基因工程技术原理与应用doc.docx
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基因工程技术原理与应用doc
基因工程技术原理与应用
(总分:
1046.00,做题时间:
90分钟)
一、填空题(总题数:
51,分数:
198.00)
1.BarnHⅠ是识别6个核苷酸的酶,其切割产物的平均长度的理论值是1。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
2.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的大小不同的片段,可以构建显示该区域各限制酶切位点位置的1。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
3.EcoK是Ⅰ类限制性内切酶,分子组成是α2β2γ。
α亚基的作用是______;β亚基的作用是______;γ亚基的作用是______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
4.个体之间DNA限制性片段长度的差异称为1。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
5.限制性内切核酸酶的命名原则是:
第一个字母来自______;第二、三两个字母来自______;第四个字母则表示______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
6.在限制性内切核酸酶切反应管中添加各种成分后,需要离心数秒钟,其目的是______和______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
7.为了进行部分酶切可以采用下列措施:
______、______和______等。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
8.限制性内切核酸酶的识别序列分别由4、6、8对碱基组成,它们在DNA序列上的切割频率的理论值分别是______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
9.限制性内切核酸酶通常保存在1浓度的甘油溶液中。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
10.测序酶是修饰了的T7DNA聚合酶,它只有______酶的活性,而没有______活性。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
11.切口平移(nicktranslation)法标记DNA的基本原理在于______的______和______的作用。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
12.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变为平末端的双链形式,通常采用的方法是______和______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
13.反转录酶具有催化DNA合成的作用,同时还具有______的作用,可以将DNA-RNA杂合双链中的______消化掉。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
14.基因工程中所用的载体主要有三类:
______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
15.一个最简单的质粒载体必须包括以下几个部分:
______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
16.如果两个质粒不能稳定共存于同一个寄主细胞中,则属于______群,这是因为他们的______所致。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
17.质粒的拷贝数是指细胞中1。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
18.ColEl质粒复制的起始需要三种酶:
______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
19.那些没有可以检测表型的质粒称为1。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
20.噬菌体可以被改造作为基因工程载体,主要是由于______和______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
21.λ噬菌体载体主要有两种类型,插入型和置换型。
就酶切位点来说,插入型为______个;置换型为______个。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
22.M13噬菌体DNA的复制分为三个阶段:
______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
23.噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的.其中来自质粒的结构主要是______和______;来自噬菌体的主要结构是______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
24.λ噬菌体由于包装的限制,插入外源DNA片段后,总长度应在噬菌体基因组的1范围内。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
25.引物在基因工程中至少有4方面的用途:
______、______、______、和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
26.利用TaqDNA聚合酶进行PCR反应所得产物不是平末端,而是在______端带有一个突出的______;据此人们设计了PCR产物的______克隆法。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
27.简并引物PCR主要是依据蛋白质的氨基酸序列设计1引物来扩增相应的基因。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
28.现有的克隆基因的策略大体上可以分为三类:
______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
29.DNA重组连接的方法大致有4种:
______、______、______和______。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
30.SD序列是mRNA分子中与______结合的序列,位于______密码子的上游;在基因组中的对应位置是______位点与______位点之间。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
31.携带有外源基因并能持久传递给子代的植物称为______植物;这些外源基因就叫做______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
32.重组子的筛选有两层含义,一是______;二是______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
33.限制性内切核酸酶切割DNA后产生5'端突出的黏性末端,可以用______进行3'端标记;如果限制性内切核酸酶切割DNA后产生3'端突出的黏性末端,可以用______进行5'端标记。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
34.为了获得单链标记的DNA探针可以采用以下三种方法:
______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
35.根据Northern杂交的结果可以说明______;根据Southern杂交的结果可以说明______;根据western杂交的结果可以说明______;根据原位杂交的结果可以说明______。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
36.Northern杂交和Southern杂交的根本区别在于______和______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
37.欲将某一具有单链突出末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常采用的方法有______和______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
