遗传学实验指导.docx
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遗传学实验指导
遗传学实验指导
实验须知
一、实验课的目的
1.培养锻炼科学的思维方法,实事求是的科学态度和严格的科学作风,提高分析问题解决问题的能力。
2.通过实验加深对理论知识的理解,学习掌握基本的实验技术和实验技能,为今后学习和研究打下一定的基础。
。
3.培养学生爱好公物,爱护集体,团结互助的优良道德品质。
二、实验课要求
1.课前必须预习,了解基本原理和主要步骤及意义,写出预习报告。
2.上课必须穿白大褂,带实验讲义和实验报告纸。
3.遵守实验室制度,注意安全(水、电、暖、强酸、强碱、有毒物质等)。
4.实验中要正规操作,动手动脑主动进行实验;掌握关键,力求得出准确结果;仔细观察,认真思考,及时做好记录;综合分析得出正确的结果。
5.在实验过程中不诉大声喧哗,有问题及时请教老师或同学。
6.器材、药品等按规定使用,严禁乱用乱放。
7.爱护仪器,在实验过程中因个人未能安实验要求操作而导致的器材损坏,按规章制度进行赔偿。
8.实验结束后,相关器材要彻底清洗干净,放到指定原位。
9.废弃物按要求分类收集、处理。
10.值日生要打扫干净实验台、地面,并负责关好门窗、检查水、电等。
11.因故不能上实验者应有请假手续。
实验1植物染色体压片技术
一、实验原理
植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。
二、实验目的
学习植物材料的固定方法和常规压片技术;观察染色体的动态变化。
三、实验材料
洋葱(Aillumcepa)根尖
四、实验器具和药品
1.用具:
染色板,载玻片,盖玻片,指管,温度计,试剂瓶,滴瓶,镊子,解剖针,毛边纸。
2.药品:
无水酒精,70%酒精,冰醋酸,对二氯苯或秋水仙素,醋酸钠,碱性品红,石炭酸,甲醛,山梨醇,二甲苯。
a卡诺固定液的配制:
用3份无水酒精,加入1份冰醋酸(现配现用)。
b染色液的配制:
配方Ⅰ.石炭酸品红(Carbol.fuchsin),先配母液A和B。
母液A:
称取3g碱性品红,溶解于100mL的70%酒精中(此液可长期保存)。
母液B:
取母液A10mL,加入90mL的5%石炭酸水溶液(2周内使用)。
石炭酸品红染色液:
取母液B45mL,加入6mL冰醋酸和6mL37%的甲醛。
此染色液含有较多的甲醛,在植物原生质体培养过程中,观察核分裂比较适宜,后来在此基础上,加以改良的配方Ⅱ,称改良石炭酸品红,可以普遍应用于植物染色体的压片技术。
配方Ⅱ:
改良石炭酸品红。
取配方Ⅰ石炭酸品红染色液2-10ml,加入90-98ml45%的醋酸和1.8g山梨醇(sorbitol)。
此染色液初配好时颜色较浅,放置二周后,染色能力显著增强,在室温下不产生沉淀而较稳定。
1NHcl:
浓HCl82.5ml→1000ml
五、实验说明
1.有丝分裂主要发生在根尖、茎生长点及幼叶等部位的分生组织,根尖取材容易,操作和鉴定方便。
根尖由于取材方便,是观察植物染色体最常用的材料,有些植物种子难以发芽,或仅有植株而无种子,也可以用茎尖作为材料;
2.植物细胞分裂周期的长短不尽相同,通常在十到几十小时之间,温度明显地影响分裂周期,对于一个不太熟悉的实验材料,最好在特定温度下长根,掌握有丝分裂高峰期,以便得到更多的有丝分裂的细胞。
3.预处理是降低细胞质的粘度,使染色体缩短分散,防止纺锤体形成,让更多的细胞处于分裂中期。
预处理的方法有低温预处理和药物预处理。
(1)低温预处理将材料浸在蒸馏水中,放在1-4℃冰箱内离体处理24h。
此法效果很好,对染色体无破坏作用,染色体缩短均匀,简便易行,各种作物都适用。
(2)药物预处理:
①0.05-0.2%秋水仙素溶液与室温下处理2-4h,对抑制纺锤体活动效果明显,易获得较多的中期分裂相,且染色体收缩较直,有利于染色体结构的研究。
②饱和对二氯苯溶液室温下处理3-5h,对阻止纺锤体活动和缩短染色体效果也较好,但对染色体小而多的植物来说不利于染色体的计数。
