藿香正气滴丸对动物小肠运动的影响.docx
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藿香正气滴丸对动物小肠运动的影响
藿香正气滴丸对动物小肠运动的影响
1前言
藿香正气方剂由广霍香油、苍术、陈皮、厚朴、白芷、茯苓、大腹皮、半夏、甘草浸膏、紫苏叶油等成分组成,有解表化湿,理气和中之功效,中医用于治疗外感风寒,内伤湿滞,夏伤暑湿,头痛昏重,脘腹胀痛,呕吐泄泻等病症。
现有藿香正气丸、藿香正气片、藿香正气散、藿香正气胶囊、藿香正气滴丸、藿香正气水、藿香正气口服液等七种剂型。
藿香正气滴丸在中医传统理论的基础上,经过多年科学实验研制开发而成的新药剂型,克服了以往剂型内在质量不可控的缺陷,提高了疗效。
质量稳定,剂量准确,生物利用度高,起效快,口感舒适,对胃肠道无刺激,全面符合现代中药标准,确保产品之疗效。
藿香正气软胶囊对胃肠运动的双向调节作用已见报道,但藿香正气滴丸对胃肠运动的影响的研究尚未见报道。
一般认为二者药物作用和药理效应该相似,但具体文献尚未见报道,为证实藿香正气滴丸对动物胃肠运动的影响特提出该题目。
2在体实验
2.1实验材料:
2.1.1药品:
藿香正气滴丸,由天士力制药股份有限公司提供,2.6g*9袋/盒,国药准字Z20000048,产品批号100710,生产日期2011.07.13;
硫酸阿托品注射液,郑州羚锐制药股份有限公司,产品批号120102,生产日期2012.01.05,有效期2013.12;
甲硫酸新斯的明注射液,上海信谊金朱药品有限公司,产品批号110401,生产日期2011.04.16,有效期2014.04.15;
配药:
1、0.002%甲硫酸新斯的明:
取规格2mL:
1mg硫酸新斯的明(上海信谊金朱药业有限公司)1支,加生理盐水至50mL即得。
2、0.01%硫酸阿托品:
取规格1mL:
0.5mg硫酸阿托品(郑州羚锐制药股份有限公司)10支,加生理盐水至50mL即得。
3、藿香正气滴丸(天士力制药股份有限公司,产品批号100710)
①藿香正气滴丸原液(5.2%g/mL):
取藿香正气滴丸1袋,粉碎加水约50mL,煮沸,保温过夜,加水至50mL即得。
②20%藿香正气滴丸原液:
取藿香正气滴丸原液10mL加生理盐水至50mL即得。
③40%藿香正气滴丸原液:
取藿香正气滴丸原液20mL加生理盐水至50mL即得。
④80%藿香正气滴丸原液:
取藿香正气滴丸原液40mL加生理盐水至50mL即得。
4、10%亚甲蓝:
取亚甲蓝10g加生理盐水至100mL溶解即得。
2.1.2器械:
台秤一架、1mL注射器10支,4号针头10支、9号钝头灌胃针头3支、手术镊、手术剪、直尺等。
2.1.3动物:
昆明种小白鼠,18~22g,雌雄各半。
2.1.4统计方法:
实验数据以“x±S”表示,用Excel、SPSS对数据进行统计,采用t检验。
2.2在体实验
2.2.1在体实验方法:
取昆明种小白鼠60只,18-22g,雌雄各半随机分成六组每组10只,分别命名为:
空白组(生理盐水组)、阿托品组、新斯的明组、藿香正气滴丸原液组、阿托品藿香正气滴丸原液组、新斯的明藿香正气滴丸原液组。
各组处理如下:
1 空白组,以10mL/kg的量腹腔注射生理盐水,10分钟后,10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。
2 藿香正气滴丸原液组,藿香正气滴丸原液以10mL/kg的量,10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。
3 新斯的明组,0.002%甲硫酸新斯的明以10mL/kg的量腹腔注射,10分钟后,10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。
4 新斯的明藿香正气滴丸原液组,0.002%甲硫酸新斯的明以10mL/kg的量腹腔注射,10分钟后,藿香正气滴丸原液以10mL/kg的量,10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃[4,5]。
5 阿托品组,0.01%硫酸阿托品以10mL/kg的量腹腔注射,10分钟后,10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃。
