第1部分临床检验基础师级高频考点Word文件下载.docx
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典型试题2(A1型题)关于采血的叙述正确的是(A)A.皮肤采血缺点是易于溶血、凝血、混入组织液B.开放式采血法的操作环节少C.采血时患者情况不会影响结果
D.容器不洁不会引起溶血E.样本保存不当不影响结果
高频考点5抗凝剂选择
抗凝是用物理或化学方法除去或抑制血液中某些凝血因子的活性,阻止血液凝固。
常用的抗凝剂:
①乙二胺四乙酸(EDTA)盐:
与血液中Ca2+形成螯合物,使Ca2+失去凝血作用。
不适于凝血检查和血小板功能试验。
2草酸盐:
草酸根离子与样本中Ca2+形成草酸钙沉淀,使Ca2+失去凝血作用。
草酸盐与血液比例为1:
9。
不
适于凝血检查。
3双草酸盐抗凝剂:
适用于血细胞比容、全血细胞计数(CBC)、网织红细胞计数等检查,不适于血小板计数和白细胞分类计数。
4肝素:
阻止凝血酶的形成和血小板聚集,是红细胞透渗脆性试验的理想抗凝剂,不适于CBC和细胞形态学检查。
5枸橼酸盐:
与血中Ca2+结合形成螯合物,阻止血液凝固。
适用于红细胞沉降率、凝血检查,是输血保养液的成分。
典型试题3(X型题)与钙离子结合的抗凝剂是(ABCE)
高频考点6载玻片的清洁和血涂片的制备
新载玻片常带有游离碱质,须用1mol/LHCl清洗。
血涂片的制备:
好的血片应厚薄适宜、头体尾明显、细胞分布均匀、血膜边缘整齐、留有空隙。
1手工推片法:
血滴大小、推片与载玻片间夹角、推片速度、血细胞比容与涂片厚薄有关。
2载玻片压拉法:
适用于血细胞活体染色。
③棕黄层涂片法:
用于白细胞减低者的白细胞分类计数、红斑狼疮细胞检查等。
高频考点7血液细胞染色
瑞氏染色法染色原理包括物理吸附和化学亲和作用。
瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝(又名美蓝)组成。
血红蛋白、嗜酸性颗粒与伊红结合,呈粉红色;
细胞核蛋白、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞胞质与美蓝或天青(美蓝的氧化形式)结合,呈紫蓝色或蓝色;
中性颗粒与伊红和美蓝结合,呈淡紫红色。
染色深浅与染液pH值(最适pH为6.4~6.8)、细胞数量、血膜厚度、染色时间、染液浓度有关。
2.吉姆萨染色染色原理和结果与瑞氏染色基本相同。
吉姆萨染液由天青、伊红组成。
吉姆萨染液由吉姆萨染料、甘油和甲醇组成。
典型试题4(A1型题)下列关于瑞氏染色的叙述,正确的是(E)
A.瑞氏染色的最适pH值为6~7B.染液配制后可立即使用
C.瑞氏染料中含酸性染料美蓝和碱性染料伊红D.染色时间不受室温影响
E.缓冲液pH偏高,血涂片颜色会偏蓝
高频考点8血涂片制备和血液细胞染色的方法学评价和质量控制
手工推片法应用最广泛,棕黄层涂片法可提高异常情况的阳性检出率。
疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血涂片法。
瑞氏染色法最常用,对细胞质成分、中性颗粒染色效果好。
吉姆萨染液对细胞核和寄生虫的着色好,是观察细胞核和寄生虫的首选染色方法。
瑞氏-吉姆萨复合染液可获得满意的细胞胞质、颗粒、胞核等的染色效果。
。
制备涂片时,血细胞比容增高、血液粘度较高时,应采用小血滴、小角度、慢推;
而血细胞比容减低、血液较稀时,应采用大血滴、大角度、快推。
(周卫平)
第2单元红细胞检查
高频考点1红细胞生理
1.红细胞的生成①红细胞是血液中数量最多的有形成分。
②起源于骨髓造血干细胞。
③从造血干细胞分化发育到网织红细胞在骨髓中进行,约需72h。
④在骨髓或血液中,网织红细胞到成熟红细胞约需48h。
⑤
红细胞平均寿命约120d。
⑥衰老红细胞主要在脾破坏,分解为铁、珠蛋白和胆红素。
2.红细胞生理功能通过血红蛋白实现交换和携带气体功能。
高频考点2血红蛋白分子结构和特点
结构血红蛋白(Hb)由两对珠蛋白肽链和4个亚铁血红素构成。
①珠蛋白:
4条肽链(、链)。
②亚铁血红素:
原卟啉、铁。
2.特点①正常情况下,99%Hb为还原Hb(HbA),1%为高铁Hb(HbF)。