③0.002-0.00mol/L8-羟基喹啉18℃条件下处理5-6h,可以引起细胞粘度的改变,导致纺锤体活动受阻,使中期染色体在赤道面上保持相应的排列位置。
缢痕区也较为清晰。
一般认为对中等或长染色体的植物较合适。
④70ppm放线菌酮和250ppm8-羟基喹啉的混合液于25℃条件下,根尖不离体处理5h,可获得大量的分裂相,是最值得首选的预处理方法。
4.固定是将新鲜的活组织从生物体取下后,立即投入固定剂中,借助化学药品的作用,使细胞保持原有形态、结构的一种手段。
其目的是:
(1)迅速防止细胞死亡后的变化,防止自溶、腐败,尽量保持生长状态结构;
(2)使细胞中的蛋白质、脂肪、糖、酶等成分转变为不溶性物质,以保持生前的形态;(3)使组织内各种物质成分产生不同的折光率,便于观察和鉴定;(4)使不同组织成分对染料有不同的亲和力,便于染色;(5)防止细胞过度收缩或膨胀,失去原有的形态结构。
常用的固定液有:
酒精、甲醛水溶液、冰醋酸(0.3-0.5)、AF液(90ml乙醇+10ml甲醛用于固定大块组织)、卡诺氏固定液(冰醋酸:
氯仿:
无水乙醇=1:
3:
6)、改良卡诺氏固定液(冰醋酸:
无水乙醇=1:
3)等。
固定液用量:
组织块体积的20倍。
5.解离的目的是使分生组织细胞间的果胶质分解,细胞壁软化或部分分解,使细胞和染色体容易分散压平,解离方法有酸解法和酶解法。
(1)酸解法是用盐酸水解根尖,步骤简便、容易掌握,广泛应用于染色体计数、核型分析和染色体畸变的观察。
根尖分生组织细胞的染色体还包在细胞壁中间。
(2)酶解法常用于染色体显带技术或姊妹染色单体交换等项研究,通过解离和压片,使分生细胞的原生质体,能够从细胞壁里压出,再经过精心的压片,使染色体周围不带有细胞质或仅有小量细胞质,致使多项制片措施直接作用于染色体。
6.压片时必需掌握以下几点:
⑴压片材料要少,避免细胞紧贴在一起,致使细胞和染色体没有伸展的余地。
⑵用铅笔的橡皮头或小镊子的柄端轻敲盖玻片,使材料均匀分散,然后压片。
压片时用力要适当,不要移动盖玻片。
7.染色的原理是染料通过毛细作用或渗透作用进入组织内部;组织吸附染料;染料进入细胞,由于吸收作用而留在细胞内部。
染料分为碱性染料(苏木精、卡红、醋酸洋红、碱性品红等)和酸性染料(伊红Y、刚果红、苦味酸、酸性品红)两种,碱性染料染细胞核;酸性染料染细胞质。
六、实验步骤
流程:
固定好的根尖→水洗2-3次→1NHCl7-8min→水洗2-3次→取材(1/2分生区)→切碎→染色6-7min→加盖玻片→轻敲→压片→观察。
1.材料准备
将洋葱放在加满水的广口瓶上,使其根茎部接触水面,然后转移到25-28℃的条件下培养。
待根尖长到2cm左右使,在上午9-10点剪取根尖备用。
2.预处理
用0.1%或0.02%秋水仙素溶液中,浸泡处理3-4小时。
3.固定
经过前处理的根尖放到卡诺固定液中,固定24小时。
转入70%酒精中,在4℃冰箱中保存待用,保存时间最好不超过二个月。
4.解离
酸解:
从固定液中取出洋葱根尖,用蒸馏水漂洗,放入1NHCl或酸解液(浓盐酸:
95%乙醇=1:
1)中,在60℃水浴中,解离8-10分钟,用蒸馏水漂洗后,放在上,加上培养皿中。
5.压片
把根尖放在清洁的载玻片上,用解剖针把根冠及延长区部分剪去,加少量染色液(几滴),染色10-20分钟,盖上盖玻片。
用镊子尖轻轻的敲打盖玻片,分生组织细胞就可铺展成薄薄的一层,再用毛边纸把多余的染色液吸干。
6.显微镜观察
低倍镜下找到分生区细胞,其特点为等直径细胞。
细胞质浓厚,细胞核较大,占细胞体积的3/4。
可以观察到有丝分裂过程中不同分裂时期的染色体。
选取不同分裂时期的典型细胞,换高倍镜观察,注意细胞核染色体及纺锤体的变化动态。
7.封片。
把压好的玻片标本,放在干冰或冰箱结冰器时冻结。
然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片分开,用电吹风把玻片吹干后,滴上油派胶,加上盖玻片和载玻片封片,或经二甲苯透明后,滴中性树胶,加盖玻片封片,做成永久封片。
七、作业:
1.制作具有丝分裂图像的细胞学片子1-2张。
2.经实验观察,洋葱有多少条染色体?
