前列腺导管腺癌35例基底细胞转变的形态学.docx
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前列腺导管腺癌35例基底细胞转变的形态学
前列腺导管腺癌35例基底细胞转变的形态学
作者:
赵红艳,叶明福,王亚丽,汤金梁,陈锐
【摘要】目的:
探讨前列腺导管腺癌(PDA)基底细胞的病变特点,为前列腺癌的病理诊断提供依据.方式:
搜集PDA标本35例,应用光镜、免疫组化EliVisionTMPlus二步法,选择34βE12,P63,P504S,PSA,PSAP抗体检测,观察PDA中基底细胞的缺失情况.结果:
HE切片中35例PDA的基底细胞转变难以肯定,但免疫组化显示13例PDA多数癌巢周围有较完整的基底细胞,3例PDA仅少数基底细胞残余,19例PDA基底细胞完全缺失;本组病例中27例PDA边缘少数小片状浸润癌和/或小腺泡癌成份中P504S阳性、34βE1二、P63均阴性.结论:
本研究发现35例PDA中的基底细胞虽然有明显缺失,但残余比率较高,提示在日趋增多的前列腺穿刺标本中,基底细胞缺失并非是PDA诊断的最重要指标,若对基底细胞缺失期望值太高,则容易造成误诊或漏诊.
【关键词】前列腺肿瘤;导管腺癌;基底细胞;免疫组化
【Abstract】AIM:
Toinvestigatetheclinicopathologicalfeaturesofbasalcellsinprostaticductadenocarcinomawhichcanhelppathologicaldiagonosisofprostaticcancer.METHODS:
ThirtyfivecasesofprostaticductadenocarcinomawerestudiedbyhematoxylinandeosinstainingandimmunohistochemicaltechniquesoftwostepElivisionTMPlusmethodtodetecttheexpressionof34βE12,P63,P504S,PSAandPSAP.Andtheabscenceofbasalcellsinprostaticductadenocarcinomawasanalysedaccordingtotheimmunohistochemicalstaining.RESULTS:
Ofthetotal35cases,nearlyintactbasalcellswereobservedbyimmunohistochemicalstainingin13cases;onlysmallamountsofincompletebasalcellsin3cases;andcompleteabsenceofbasecellsin19cases27caseswithP504Spositive,34βE12andP63negativestainingattheedgeofsmallinvasivecarcinomaand/orsmallacinouscarcinomaaroundtheprostaticductadenocarcinomawerealsoobserved.CONCLUSION:
Althoughobviousabsenceofbasalcellsisusuallyobservedinprostateductadenocarcinoma,somebasalcellsstillremaininthetumortissues,whichshowsthattheabsenceofbasalcellsisnotthemostsignificantindexonthepathologicaldiagnosisofprostateductadenocarcinoma,andtoomuchdependenceontheimportanceofbasalcellabsenceindiagnosisofprostateductadenocarcinomawillleadtomisdiagnosisandmisseddiagnosis.
【Keywords】prostaticneoplasms;ductadenocarcinoma;basalcell;immunohistochemistry
0引言
前列腺导管腺癌(prostateductadenocarcinoma,PDA)为前列腺腺癌的一种亚型.随着前列腺癌穿刺活检的普遍开展,前列腺癌诊断的复杂性日趋受到病理工作者的重视.本实验通过观察35例PDAHE切片的镜下结构和基底细胞免疫组化的表达特点,探讨该类前列腺癌中基底细胞的缺失比率、免疫组化表达特点、肿瘤生长方式及导管腺癌周围混合癌成份的相关性特点,客观熟悉基底细胞缺失在PDA诊断中的“重要性”,为前列腺癌诊断提供依据.
1材料和方式
1.1材料搜集第全军医大学新桥医院199001/200708185例手术切除的前列腺癌标本,所有标本均经40g/L甲醛固定,常规石蜡包埋,HE染色.按WHO(2001)泌尿系统及男性生殖器官肿瘤分类中描述的组织形态学标准,经显微镜观察,挑选明确诊断为PDA的病例35例作为本研究的主体病例.mAb34βE12,P63,PSA,PSAP(福州迈新生物技术开发有限公司);mAbP504S(北京中杉金桥生物技术有限公司).除P504S为浓缩型外,其余抗体均为即用型.