6 阿托品藿香正气滴丸原液组,0.01%硫酸阿托品以10mL/kg的量腹腔注射,10分钟后,藿香正气滴丸原液以10mL/kg的量,10%亚甲蓝以20mL/kg(0.2mL/10g)的量灌胃[4,5]。
各组小鼠用亚甲蓝灌胃20分钟后,分别颈椎脱臼处死,立即打开腹腔,自幽门至回盲部摘出肠管,不加牵引平铺于玻璃板上,用直尺量取肠管总长度和亚甲蓝推进长度,并算出各组推进百分率。
2.2.2在体实验结果:
表2.1空白组
动物号
性别
体重(g)
肠管总长(cm)
推进长度(cm)
推进率(%)
1(头)
♂
18
56
35
62.50
2(背)
♂
18
42
20
47.62
3(尾)
♂
18
40
22
55.00
4(白)
♂
20
60
31
51.67
5(头背)
♂
20
47
32
68.09
6(头尾)
♀
21
45
20
44.44
7(左前)
♀
21
49
27
55.10
8(左后)
♀
22
48
24
50.00
9(右前)
♀
22
51
27
52.94
10(右后)
♀
22
49
28
57.14
总
—
—
487
266
54.62
表2.2藿香正气滴丸原液组
动物号
性别
体重(g)
肠管总长(cm)
推进长度(cm)
推进率(%)
1(头背)
♂
18
51
36
70.59
2(头尾)
♂
18
45
28
62.22
3(头)
♂
19
42
37
88.10
4(背)
♂
20
58
31
53.45
5(白)
♀
18
41
32
78.05
6(尾)
♀
22
51
38
74.51
7(左前)
♀
22
32
28
87.50
8(左后)
♀
19
48
32
66.67
9(右前)
♀
18
52
36
69.23
10(右后)
♀
19
48
36
75.00
总
—
—
468
334
71.37
表2.3甲硫酸新斯的明组
动物号
性别
体重(g)
肠管总长(cm)
推进长度(cm)
推进率(%)
1(头)
♂
18
54
44
81.48
2(背)
♂
18
49
47
95.92
3(白)
♂
19
51
45
88.24
4(尾)
♂
20
42
37
88.10
5(左前)
♂
19
45
40
88.89
6(左后)
♀
21
56
55
98.21
7(右前)
♀
21
52
49
94.23
8(右后)
♀
22
58
49
84.48
9(头背)
♀
22
49
48
97.96
10(头尾)
♀
22
56
51
91.07
总
—
—
512
465
90.82
表2.4甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组
动物号
性别
体重(g)
肠管总长(cm)
推进长度(cm)
推进率(%)
1(头)
♂
18
48
33
68.75
2(背)
♂
18
51
36
70.59
3(尾)
♂
18
57
40
70.18
4(白)
♂
20
46
32
69.57
5(头背)
♂
20
53
41
77.36
6(头尾)
♀
22
42
24
57.14
7(左前)
♀
22
55
39
70.91
8(左后)
♀
19
41
29
70.73
9(右前)
♀
19
52
37
71.15
10(右后)
♀
20
49
36
73.47
总
—
—
494
347
70.24
表2.5硫酸阿托品组
动物号
性别
体重(g)
肠管总长(cm)
推进长度(cm)
推进率(%)
1(头)
♂
18
56
29
51.79
2(背)
♂
19
51
11
21.57
3(尾)
♂
20
48
15
31.25
4(白)
♂
18
45
16
35.56
5(头背)
♂
18
53
18
33.96
6(头尾)
♂
22
41
13
31.71
7(背尾)
♀
22
49
16
32.65
8(左前)
♀
22
58
17
29.31
9(右后)
♀
21
42
19
45.24
10(右前)
♀
20
54
21
38.89
总
—
—
497
175
35.21
表2.6硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组
动物号
性别
体重(g)
肠管总长(cm)
推进长度(cm)
推进率(%)
1(头)
♂
18
48
29
60.42
2(背)
♂
18
46
36
78.26
3(尾)
♂
19
59
25
42.37
4(白)
♂