38.由于不同构型的DNA插入EB的量的不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中迁移率也不同,scDNA的泳动速度______;ocDNA的泳动速度______;1DNA居中。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
39.在基因工程中,导入外源基因的主要方法有______、______、______和______等。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
40.在基因组计划中用来构建人基因组DNA文库的载体通常有4种,分别是______、______、______和______。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
41.反向PCR的方法通常用来______;重组PCR的方法通常用来______;原位PCR的方法通常用来______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
42.核酸凝胶电泳中常用的染料是1。
(分数:
1.50)
填空项1:
__________________
43.为对某一生物的基因进行全面的研究,只需建立______个基因组文库,同时必须建立______个cDNA文库。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
44.双脱氧链终止法测定DNA碱基序列需要的试剂为______、______、______和______等。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
45.TaqDNA聚合酶需要适当浓度的Mg2+才能发挥作用。
Mg2+浓度升高对TaqDNA聚合酶的效应是______;Mg2+浓度降低,对TaqDNA聚合酶的效应是______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
46.普通质粒载体、入噬菌体载体、黏粒载体和噬菌粒的容量由大到小依次为______、______、______和______。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
47.目前栽培面积较大的5种农作物是______、______、______、______和______。
其中以______为最大。
(分数:
9.00)
填空项1:
__________________
48.外源基因导入植物细胞的方法为______、______和______。
(分数:
4.50)
填空项1:
__________________
49.外源基因导人动物受精卵的方法有______、______、______、______和______。
(分数:
7.50)
填空项1:
__________________
50.大肠杆菌中选择性标记一般为______;酵母菌中选择性标记一般为______。
(分数:
3.00)
填空项1:
__________________
51.核型多角体病毒有两种表现型______和______;分别感染______和______。
(分数:
6.00)
填空项1:
__________________
二、判断题(总题数:
26,分数:
26.00)
52.限制与修饰现象是宿主的一种保护体系,它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA的限制而实现的。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
53.限制性内切核酸酶在DNA中的识别/切割位点的二级、三级结构也影响酶切效率。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
54.能够产生限制酶从而防御病毒的侵染的细菌,其本身的基因组DNA中没有该酶的识别序列。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
55.限制性酶切图谱和限制性片段长度多态性图谱的区别在于前者是物理图谱,而后者是连锁图谱。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
56.某一限制酶在一环状DNA上有3个切点,用此酶切割该环状DNA,可以得到3个片段。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
57.基因工程中所使用的内切酶不仅具有内切核酸酶活性,也具有甲基化的活性。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
58.用同一种限制性内切核酸酶切割载体和外源DNA得到黏性末端后,为防止它们自身环化,要用CIP将他们脱磷酸。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
59.Gap和Nick的含义是不同的,前者是指DNA的单链中有较小的缺失,后者仅是断开了一个磷酸二酯键。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
60.线状质粒与环状质粒一样都不带有宿主必需的基因。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
61.有a、b、c三个质粒,a和b能够共存于一个细胞中,a和c也可以共存于一个细胞中,所以b和c也一定能够共存于一个细胞中。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
62.如果两个质粒可以稳定共存于一个细胞中,这两种质粒则属于同一个不亲和群。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
63.能够在不同的宿主细胞中复制的质粒叫穿梭质粒。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
64.置换型载体是指同一种限制性内切核酸酶在入DNA中具有两个切点,外源DNA通过取代这两个点间的片段被克隆。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
65.噬菌体载体集质粒和丝状噬菌体的有利特征于一身的载体,既能合成单链DNA,又能合成双链DNA。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
66.λ噬菌体DNA和M13单链噬菌体DNA在成熟前的DNA复制都是用滚环模型。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
67.所谓引物就是与DNA互补的一小段RNA分子。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
68.简并引物是根据已知DNA序列设计的引物群。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
69.通过原位杂交得到的阳性克隆就是重组子,但不能判断插入的外源基因是否表达了。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
70.核酸杂交的原理是根据DNA分子间的互补。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
71.突出的3'端或凹端的3'端都可以用Klenow酶进行末端标记。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
72.用氯霉素处理细菌可以使内含的严紧型质粒大量扩增,从而极大地提高其产量。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
73.为了在大肠杆菌中高效表达外源蛋白质,常需要考虑的因素有启动子的强弱、SD序列、蛋白的存在方式以及Poly(A)加尾信号等。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
74.反转录酶是一种依赖于RNA的DNA聚合酶。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
75.反转录酶催化的信息流是蛋白质→RNA→DNA。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
76.在克隆载体pUC系列中,lacZ'基因提供了一个外源基因的选择标记,蓝色的转化菌落通常表明克隆是失败的。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
77.只有用同一种限制性内切核酸酶切割获得的DNA片段末端才能够用DNA连接酶连接起来。
()
(分数:
1.00)
A.正确
B.错误
三、选择题(总题数:
72,分数:
72.00)
78.在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是()。
(分数:
1.00)
A.化学合成法
B.基因组文库法
C.cDNA文库法
D.聚合酶链反应
E.差异显示法
79.在下列进行DNA部分酶切的条件中,控制哪一项最好?