方式每例选出具有代表性的癌细胞较丰硕的蜡块进行持续切片,片厚4μm,置于涂有多聚赖氨酸的玻片上.用EliVisionTMPlus二步法进行免疫组织化学染色.抗原修复除染P504S的组织用EDTA煮沸修复外,其余均采用柠檬酸缓冲液煮沸抗原修复法处置.操作步骤严格依照说明书进行,用PBS代替一抗作阴性对照.结果判断:
34βE12,P504S,PSA,PSAP阳性定位于细胞质中,偶见于胞膜;P63阳性定位于胞核.癌细胞呈黄棕色染色为阳性,无黄棕色染色为阴性.P504S(+),34βE12和P63均(-)定为基底细胞完全缺失(-);P504S(+),34βE12和/或P63(+),定为基底细胞存在,其中癌巢周围大于80%的细胞34βE12和/或P63表达为基底细胞大体完整(+),癌巢周围10%~80%的细胞34βE12和/或P63表达为基底细胞部份缺失(±).
2结果
病理形态学观察全数病例的肿瘤区域呈大的导管状腺癌结构,包括筛状型和实体型两种类型.其中筛状型25例,癌巢中可见明确的筛孔状腺样结构,或导管腺癌组织内散见一些小的腺体呈背靠背、桥状、裂隙状结构.实体型10例,癌巢中腺样结构不明显,癌细胞呈实片状,可见少量裂隙,局部导管内可见粉刺样坏死物.本组35例PDA中28例瘤细胞异型性明显,核大,深染,核仁明显增大,可见核割裂像,7例瘤细胞异型不明显.在光镜下,仅发现其中10例癌性导管周围尚可识别出较完整的“基底细胞”存在(图1A),25例不能明确基底细胞是不是残余.本组病例中有1例为转移至耻骨联合上缘的PDA实体癌,巢团周围光镜下观察有完整的“基底细胞”存在,基底样细胞呈环状包绕着癌巢周缘(图1B).35例PDA的次要结构区域可见一些无明确基底细胞的小腺泡和/或小片状癌细胞浸润.
A:
筛状型PDA尚可识别出部份基底细胞残余;B:
PDA基底样细胞呈环状包绕着癌巢周缘.
图1PDA的HE结构(略)
免疫组化检测结果
PDA区的基底细胞免疫组化表达结果显示所有病例癌巢中央34βE12,P63均为(-),基底细胞完全缺失;10例筛状型及3例实体型边缘部34βE12或P63大体呈持续(+),表明基底细胞大体完整(图2A);2例筛状型及1例实体型边缘部34βE12或P63断续(+)(图2B),提示基底细胞部份缺失;19例(筛状型13例,实体型6例)边缘部34βE12和P63均(-),基底细胞完全缺失.其中1例转移至耻骨联合上缘的PDA实体癌癌巢周围呈环状的基底样细胞34βE12和P63(-),但PSA和PSAP均阳性(图3A).本实验中,基底细胞的34βE1二、P63两种标记物均阳性13例,均阴性19例,相符率%,P63阳性而34βE12阴性3例,不符率%;未发现34βE12阳性而P63阴性的病例. A:
PDA导管周围34βE12显示基底细胞部份缺失;B:
筛状型PDA的P63显示基底细胞较完整存在.
图2癌巢周围基底细胞的免疫组化表达情况(略)
A:
一例转移性PDA瘤细胞PSAP阳性,基底样细胞呈环状强阳性表达;B:
筛状型PDA瘤细胞P504S阳性.
图3肿瘤细胞的免疫组化表达情况(略)
PDA区的肿瘤细胞免疫组化表达本实验发现30例(筛状型21例,实体型9例)PDA中巢团状肿瘤区域的瘤细胞P504S(±~)(图3B);5例(筛状型癌4例,实体型癌1例)癌细胞(-).所有病例的癌细胞PSA和PSAP均阳性(+)或强阳性(~)表达.
PDA癌周浸润癌组织免疫组化表达结果显示,PDA周围可见少量异形癌性腺泡和/或散在小片状癌浸润,免疫组化检测发现这些病灶中,28例癌细胞P504S(+),且34βE1二、P63均无表达(-),提示基底细胞完全缺失;7例导管腺癌周围浸润的异型小腺泡,上皮细胞P504S(+),腺管边缘34βE12或P63显断续(+)表达,提示基底细胞部份缺失(表1).
