粒重进行方差分析.其中菌株PE4,C26,GEl1
处理的小麦千粒重分别为43.57,42.21,41.57g,与对照千粒重(29.22差异极显着.
关键词:
小麦白粉病;生物防治;细菌;真菌;放线菌;株高;千粒重
中图分类号:
$435.121.4.6;s482.2.92文献标识码:
A文章编号:
1000—1700(2005)05—0541—05
ScreeningandCurbingEfficacyofPotentialBiocontrolAgents
forPowderyMildewofWheat
FANYing-ge,CAOYuan-yin,WEISong-hong,WANGMei—ling
(InstituteofPlantImmunology,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110161,China)
Abstract:
78soilsampleswerecollectedfrom11provincesinChinabetween2001and2004.Withthesesamples.atotalof
282isolateswereisolatedbydilution—platemethod.Amongthem.therewere138fungalisolates.72bacterialisolatesand61
actinomycialisolates.Accordingtotheabilitytoinhibitasexualsporegerminationonbearingglassandtocurbthediseasede—
velopmentondetachedwbeatleaves,12promisingisolatesweresingledout.These12isolateswereusedinadultwheatplant
stageforfurtherdiseasecontrolexperimentingreenhouse.Theresultsindicatedthat3bacterialisolatesfPE4,C26,C27)and1fu—
galisolatesfP17—1)hadconsiderablycurbedthedevelopmentofBumeriagraminisf.sp.tritici.Theircontrolemcacyreached
70.1%,67.33%,74.96%and64.71%,respectively.Theexperimentalsoindicatedthatwheatplantheightand1000一kernalweight
weresignificantlyaffected.The1000-kernalweightofwheattreatedwithisolatesofPE4,C26,GEl1were43.57g,42.21gand
41.57g,respectively(29.22gforCK).
Keywords:
wheatpowde~mildew;bio-control;fungi;bacteria;actinomyces;plantheight;lO00一kemalweight
小麦白粉病是由BlumeriagraminisDc.speer.tritici引起,是小麦的主要病害之一.小麦白粉病分布广泛,除
某些热带地区外,在世界各地都有分布.对白粉病的防治长期依赖化学药剂,如天然无机药剂硫磺粉,人工化
学合成药剂如三唑酮,三唑醇等.这些药剂防治容易造成环境和农产品的污染.并且容易使病菌产生抗药性.
如1991年山东报道防治小麦白粉病使用这些化学农药还带来了一定的环境残留污染.因此.这种现状亟待改
变.于基成(2002)通过实验比较了几种具有潜在控病作用的植物源杀菌剂1号和凯地菌素的效果,结果发现
在小麦白粉菌出现初始粉孢子时进行控制,其防治效果分别达到73.33%和66.19%f.HajlaouiM报道
flocculosa可以防治小麦白粉病l4l.Serenade是美国Agraquest公司利用菌株BacillussubtilisstrainQST713的
最新生物农药产品,目前以可湿性粉剂广泛应用,是一种广谱性生物杀菌剂,可以防治40多种植物疾病,其中
包括小麦白粉病[51.由此看出,尽管小麦白粉病是专性寄生菌.但是研制出控制小麦白粉病的生防药(菌)剂是
收稿日期:
2005—03—11
基金项目:
"十五"国家科技攻关项目(2001BA509B03/2004BA5O9B03)
作者简介:
范瑛阁(1978),士,沈阳农业大学硕士研究生,从事生物防治方面的研究.通讯作者Correspondingauthor:
曹~$(1955一),男,沈阳
农业大学研究员,博士,从事植物免疫学与分子植物病理学研究.
?
542?
沈阳农业大学第36卷
完全可能的,所以,本研究在开展具有潜在控病作用的植物源杀菌剂1号和凯地菌素效果比较实验的同时,开
展了具有控病作用的生防菌剂筛选与研制,取得了较好效果,现报道如下.
1材料与方法
1.1材料
1.1.1茵种来源2001~2004年从山东,河南,黑龙江,辽宁,河北,北京,山西,内蒙,宁夏,广东,广西等省的不
同环境里采集土样78份,采用稀释分离法共分离菌株282株,其中真菌138株,细菌72株,放线菌61株,用
于小麦白粉菌潜在生防菌筛选.
1.1.2供试小麦品种辽宁麦区及内蒙部分麦区的生产主栽品种辽春lO号,该品种严重感染白粉病,适宜流
行条件下,病害的侵染型,严重度和病指均达最高级.
1.2试验方法
1.2.1液体培养基真菌采用PDA不加琼脂培养液;细菌为牛肉津液培养基不加琼脂[q;放线菌为高氏一号培
养基不加琼脂.
1.2.2发酵方法将生防菌株在无菌条件下接于液体培养基中震荡培养,摇床转速为180r?
min~,于26~28℃下
36h后,取5mL加入对应的培养液中继续震荡培养3~4d后备用.