()
(分数:
1.00)
A.反应时间
B.酶量
C.反应体积
D.酶反应的温度
80.T4DNA连接酶是从T4噬菌体感染的E.coli中分离的,这种酶()。
(分数:
1.00)
A.催化连接反应时既能以ATP又能以NAD作为能量来源
B.既能催化平末端连接又能催化黏性末端连接
C.是一种单肽酶,分子质量为74kDa
D.既能催化单链DNA连接又能催化双链DNA连接
81.限制性片段长度多态性是()。
(分数:
1.00)
A.用于遗传的“指纹结构”模式分析的技术
B.二倍体细胞中的两个等位基因限制性图谱的差别
C.物种中的两个个体限制性图谱的差别
D.两个物种中个体间的限制性图谱的差别
E.两种酶在单个染色体上限制性图谱的差别
82.建cDNA文库时,首先需分离细胞的()。
(分数:
1.00)
A.染色体DNA
B.线粒体DNA
C.总mRNA
D.tRNA
E.rRNA
83.从大肠杆菌的两个菌株中提纯的一种质粒,一个可以被某种限制性内切核酸酶切开而另一个不可以,是因为()。
(分数:
1.00)
A.该质粒在一个菌株中有切割
B.该质粒在一个菌株中是线性的
C.该质粒在一个菌株中被甲基化了
D.不能被酶切的质粒是线性的
84.外源基因在大肠杆菌中高效表达受很多因素影响,其中SD序列的作用是()。
(分数:
1.00)
A.提供一个mRNA转录终止子
B.提供一个mRNA起始点
C.提供一个核糖体结合位点
D.提供一个翻译的终点
85.在基因工程技术中,不常用到的酶是()。
(分数:
1.00)
A.限制性内切核酸酶
B.DNA聚合酶
C.DNA连接酶
D.反转录酶
E.DNA解链酶
86.限制性内切核酸酶切割DNA后产生()。
(分数:
1.00)
A.3'磷酸基末端和5'羟基末端
B.5'磷酸基末端和3'羟基末端
C.3'磷酸基末端和5'磷酸基末端
D.5'羟基末端和3'羟基末端
E.3'羟基末端、5'羟基末端和磷酸
87.最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是()。
(分数:
1.00)
A.营养互补筛选
B.抗药性筛选
C.免疫化学筛选
D.PCR筛选
E.分子杂交筛选
88.PCR变性温度一般为()。
(分数:
1.00)
A.94℃
B.85℃
C.72℃
D.62℃
E.55℃
89.在切口平移标记DNA探针时只能使用()。
(分数:
1.00)
A.Klenow酶
B.DNA聚合酶Ⅰ
C.DNA聚合酶Ⅱ
D.DNA聚合酶Ⅲ
90.RFLP产生自()。
(分数:
1.00)
A.使用不同的限制性内切核酸酶
B.每种类型的染色体有两条
C.染色体中碱基的随机变化
D.Southern印迹
E.不同探针的使用
91.Ⅲ型限制性内切核酸酶()。
(分数:
1.00)
A.由两个亚基组成,仅识别半甲基化位点
B.甲基化和限制活性相互排斥:
MS亚基促使甲基化,R亚基促使限制
C.由两个亚基组成,在识别位点附近识别并进行甲基化或限制
D.在错配修复中起关键作用,因为酶结合到DNA上是以结构扭曲为基础,而不是序列错误识别
92.限制性内切核酸酶可以特异性的识别()
(分数:
1.00)
A.双链DNA的特定碱基对
B.双链DNA的特定碱基序列
C.特定的三联体密码
D.以上都正确
93.以质粒为载体将外源基因导入受体菌的过程称()。