19
52
33
63.46
5(头背)
♀
20
46
30
65.22
6(头尾)
♀
22
51
34
66.67
7(左前)
♀
22
42
24
57.14
8(左后)
♀
20
57
36
63.16
9(右前)
♀
19
49
31
63.27
10(右后)
♀
21
53
35
66.04
总
—
—
503
313
62.23
表2.7在体实验结果汇总:
组别
剂量mL/kg
小肠全长/cm
推进距离/cm
推进率/%
空白组
—
48.70±6.00
26.60±5.13
54.45±6.95
HD组
10
46.80±7.22
33.4±3.69
72.53±10.68
XA组
10
51.20±5.09
46.50±5.25
90.86±5.66
XA.HD组
10,10
49.40±5.27
34.70±5.29
69.98±5.12
AT组
10
49.70±5.77
17.50±4.95
35.19±8.47
AT.HD组
10,10
50.30±5.21
31.30±4.32
62.60±8.98
注:
HD:
藿香正气滴丸,XA:
甲硫酸新斯的明,AT:
硫酸阿托品
对在体实验结果进行t检验,检验结果显示,藿香正气滴丸原液组与空白组比,推进率有显著性差别(P<0.001);硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组与空白组比,推进率有显著性差别(P<0.001);硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组与空白组比,推进率有显著性差别(P<0.001)。
3离体实验
3.1实验材料:
3.1.1药品:
藿香正气滴丸,由天士力制药股份有限公司提供,2.6g*9袋/盒,国药准字Z20000048,产品批号100710,生产日期2011.07.13;
硫酸阿托品注射液,郑州羚锐制药股份有限公司,产品批号120102,生产日期2012.01.05,有效期2015.12;
甲硫酸新斯的明注射液,上海信谊金朱药品有限公司,产品批号110401,生产日期2011.04.16有效期2014.04.15;
生理盐水、台式液(NaCl、KCl、MgSO4.7H2O、NaH2PO4.2H2O、NaHCO3、CaCl2、G.S)。
配药:
1、台氏液的配置:
称取NaCl8.0g,KCl0.28g,MgSO4.7H2O0.26g,NaH2PO4.2H2O,0.065g,NaHCO31.0g,CaCl20.2g,G.S1.0g。
边加蒸馏水边搅拌,待溶解后加入10%CaCl20.2mL,混匀,用时加入G.S1.0g,最后加水至1000mL。
2、0.01%硫酸阿托品:
取0.5mg/mL硫酸阿托品(郑州羚锐制药股份有限公司)10支(5mg)加生理盐水至50mL即得。
3、0.002%甲硫酸新斯的明:
取1mg/2mL甲硫酸新斯的明(上海信谊金朱药业有限公司)1支,加生理盐水至50mL即得。
3.1.2器械:
BL-420E+生物机能实验系统,CW-3G型恒温平滑肌槽(振华教学仪器厂),1mL注射器、4号针头、100mL烧杯。
3.1.3动物:
家兔(2-3kg)
3.1.4统计方法:
实验数据以“x±S”表示,用Excel、SPSS对数据进行统计,采用t检验。
3.2离体实验
3.2.1离体实验方法:
取家兔一只,用木槌猛击后脑处死,剖开腹腔取回肠约20cm左右,放入盛有台氏液的平皿中,用注射器冲洗肠内容物,干净后剪成1.5cm左右肠段,放台氏液中待用。
向麦氏槽中加入20mL台氏液,加热恒温37±0.5℃,调节通入麦氏槽中气泡的量,使每分钟通20个左右空气泡。
稳定后将肠管一端固定于麦氏槽底部,另一端固定于拉力换能器上,调整负荷1-2g,待蠕动稳定后分别加入藿香正气滴丸、硫酸阿托品、甲硫酸新斯的明等刺激肠管,观察现象进行记录。
3.2.2离体实验结果:
1、藿香正气滴丸原液组
待肠管收缩稳定后,向麦氏槽中加0.05mL藿香正气滴丸原液(2.5μl/mL),观察并记录曲线变化。
表3.1藿香正气滴丸原液组
序号
给药前曲线(g)
给药后曲线(g)
差值
最低
最高
最低
最高
(g)
1
1.1
2.3
3.4
4.9
2.45
2
0.8
1.9
2.7
3.9
1.95
3
1.0
2.1
2.9
4.1
1.95
4
0.6
2.3
2.8
5.2