1.2.3孢子萌发抑制试验将分离的282,株菌株培养液与3%的融化状态的琼脂,分别以l:
1的比例相混合,滴
加到载玻片上,形成一薄层含药琼脂培养基,然后将待测定的小麦白粉菌粉孢子抖落到培养基上,于l8℃无光
条件下培养48h每菌株重复处理3次.镜检计算孢子萌发率,以含3%葡萄糖培养基上孢子萌发率作对照,计
算孢子萌发抑制率.?
1.2.4小麦离体叶白粉病痛害药效试验将孢子萌发试验中萌发抑制率较高的菌株进行离体叶试验.供试小
麦品种为小密穗,播种在花盆内,用长方形塑料罩严格隔离,避免外来菌污染,待叶片长N-叶一心时,将叶片
剪成3~4cm长的叶段,叶背朝上平放在培养皿内经40mg6-BA保鲜剂湿润的两层滤纸上,叶片放好后两端用
窄玻璃条压住,4次重复,同时每种药剂做两个处理.①治疗作用测定:
先接种白粉菌,24h后喷菌液;②保护作
用测定:
先喷菌液,24h后接白粉菌.接种白粉菌采用在每个叶片上等距离取3点,用牙签点取白粉菌点接,喷
药均以小麦叶片密布小雾滴为准,以喷清水作对照.待室内晾干后盖上培养皿.放在室温(18—20℃),光/暗时间
为12h/12h培养观察.约7d待清水对照充分发病时进行调查.
1.2.5温室盆栽苗病害控制试验将离体叶试验中防治效果较好的菌株,经液体发酵后,进行温室盆栽药效试
验.喷药时加O.2mL吐温(30001~g?
g).在144m温室用直径20cm花盆种植小麦784盆.每处理重复4次.每
重复l4盆小麦,每盆播种8粒,分蘖后每盆约为l2株小麦.在小麦生长拔节期接种小麦白粉菌.每隔6d喷药
1次,共喷药4次,根据喷药时间每隔3d调查病情指数.设l5%三唑酮可湿性粉剂1000倍液和清水作对照.计
算各处理防治效果,小麦成熟后测量株高和千粒重,采用DPS数据分析软件进行差异性分析.
2结果与分析
2.1不同菌株对孢子萌发的抑制效果
通过孢子萌发试验共得到24株菌株(真菌l6株,细菌3株,放线菌5株).其对小麦白粉菌孢子萌发抑制
率如表1.试验结果表明小麦白粉菌分生孢子在l8~2O℃下平均孢子萌发率为95%.从表1中数据可以看出生
防真菌对小麦白粉菌的孢子萌发抑制作用高于生防细菌和放线菌.真菌菌种P17—1,PS7,PM1,PS3,PM10都表
现出对小麦白粉菌分生孢子萌发有明显的抑制作用,孢子萌发抑制率高达72.1%,85.17%,83.9%,71.84%和
77.9%.
第5期范瑛阁等:
小麦白粉病潜在生防茵的筛选与控病特性研究?
543?
表124株菌株对小麦白粉菌的孢子萌发抑制率
Table1Effectofthe24isolatesonsporegerminationrateofwheatpowderymildew
菌株编号孢子萌发抑制率,%差异显着性菌株编号孢子萌发抑制率,%差异显着性
IsolatesSporegerminationSignificanceIsolatescodeSporegerminationSignificance
codeinhibitingrate5%1%inhibitingrate5%1%
C2689.00aAP2564.70lL
PS785.17bBP2l63.50mM
PM183.90CCP2160.9OnN
PM1ol77.90dDP1660.0000
PE477.83dDP154.58PP
P17—172.10eEGM654.20qQ
PS371.84fFP17—2f54.10qQ
P2370.10gGGEl7.53.20rR
C2769.90hHGE1150.33SS
P20I69-30iIPH3of46.20tT
PS2f67.80iJGB2.44.30uU
P7i65.86kKGB538.57vV
注:
1.菌株编号中第1个字母P代表菌株是由PDA培养基上筛选而来;C代表由牛肉膏蛋白胨培养基上筛选而来;G代表由高氏一
号培养基上筛选而来;2.第2个字母代表菌株采集地点的第1个拼音字母;3,a为放线菌,b为细菌,f为真菌.
Note:
1,TheinitialletterP.inisolatescodemeansthatitwasscreenedwithPDAmedium;C,withNAmedium,andG,with
mediumGause1:
2.Thesecondeletterofthecodeisthefirstletteroftheplacenamewheretheisolatewascollected;3.a=acti—
nomyces,b=bacteria,f--fungus.
CKPE4
图1对照小麦自粉菌孢子萌发与菌株PE4抑制小麦自粉菌孢
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