(分数:
1.00)
A.转化
B.转染
C.感染
D.转导
94.Klenow酶与DNA聚合酶相比,前者丧失了()活性。
(分数:
1.00)
A.5'→3'合成酶
B.3'→5'外切酶
C.5'→3'外切酶
D.转移酶
95.cDNA文库包括该种生物的()。
(分数:
1.00)
A.某些蛋白质的结构基因
B.所有蛋白质的结构基因
C.所有的结构基因
D.内含子和调控区
96.基因工程研究中所用的质粒大多是经过改造的,真正的天然质粒载体很少。
在下列载体中被视为基因工程载体的天然质粒是()。
(分数:
1.00)
A.pBR322
B.pSC101
C.pBS
D.pUC18
97.限制性内切核酸酶的星号活性是指()。
(分数:
1.00)
A.在非常规条件下,识别和切割序列发生变化的活性
B.活性大大提高
C.切割速度大大加快
D.识别序列与原来的完全不同
98.切口平移是指在()作用下,使()带上放射性标记。
(分数:
1.00)
A.DNA聚合酶Ⅰ,RNA
B.DNA聚合酶Ⅰ,DNA
C.DNA聚合酶Ⅲ,RNA
D.DNA聚合酶Ⅲ,DNA
99.α互补筛选法属于()。
(分数:
1.00)
A.抗药性标志筛选
B.酶联免疫筛选
C.标志补救筛选
D.原位杂交筛选
E.免疫化学筛选
100.DNA被某限制性内切核酸酶切割后,电泳得到的电泳带有些扩散,下列原因中哪一项不太可能?
()
(分数:
1.00)
A.酶失活
B.底物DNA不纯,污染有蛋白质
C.酶切条件不合适
D.由外切核酸酶污染
101.要对一双链的DNA分子进行3'端标记可用()。
(分数:
1.00)
A.Klenow酶
B.DNA聚合酶Ⅰ
C.T4DNA聚合酶
D.T7DNA聚合酶
102.下面哪一种不是产生星号活性的主要原因?
()
(分数:
1.00)
A.甘油含量过量
B.反应体系中含有有机溶剂
C.含有非Mg2+的二价阳离子
D.酶切反应时酶浓度过低
103.基因工程技术常用的限制性内切核酸酶为()。
(分数:
1.00)
A.Ⅰ类酶
B.Ⅱ类酶
C.Ⅲ类酶
D.Ⅳ类酶
E.Ⅴ类酶
104.用于Northern杂交的探针可以是放射性标记的()。
(分数:
1.00)
A.DNA
B.dNTP
C.抗体
D.抗原
105.有关理想质粒载体的特点,正确的是()。
(分数:
1.00)
A.为线性单链DNA
B.含有多种限制酶的单一切点
C.含有同一限制酶的多个切点
D.其复制受宿主控制
E.不含耐药基因
106.M13K07是一种辅助噬菌体,可以用来帮助噬菌粒制备单链DNA,这是由于()。
(分数:
1.00)
A.M13K07能够进行滚环复制,得到大量单链噬菌体DNA
B.M13K07能够提供成熟包装蛋白质
C.M13K07提供成熟包装所需的信号
D.M13K07提供噬菌粒进行单链复制所需的所有蛋白质
107.同一种质粒DNA可以以三种不同的形式存在,它们的迁移速率是()。
(分数:
1.00)
A.ocDNA>scDNA>1DNA
B.scDNA>1DNA>ocDNA
C.1DNA>ocDNA>scDNA
D.scDNA>ocDNA>1DNA
108.第1个作为重组DNA载体的
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