②只有Fe2+状态的Hb才能与氧结合,称为氧合血红蛋白。
③人体生长各期,Hb的种类与比例不同。
④血红蛋白合成受红细胞生成素、雄激素调节。
⑤血红蛋白相对分子质量为64458。
⑥血红蛋白降解产物为珠蛋白、血红素。
高频考点3红细胞计数的检测原理、方法学评价和质量控制
1.手工显微镜法在显微镜下计数一定体积内的红细胞数,经换算求出每升血液中红细胞数量。
不需要
特殊设备,但操作复杂、费时。
误差可源自样本、操作、器材和固有误差。
2.血液分析仪法用电阻抗和(或)光散射原理。
比手工法精确(如电阻抗计数法的变异系数为2%,
手工法则>
11%)。
当白细胞数量明显增高会干扰红细胞计数结果。
应严格按规程操作,并定期进行室内和室间质控。
高频考点4红细胞计数的参考值和临床意义
1.参考值成年男性(4~5.5)×
1012/L;
成年女性(3.5~5.0)×
新生儿(6.0~7.0)×
1012/L。
2.医学决定水平>
6.8×
1012/L需治疗;
<
3.5×
1012/L诊断为贫血;
1.5×
1012/L考虑输血。
3.临床意义
(1)生理性变化①年龄、性别②精神因素;
③剧烈体力运动和劳动;
④气压减低;
⑤妊娠。
(2)各种原因的贫血①急性、慢性红细胞丢失过多;
②红细胞寿命缩短;
③造血原料不足;
④骨髓造
血功能减退。
3)红细胞增多。
高频考点5红细胞计数的操作方法
高倍镜下,计数5个中方格内的红细胞数。
高频考点6血红蛋白测定的检测原理
1.氰化高铁血红蛋白(HiCN)法HiCN法是目前国际推荐测定血红蛋白的方法。
血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种Hb均可被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白,再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物-氰
化高铁血红蛋白,其在540nm处有一吸收峰,用分光光度计测定该处的吸光度,可计算出每升血液中的血红蛋白浓度。
2.十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)法血液中的Hb均可与低浓度SDS作用,生成SDS-Hb棕红色化合物,用分光光度计测定波峰538mm处吸光度,可得到每升血液中的血红蛋白浓度。
高频考点7血红蛋白测定的方法学评价
1.HiCN法操作简单、显色快、结果稳定可靠、读取吸光度后可直接定值。
缺点是氰化钾(KCN)试剂有剧毒。
2.SDS-Hb法操作简单、呈色稳定、准确性和精确性符合要求、无公害。
但不能直接用吸光度计算Hb浓度。
3.叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法优点与HiCN测定法相似。
最大吸收峰在542nm,试剂毒性小于氰化钾。
4.碱羟血红蛋白(AHD575)法试剂简单、呈色稳定、无公害、吸收峰在575nm、可用氯化血红素作
为标准品。
5.溴代十六烷基三甲胺(CTAB)血红蛋白法试剂溶血性强又不破坏白细胞,适用于仪器上自动检测Hb和白细胞。
缺点是测定结果的准确度和精密度不佳。
6.沙利(Sahli)酸化血红蛋白法简单易行,但重复性差、误差较大,基本淘汰。
7.血细胞分析仪操作简单、快速、同时可获得多项红细胞参数。
仪器须经HiCN标准液校正后才能使用。
仪器法测定精度(CV)约为1%。
高频考点8血红蛋白测定的质量控制
异常血浆蛋白质、高脂血症、白细胞数>
30×
109/L、脂滴等可产生浊度,干扰Hb测定。
静脉血的Hb比
毛细血管血低10%~15%。
稀释倍数不准、红细胞溶解不当、血浆中脂质或蛋白质量增加会导致测定值假性增高。
高频考点9血红蛋白测定的参考值及临床意义
1.参考值成年:
男性120~160g/L;
女性:
110~150g/L。
新生儿:
170~200g/L。
老年人(70岁以上):
男性94.2~122.2g/L;
女性86.5~111.8g/L。
2.临床意义
(1)生理性变化:
随年龄而变化;
红细胞和血红蛋白量有天内波动,上午7时达高峰。
(2)病理性变化:
血红蛋白在判断贫血程度方面优于红细胞计数。
高频考点10氰化高铁血红蛋白测定法操作