表1PDA的34βE12,P63,P504S,PSA,PSAP的表达和基底细胞的缺失情况(略)
※:
1-25为筛状型癌,26-35为实体型癌.
3讨论
前列腺的基底细胞核呈条状与基底膜平行,深染,胞质缺少或缺乏.电镜观察此类细胞体积小,细胞器较少,细胞间可见桥粒或半桥粒结构,细胞质内未见到成熟的肌丝,而且其34βE12阳性和S100、SMA阴性,表明该细胞属于基底细胞而不是肌上皮细胞.在HE切片中,本组无一例能明确分辨出基底细胞是不是完全缺失,其中一例转移至耻骨联合上缘的PDA实体癌,镜下观察以为肿瘤癌巢周围“基底细胞”明确存在且较完整,但34βE12和P63均阴性,可见在前列腺癌诊断中,尤其在HE切片中,应当谨慎应用基底细胞缺失这一关键性诊断指标,在HE切片中观察到基底样细胞时,应采用免疫组化证明.34βE12和P63是目前已普遍应用的两种基底细胞标记,应用其识别基底细胞比肉目光镜观察准确得多.
34βE12定位于基底细胞的胞膜和胞质.可是,34βE12在前列腺良性增生、萎缩、腺病和不典型增生中可有假阴性[1].因此,单独采用34βE12标记基底细胞有必然局限性,34βE12只能作为前列腺癌诊断中的一个重要的辅助指标[2-3].P63蛋白选择性地表达于基底细胞胞核中,而在分泌腺细胞和神经内分泌细胞中不表达.Shah等[4]比较基底细胞对34βE12和p63的特异性,发现p63比34βE12灵敏度更高,在复杂病例中更有诊断优势.二者联合应用可减少假阴性,可进一步提高检测结果的稳定性.基底细胞标记对前列腺癌来讲是一种阴性标记抗体,有时抗体质量、标记技术和标本处置等方面的问题会造成假阴性结果.若是能联合利用前列腺癌的阳性标记抗体,则更有利于明确诊断.P504S是目前公认的前列腺癌的阳性标记抗体,它在良性前列腺上皮中低表达,而在前列腺癌的上皮内高表达.因此P504S和34βE1二、p63都已成为辨别前列腺良恶性病变的重要工具.若是结构异样的腺体中出现大核仁,免疫标记证明这些腺上皮细胞表达P504S,腺体周围的基底细胞不表达34βE12和p63,癌的诊断几乎可以肯定.本实验联合应用该三种抗体,对35例前列腺导管腺癌进行标记,发现癌巢周围,%(13/35)的病例大于80%的基底细胞存在,%(3/35)的病例10%~80%的基底细胞存在.这提示在前列腺导管腺癌中,基底细胞并非是完全缺失,而且残余的比率较高,基底细胞缺失并非诊断前列腺导管腺癌的必备条件,应引发在病理诊断中的注意.
本实验联合应用P504S和34βE12,p63标记前列腺导管腺癌这一特殊类型癌,发现该类肿瘤中基底细胞残余比率较高.尤其是在前列腺穿刺的小组织中,若是发现一些可疑为癌的筛状结构、裂隙状结构、肾小球样结构时,应该考虑到利用这三种抗体进行标记.可是值得注意的是,在这些小标本中,若观察到基底细胞大部份残余,也不该该排除前列腺癌的诊断.正如蒋智名等[5]的实验中发现有30%的前列腺癌穿刺组织中找不到核仁一样.另外咱们发现,35例导管腺癌中28例肿瘤次要区域存在小片状浸润腺癌和/或小腺泡癌,其基底细胞细胞完全缺失,且P504S均有表达;7例肿瘤周围弥散的小腺泡,P504S阳性表达,基底细胞部份缺失.同时13例基底细胞大体完整的导管腺癌周围都可见癌性腺泡和/或弥散的小片状癌.因此,在难以确诊的导管腺癌周围,如能找到癌性成份也是一个重要的佐证.
【参考文献】
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- 前列腺 导管 腺癌 35 基底 细胞 转变 形态学