胚胎干细胞 (1).ppt
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胚胎干细胞 (1).ppt
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胚胎干细胞的特点及应用前景,胚胎干细胞的概念,胚胎干细胞又称ES细胞,是指胚泡期的内细胞团中分离出的尚未分化、能在体外培养、具有发育全能性的早期胚胎细胞。
ES细胞具有胚胎细胞和体细胞的某些特性,既可进行体外培养、扩增、转化和制作基因突变模型等操作,又保留了分化成包括生殖细胞在内的各种组织细胞的能力。
因此,具有无限增殖、自我更新和多向分化的潜能。
胚胎干细胞的生物学特性,全能性或多能性种系传递性体外遗传的可操作性无限增殖性,全能性或多能性,ES细胞具有发育的多潜能性,在体外可诱导分化出属于三个胚层的分化细胞。
若注射至同种同基因小鼠体内,可分化产生由多种不同组织组成的畸胎瘤。
种系传递性,ES细胞具有种系传递功能。
若把十几个ES细胞在体外注射至另一胚泡内,使之与受体胚胎细胞混合,再植入假孕受体鼠子宫,可发育获得嵌合体胚或鼠。
ES细胞可参与受体胚胎的各种器官组织并形成生殖细胞,后者称为种系传递。
体外遗传的可操作性,ES细胞在体外可以进行遗传操作,包括:
(1)导入报告或标志基因,或一个异源基因;
(2)加入额外的原有基因使之过表达(增加功能);(3)通过质粒DNA与染色体上有关基因序列发生同源重组剔除该基因,即基因打靶(失去功能)以及(4)诱导某个基因的突变。
无限增殖性,ES细胞具有无限增殖性。
胚胎干细胞在体外适宜条件下,能在未分化状态下无限增殖。
在所有从骨髓抽取的人类干细胞中,人类胚胎干细胞是唯一可以分化成身体上不同种类细胞,当中包括脑细胞和心脏细胞等高度分化、并缺乏再生能力的细胞。
胚胎干细胞的研究历史,1958年,Steven通过把小鼠早期胚胎移植到129小鼠精巢或肾脏被膜下得到了EC细胞。
1981年,英国剑桥大学的Evans和Kaufman用延缓着床的胚泡和美国加州大学旧金山分校的Martin用条件培养基分别成功地分离、体外培养了小鼠的ES,从此进入了胚胎干细胞培养建系的新纪元。
此后,人们建立了许多动物的ES细胞系。
1990年,Evans、Strojek及Piedrahila各自成功地建立了猪类ES细胞系。
1992年,Matsui等用小鼠原始生殖细胞首先建成EC细胞系,又开创了一种新的建立全能性(或多能性)细胞系的材料。
1994年,Robert用牛原始生殖细胞建成EC细胞系,证明了原始生殖细胞可以作为建立全能性(或多能性)细胞系的新型材料。
1995年Thomson等从恒河猴的胚囊中分离、建立了ES细胞株,这是第一个建株的灵长类动物的ES。
近年来,美国Wiscosin大学的Thomson和Hopkins大学的Gearhart分别用不同的方法成功的得到了几个人的ES细胞系,这一工作奠定了对人ES实验研究的基础。
1997年,Shims用猪原始生殖细胞建成EC细胞系,但是日前对猪全能性(或多能性)细胞系的研究,仍集中在ES细胞系的建立及传代问题上。
3、胚胎干细胞的应用前景,3.1细胞分化机制研究利用ES细胞体外培养技术,可不受干扰地对单一影响胚胎细胞分化的因子进行系统研究。
ES细胞在细胞分化研究中的主要作用是:
(1)研究饲养层抑制ES细胞分化的生理机制,这将有利于人们从基因转录、翻译等水平对细胞进行操作,定向改变细胞分化的方向。
(2)研究ES细胞的定向分化。
培养的ES细胞在去除分化抑制因素或添加诱导分化因子后就会发生定向分化,形成某种类型组织细Thomas研究发现,体外培养的ES细胞能自行向内脏卵黄囊、血岛及心肌细胞定向分化。