2.55
5
1.3
2.2
3.2
4.6
2.15
2、甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组
待肠管收缩稳定后,先向麦氏槽中加0.002%甲硫酸新斯的明0.05mL即0.05mg/mL台氏液,肠管收缩达最高峰时加0.05mL藿香正气滴丸原液即2.5μl/mL台氏液,观察并记录曲线变化。
表3.2甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸组
序号
加XA前(g)
加XA后(g)
差值
加HD后
差值
最低
最高
最低
最高
(g)
最低
最高
(g)
1
0.9
2.3
8.1
8.9
6.90
3.5
6.1
-3.70
2
1.2
2.4
7.6
8.3
6.15
4.2
5.3
-3.20
3
1.0
2.3
7.4
8.5
6.30
4.3
6.3
-2.65
4
2.1
2.9
8.2
9.1
6.15
3.4
7.1
-3.40
5
1.3
2.6
7.4
8.7
6.10
3.1
4.2
-4.40
注:
XA:
甲硫酸新斯的明,HD藿香正气滴丸
3、硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组
待肠管收缩稳定后,先向麦氏槽中加0.01%硫酸阿托品0.05mL即0.05mg/mL台氏液。
肠管收缩达最高峰时,加0.05mL藿香正气滴丸原液即2.5μl/mL得台氏液,观察并记录曲线变化。
表3.3硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组
序号
加AT前(g)
加AT后(g)
差值
加HD后
差值
最低
最高
最低
最高
(g)
最低
最高
(g)
1
1.4
2.8
0.8
1.9
-0.75
1.4
2.1
0.40
2
0.9
2.4
0.6
1.3
-0.70
1.1
1.9
0.55
3
1.1
2.1
0.7
1.6
-0.50
1.5
2.3
0.75
4
0.8
3.1
0.7
1.5
-0.85
0.9
2.9
0.80
5
1.4
2.8
0.9
1.6
-0.85
1.2
3.1
0.90
注:
AT:
硫酸阿托品,HD:
藿香正气滴丸
表3.4离体实验结果汇总
组别
加药前
一次加药后
最高值差值
二次加药后
最高值差值
(g)
(g)
(g)
(g)
(g)
HD组
1.56±0.16
3.77±0.36
2.21±0.28
—
—
XA.HD组
1.90±0.36
8.22±0.33
6.32±0.33
4.75±0.66
﹣3.47±0.65
AT.HD组
1.89±0.22
1.16±0.15
﹣0.73±0.14
1.84±0.23
0.68±0.20
注:
HD:
藿香正气滴丸,XA:
甲硫酸新斯的明,AT:
硫酸阿托品
对离体实验结果进行t检验,检验结果显示,藿香正气滴丸原液组给药前后比较,其对肠管收缩力影响有显著性差异(P<0.001);甲硫酸新斯的明藿香正气滴丸原液组给药前后比较,其对肠管收缩力影响有显著性差别(P<0.001);硫酸阿托品藿香正气滴丸原液组给药前后比较,其对肠管收缩力影响有显著性差别(P=0.002<0.05)。
4结果
在体和离体实验结果表明,藿香正气滴丸能增加小鼠的小肠推进功能,都能使家兔肠管收缩力加强;阿托品可以阻断小肠上的M受体使肠运动功能抑制,新斯的明可以抑制胆碱酯酶使小肠运动加强。
藿香正气滴丸对新斯的明所致小鼠小肠运动兴奋有明显的抑制作用,对阿托品所致小鼠小肠运动抑制有明显的兴奋作用。
这表明藿香正气滴丸对小鼠小肠运动具有双向调节作用,对家兔离体肠管收缩力有双向调节作用。
5结论
用同样的方法对藿香正气丸、藿香正气滴丸、藿香正气口服液、藿香正气水进行在体实验,对数据统计分析结果如下:
表5.1在体实验各种剂肠管型推进率汇总结果
药物
—
XA
AT
HW
61.34±2.63
80.57±7.02
51.19±3.20
HD
72.53±10.68
69.99±5.13
62.60±8.98
HY
65.49±3.36
73.44±6.38
56.31±7.85
HS
65.15±5.44
70.82±5.01
58.77±11.55
注:
HW:
藿香正气丸(水)原液(12%g/mL),HD:
藿香正气滴丸原液(5.2%g/mL),HY:
藿香正气口服液,HS:
藿香正气水,XA:
0.002%甲硫酸新斯的明,AT:
0.01%硫酸阿托品
当单用一种藿香正气方剂剂型时,小肠推进率大小顺序为:
藿香正气滴丸>藿香正气口服液>藿香正气水>藿香正气丸(水)。
对在体实验结果进行t检验,检验结果显示:
藿香正气丸(水)组与藿香正气滴丸组相比,推进率有显著差异(P=0.017<0.05);藿香正气滴丸组与藿香正气水组相比,推进率有显著差异(P=0.021<0.05);藿香正气丸(水)和藿香正气口服液组相比,推进率有显著差异(P=0.034<0.05);其他各组之间,推进率均无显著差异。
当藿香正气方剂剂型与硫酸新斯的明合用时,小肠推进率大小顺序为:
藿香正气丸(水)>藿香正气液>藿香正气水>藿香正气滴丸,即其抑制作用大小为:
藿香正气滴丸>藿香正气水>藿香正气液>藿香正气丸(水)。
对在体实验结果进行t检验,检验结果显示:
藿香正气丸(水)组与藿香正气滴丸组相比,推进率有显著差异(P<0.001);藿香正气丸(水)和藿香正气水组相比,推进率有显著差异(P=0.003<0.05);其他各组之间,推进率均无显著差异。
当藿香正气方剂剂型与硫酸阿托品合用时,小肠推进率大小顺序为:
藿香正气滴丸>藿香正气水>藿香正气液>藿香正气丸(水)。
对在体实验结果进行t检验,检验结果显示:
藿香正气丸(水)组与藿香正气滴丸组相比,推进率有显著差异(P=0.007<0.05);藿香正气丸(水)和藿香正气口服液组相比,推进率有显著差异(P=0.041<0.05);其他各组之间,推进率均无显著差异。
表5.2离体实验各种剂肠管型推进率汇总结果
药物
—
XA
AT
HW
1.64±0.41
-2.12±0.35
0.45±0.14
HD
2.21±0.28
-3.47±0.65
0.68±0.20
HY
2.36±0.52
-2.44±0.78
1.30±0.46
HS
2.46±0.67
-2.36±1.13
1.48±0.60
注:
HW:
藿香正气丸(水)原液(12%g/mL),HD:
藿香正气滴丸原液(5.2%g/mL),HY:
藿香正气口服液,HS:
藿香正气水,XA:
0.002%甲硫酸新斯的明,AT:
0.01%硫酸阿托品
当单用一种藿香正气方剂剂型时,小肠推进率大小顺序为:
藿香正气水>藿香正气口服液>藿香正气滴丸>藿香正气丸(水),从而得出藿香正气水对小肠的促进作用最强。
对在体实验结果进行t检验,检验结果显示:
藿香正气丸(水)组与藿香正气口服液组相比,推进率有显著差异(P=0.037<0.05);其他各组之间,推进率均无显著差异。
当藿香正气方剂剂型与硫酸新斯的明合用时,小肠推进率大小顺序为:
小肠推进率大小顺序为:
藿香正气丸(水)>藿香正气液>藿香正气水>藿香正气滴丸;对新斯的明引起的小肠兴奋抑制作用大小顺序:
藿香正气滴丸>藿香正气口服液>藿香正气水>藿香正气丸(水),从而得出藿香正气滴丸对兴奋小肠的抑制作用最强。
对在体实验结果进行t检验,检验结果显示:
藿香正气丸(水)组与藿香正气滴丸组相比,推进率有显著差异(P=0.001<0.05);其他各组之间,推进率均无显著差异。
当藿香正气方剂剂型与硫酸阿托品合用时,小肠推进率大小顺序为:
藿香正气水>藿香正气口服液>藿香正气滴丸>藿香正气丸(水),从而得出藿香正气水对抑制小肠的兴奋作用最强。
对在体实验结果进行t检验,检验结果显示:
藿香正气丸(水)和藿香正气口服液组相比,推进率有显著差异(P=0.014<0.05);藿香正气丸(水)组与藿香正气水组相比,推进率有显著差异(P=0.022<0.05);藿香正气滴丸组与藿香正气水组相比,推进率有显著差异(P=0.041<0.05);其他各组之间,推进率均无显著差异。
6讨论
本次实验,给我印象最深的就是实验数据非常多、数据处理比较复杂,所以实验中要特别注意,对每次实验数据都要做详细认真的记录。
我还注意到,在体实验部分对小鼠进行染色编号,每只小鼠灌胃后20分钟要准时处死;离体实验部分,不能用手触及肠管,固定肠管时要特别小心,以免对肠管造成损坏,还要注意选用蠕动平稳的肠管进行实验。
在体实验过程中,在用实验剂量五倍的藿香正气滴丸,即藿香正气滴丸13mL/kg(正常成人用量的50倍)的量,做小鼠肠管推进实验时,藿香正气滴丸组小鼠均未发现有异常。
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