在5mlHiCN转化液中,加血20l,充分混合,静置5min后,倒入光径1cm比色皿,在其最大吸收峰波长540nm处,HiCN转化液或蒸馏水调零,测定吸光度(A)。
根据公式直接计算:
采用HiCN参考液(50g/L、100g/L、150g/L、200g/L),在分光光度计上,波长540nm处,测定各种参考液的吸光度,以参考液血红蛋白含量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,或求出换算常数(K)。
然后,根据样本吸光度(A)在标准曲线查出血红蛋白浓度,或用K值计算:
Hb(g/L)=K×
A。
高频考点11红细胞形态检查原理和参考值
将细胞分布均匀的血涂片进行染色(常用瑞氏染色)后,根据各种细胞的呈色特点,在显微镜下进行观察和识别。
瑞氏染色血涂片可见成熟红细胞呈双凹圆盘形、细胞大小一致、平均直径7.2m(范围6~9.5m)、淡粉红色、中央1/3为生理性淡染区、胞质内无异常结构。
高频考点12红细胞形态检查的临床意义
1.大小改变①小红细胞:
直径<
6m,见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血和遗传性球形细胞增多症。
②大红细胞:
直径>
10m,见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血和恶性贫血等。
③巨红细胞:
15m,见于巨幼细胞性贫血。
④红细胞大小不均:
见于严重的增生性贫血(如巨幼细胞性贫血)。
2.血红蛋白含量改变①正常色素性:
正常人、急性失血、再生障碍性贫血和白血病等。
②低色素性:
缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血、某些血红蛋白病。
3高色素性:
巨幼细胞性贫血。
④多色性:
正常人(约占1%)、骨髓造红细胞功能活跃(如溶血性或急性失血性贫血)。
⑤细胞着色不一:
同时出现低色素、正常色素性两种细胞,见于铁粒幼红细胞性贫血。
3.形状改变包括球形红细胞、椭圆形红细胞、靶形红细胞、口形红细胞、镰形红细胞、棘红细胞、裂红细胞、有核红细胞、泪滴形红细胞及红细胞形态不整。
球形红细胞:
见于遗传性和获得性球形细胞增多症(如自身免疫溶血性贫血、直接理化损伤如烧伤等)和小儿。
椭圆形红细胞:
见于遗传性椭圆形细胞增多症(可达25%~75%)、大细胞性贫血(可达25%)、缺铁性
贫血、骨髓纤维化、巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血、正常人(约占1%,不超过15%)。
靶形红细胞:
见于各种低色素性贫血(如珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病)、阻塞性黄疸、脾切除后。
口形红细胞:
见于口形红细胞增多症、小儿消化系统疾患引起的贫血、酒精中毒、某些溶血性贫血、肝病和正常人(<
4%)
镰形红细胞:
见于镰状细胞贫血(HbS-S,HbS-C)、镰状细胞特性样本(HbA-S)。
棘红细胞:
见于遗传性或获得性β-脂蛋白缺乏症(高达70%~80%)、脾切除后、酒精中毒性肝病、尿毒症。
需与皱缩红细胞(锯齿状红细胞)鉴别,皱缩红细胞边缘呈锯齿形,排列紧密,大小相等,外端较尖。
裂红细胞:
见于DIC、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤和正常人(<
2%)。
缗钱状红细胞:
(纤维蛋白原、球蛋白增高),见于多发性骨髓瘤。
有核红细胞(幼稚红细胞):
1周内婴儿可见少量,如溶血性贫血(如新生儿溶血性贫血、自身免疫性溶血性贫血、巨幼细胞性贫血)、造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤(如各种急、慢性白血病、红白血病)、慢性骨髓增生性疾病(如骨髓纤维化)、脾切除后。
新月形红细胞:
见于某些溶血性贫血(PNH)。
泪滴形红细胞:
见于贫血、骨髓纤维化和正常人。
红细胞形态不整:
见于某些感染、严重贫血、巨幼细胞性贫血。
4.异常结构寄生虫。
嗜碱性点点彩红细胞(变性RNA)增高:
见于中毒(如铅、汞、银、铋、硝基苯、苯胺等)、各类贫血(如
溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等)。
卡波氏环是胞质中脂蛋白变性所致,常与染色体小体同在,见于巨幼红和铅中毒。
豪焦小体(Howell-Jolly'
sbo、dy染色质小体):
位于成熟或幼稚红胞质内染成紫红色,数量不一的圆形颗
粒,是核的残留物。
高频考点13血细胞比容测定的检测原理和方法学评价
血细胞比容(Hct或PCV)是指在一定条件下,经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。
手工法有折射计法、粘度法、比密测定法、离心法和放射性核素法。
1温氏法(Wintrobe法):
采用中速离心,不能完全排除红细胞问残留血浆,测定结果偏高。
②微量法:
采用高速离心使残留血浆比温氏法少,样本用量小、操作简便、残留血浆1%~3%。
2.血液分析仪法仪器法CV为1%,手工法CV为2%,仪器法应注意红细胞增多症或血浆渗透压异常时会出现误差。
高频考点14血细胞比容测定的参考值及临床意义
1.参考值①温氏法:
男性0.40~0.54;
女性0.37~0.47。
②微量法:
男性0.47±
0.04;
女性0.42±
0.05。
2.临床意义①增高:
大量呕吐、大手术后、腹泻、失血、大面积烧伤、真性红细胞增多症、继发性红细胞增多症等。
②减低:
各种贫血。
③输液评估:
是临床输血、输液治疗疗效观察的指标。
④计算平均值:
作为红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白浓度计算的基础数据。
高频考点15红细胞平均指数的检测原理
红细胞平均指数包括红细胞平均容积(MCV),红细胞平均血红蛋白含量(MCH)和红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)。
1.手工法通过红细胞计数、血红蛋白量和血细胞比容值计算红细胞平均指数。
fl)。
1)红细胞平均容积:
2.血液分析仪能直接导出MCV值,再结合直接测定的RBC和Hb,计算出MCH(=Hb/RBC)和MCHC(=MCH×
MCV)。
高频考点16红细胞平均指数的参考值和临床意义
参考值新生儿:
MCV91~112fl,MCH29~36pg,MCHC280~360g/L。
成人:
MCV80~100fl,MCH27~34pg,MCHC320~360g/L。
2.临床意义主要用于贫血形态学分类(见表1-1)。
表1-1贫血的红细胞形态学分类
贫血分类
MCV
MCH
MCHC
贫血
正细胞贫血
正常
再生障碍性、急性失血性贫血,某些溶血性贫血
大细胞贫血
增高
各种造血物质缺乏或利用不良的贫血
单纯小细胞贫血
减低
慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血
小细胞低血素贫血
缺铁性贫血及铁利用不良贫血,慢性失血性贫血
典型试题1(A1型题)某贫血患者的MCV增高、MCH增高、MCHC正常,属于(A)A.大细胞性贫血B.正常细胞性贫血C.单纯小细胞性贫血
D.小细胞低色素性贫血E.小细胞高色素性贫血
高频考点17红细胞体积分布宽度
红细胞体积分布宽度(RDW)反映样本中红细胞体积大小的异质程度,是评价红细胞体积的客观指标,常用变异系数(CV)表示。
由血液分析仪的红细胞体积直方图导出。
RDW比血涂片红细胞形态大小的观察更为准确。
RDW受样本中红细胞碎片、红细胞凝集、双相性红细胞的影响。
RDW的临床意义:
①贫血形态学分类的指标;
②缺铁性贫血(IDA)筛选诊断和疗效观察的指标;
③鉴别缺铁性贫血和-珠蛋白生成障碍性贫血。
高频考点18网织红细胞计数的检测原理
网织红细胞(Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,属于未完全成熟的红细胞,经活体染色(新亚甲蓝、煌焦油蓝、中性红等染料)后,呈深染的颗粒状或网状结构。
凡含两个以上的深染颗
粒或具有线网状结构的无核红细胞,即为网织红细胞。
。
①普通光学显微镜法:
在镜下计数1000个红细胞中网织红细胞的百分比或分数。
②网织细胞计数仪法和血液分析仪法:
用荧光染料(如吖啶橙、派若宁-Y、噻
唑橙)使网织红细胞内RNA着色,用流式细胞术(FCM)得到网织红细胞数。
典型试题2(A1型题)网织红细胞计数的染色方法是(C)
A.瑞氏染色B.碱性美蓝染液C.煌焦油蓝染液D.抗酸染色E.墨汁染色
高频考点19网织红细胞计数的方法学评价和质量控制
1.普通光学显微镜法试管法操作简便、重复性较好。
玻片法取血量少、染色时水分易蒸发,导致结果偏低。
显微镜法受主观因素影响较多,且耗时费力。
影响因素包括操作人员对网织红细胞的认识、血涂片质量、计数红细胞的数量、计数方法等。
Miller窥盘法计数网织红细胞可减少误差。
2.网织细胞计数仪法将Ret分成高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)3类,有助于化疗、放疗、移植患者的监测。
3.血液分析仪法网织红细胞成熟指数(RMI)=(MFR+HFR)/LFR×
100)。
测量细胞多、避免主观因素、方法易于标准化。
高频考点20网织红细胞计数的参考值
显微镜计数法:
成人0.008~0.02或(25~75)×
109/L,新生儿0.02~0.06。
器法:
男性RMI9.1%~32.2%,女性12.8%~33.7%。
高频考点21网织红细胞计数的临床意义
正常情况下,骨髓中网织红细胞均值为150×
1012/L,血液中为65×
109/L。
1.判断骨髓红细胞造血情况①增多:
见于溶血性贫血、放疗和化疗后;
②减少:
见于再生障碍性贫血
和溶血性贫血再障危象。
2.骨髓移植效果监测骨髓移植后第21天,Ret>
15×
109/L,表示无移植并发症;
15×
109/L,伴嗜中性
粒细胞和血小板增高,可能为骨髓移植失败。
3.网织红细胞生成指数(RPI)RPI是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。
Ret生存期限一般约2d,若未成熟网织红细胞提前释放入血,Ret生存期限将延长,为了纠正网织红细胞提前释放引起的偏差,用网织RPI来反映Ret生成速率。
高频考点22网织红细胞计数的操作方法
在2滴10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液中加血2滴,混匀,37℃放置15~20min,制片后,在油镜下计数至少1000个红细胞中网织红细胞数,计算网织红细胞百分数(%)和网织红细胞绝对值(×
109/L)(=红细胞
数×
网织红细胞百分数)。
WHO推荐使用的网织红细胞活体染液为新亚甲蓝。
典型试题3(A1型题)网织红细胞计数采用的染色方法是(C)
A.瑞氏染色B.吉姆萨染色C.煌焦油蓝染色D.HE染色E.碱性亚甲蓝染色
高频考点23点彩红细胞计数的原理和参考值
点彩红细胞是尚未完全成熟的红细胞在发育过程中受到损害,其胞质中残存变性RNA,染色后出现大小、形状不同的蓝色颗粒。
经碱性亚甲基蓝染色后,颗粒呈蓝色颗粒;
瑞氏染色后,颗粒呈蓝黑色。
在油镜下计数点彩红细胞数百分率。
参考值:
<0.03%。
高频考点24点彩红细胞计数的临床意义和操作方法
1.临床意义增高见于①中毒,如铅、汞、银、铋、硝基苯、苯胺等;
②各类贫血:
如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等。
2.操作方法取新鲜血1滴制片,用甲醇固定3min,以50g/L碱性亚甲蓝液染色1~2min,然后在油镜下计数1000个红细胞中点彩红细胞数,最后计算点彩红细胞数百分率。
高频考点25红细胞沉降率测定的原理和方法学评价
1.原理红细胞沉降率(ESR,血沉)指离体抗凝血静置后,红细胞在单位时间内沉降的速度。
分为缗
钱状红细胞形成期、快速沉降期和细胞堆积期(缓慢沉积期)。
2.方法学评价①手工法:
有魏氏法、潘氏法等。
魏氏法为ICSH推荐方法。
潘氏法与魏氏法相关性好、用血量少,适于儿童。
②血沉仪法:
仪器测量时间短、重复性好、不受环境温度影响。
③血沉率(ZSR):
不受年龄、性别、贫血、试验条件的影响,但需特殊离心仪器。
高频考点26红细胞沉降率测定的质量控制
1.影响红细胞缗
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