Smith等实验证明胚细胞在不含分化抑制物的培养基中能分化形成中胚层;当ES细胞在禽DIA和维生素A酸的培养基中,则分化形成体壁内胚层。
3、胚胎干细胞的应用前景,3.2育种和良种繁殖首先,可以生产克隆动物,大幅度提高良种家畜的繁殖效率,加速动物良种化进程。
其次,可以拯救濒危物种,保存稀有动物遗传资源。
再次,利用异种动物细胞核移植和异种动物胚胎嵌合的方法可获得具有新性状的克隆动物或异种动物的嵌合体,可以克服种间繁殖障碍,创造新物种。
另外,利用细胞核移植技术可以同时克隆遗传基础完全相同的生物个体。
这些生物个体可用于遗传参数的估测,饲料营养价值的评定以及环境与动物关系的研究等领域。
3、胚胎干细胞的应用前景,3.3特异性分化细胞系的建立胚胎干细胞的优势首先体现在它的多向性或全能性分化能力上。
目前,人们正致力于人类胚胎干细胞的识别、分离、体外培养扩增与分化诱导工作。
包括对其它来源的干细胞,如造血干细胞、间质干细胞以及神经干细胞等的研究。
以期最终解决目前临床上难以解决的治疗问题。
3、胚胎干细胞的应用前景,3.4器官移植在适度的控制条件下,胚胎干细胞可在体外培养体系中形成各种人体组织,甚至人体器官。
干细胞技术的理想阶段就是希望在体外进行器官克隆以供病人移植。
3、胚胎干细胞的应用前景,3.5基因治疗研究胚胎干细胞可用于基因治疗研究,或者说与基因治疗技术结合起来而为人类健康服务。
3、胚胎干细胞的应用前景,3.6在寻找新药方面的应用在传统寻找新药时,常用原代细胞、修饰过的肿瘤细胞或转基因细胞。
与原代细胞或修饰过的细胞相比,干细胞具有很多优点:
基因正常,有独特的生理反应,可长期培养、扩增,因而哺乳动物干细胞技术的应用为在细胞水平评估药物作用的靶细胞及一些新的治疗方法效果提供了新的机会。
3、胚胎干细胞的应用前景,3.7新基因开发与基因功能分析对小鼠ESC基因进行目的性操作,实现了哺乳动物基因功能性研究的重大突破,确定了许多基因在正常生长发育和生理过程中的功能及在疾病发生中的作用。
通过与基因打靶技术相结合,对hESC进行基因重组特定基因删除或突变有助于人类基因功能研究,还可建立某些更为适宜的人类疾病模型进行药物筛选。
4、面临的问题,4.1ESCs细胞分化从理论上讲,ESCs细胞具全能性,可获得一种我们需要的细胞,但实际工作的进展却很慢。
细胞分化是多种细胞因子相互作用引起细胞一系列的生理生化反应的过程,必须了解各种因子的具体作用和作用时间,才能得到产生某种特异类型的分化细胞,且抑制分化因子的剂量需进一步研究。
4、面临的问题,4.2ESCs细胞移植后细胞存活和畸胎瘤的问题小鼠ESCs细胞注入成鼠皮下可形成畸胎瘤,目前对形成畸胎瘤所需ESCs细胞的最少数量及最短时间还无定论。
人ESCs细胞也具有相似特性。
为防止畸胎瘤,应对ESCs进行细胞选择,排除多余多能干细胞的影响。
4、面临的问题,4.3社会伦理问题由于胚胎干细胞的研究涉及生命的定义和来源,因此受到宗教界等相关人士伦理道德方面的争议。
然而,人类干细胞方面的研究进展及其与克隆技术结合在治疗人类某些疾病上的应用前景,促使美国政府放松了对人类胚胎干细胞研究的限制。
美国总统奥巴马在竞选中曾承诺,将取消目前关于利用人类胚胎干细胞作研究的行政禁令。
英国政府也在考虑放宽对人类克隆的限制,允许治疗性克隆,禁止繁殖性克隆。
5、总结,总之,目前胚胎干细胞的研究已经取得了巨大的成就,但是,将胚胎干细胞应用于临床,还需要人类的大量的工作,这个领域的技术突破将推动生命科学的巨大前进,只有一些关键性问题的解决才能使胚胎干细胞研究的价值真正得到体现。
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