3.绘制两种不同的有丝分裂分裂相。
八.讨论
1.经实验观察,洋葱有16条染色体。
2.显微镜下观察到的洋葱细胞大多处于细胞分裂间期,原因是细胞分裂周期中间期维持时间较长,所以固定细胞时处于间期的细胞数量最多。
3.由于压片角度不同,处于分裂中期的细胞纺锤丝较难观察,染色体表现为充满整个细胞。
分裂前期细胞染色体呈丝状,非棒状,充满整个细胞。
处于后期及末期的细胞染色体明显分成两部分。
4.显微镜下观察到的某些细胞核中有明显的两种颜色,为染色不均匀造成,而非处于细胞分裂后期。
实验2果蝇的饲养管理和性状观察
一、实验原理
果蝇(Drosophilamelanogester)双翅目,果蝇属。
具完全变态。
果蝇在20~25℃时,每12天左右可完成一个世代,生活史较短;繁殖能力强,每只受精的雌果蝇可产卵400~500个。
培养果蝇的饲料来源广泛,价格便宜;果蝇常温下就可生长繁育,饲养容易;不同形态的突变型多达400个以上,便于观察分析;且染色体数目较少(2n=8),加之其唾腺染色体巨大,因此是遗传学研究中常用的实验材料。
二、实验目的
了解果蝇的生活史,学会饲养果蝇;能够辨别果蝇雌雄性别及常见突变型;掌握实验中的处理方法和技术。
三、实验材料
果蝇野生型品系:
红眼、直刚毛、长翅、灰体(++、++、++、++)。
果蝇突变型品系:
1.白眼、卷刚毛、小形翅(ww、sn3sn3、mm)
2.长翅、黑檀体(++、ee)
3.残翅、灰体(vgvg、++)
4.白眼、灰体(ww、++)
四、实验用具药品
1.仪器用具:
双目解剖镜、恒温箱、高压灭菌锅、天平、放大镜、培养瓶、白瓷板、镊子、纱布、吸水纸、牛皮纸、毛笔、油性笔。
2.原料:
玉米粉、酵母粉、蔗糖、琼脂、蒸馏水。
3.药品:
乙醚、70%酒精、丙酸
五、实验步骤
1.果蝇培养基的制备
⑴带瓶塞三角瓶灭菌备用
⑵玉米培养基配方(1000ml):
表1果蝇培养基配方
玉米面
红糖
琼脂
干酵母
正丙酸
85g
65g
8.5g
7g
5ml
⑶⑶水溶琼脂→加红糖→加搅好的玉米面→煮沸→加水到1000ml→冷却→50℃左右加入酵母粉→加入正丙酸(防腐剂)。
2.果蝇操作
⑴麻醉
取一麻醉瓶,瓶口应与培养瓶大小相仿,取一棉花塞,在塞入瓶口的一面滴加3滴乙醚,将果蝇转入麻醉瓶内,翻转麻醉瓶使其瓶口朝上,迅速将滴有适量乙醚的棉塞盖住麻醉瓶口,约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底,即可将果蝇倒出进行操作。
注意:
过度麻醉将导致果蝇死亡。
⑵搬移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶
取新培养瓶一瓶,将棉塞略为松动,放置于右手侧,取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧,以左手握住瓶颈,两指轻扣棉塞顶部,以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面,将培养瓶置于左手侧,拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端,再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起,以右手两指夹住棉塞外端,再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上,再以左手握住两瓶口相接处,翻转使新培养瓶位于下方,然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底,使果蝇掉落于新培养瓶瓶底,然后迅速盖上各瓶棉塞。
⑶杂交试验
为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死,可将培养瓶横放,将麻醉的果蝇倒于瓶壁,待其苏醒后再将培养瓶正立。
⑷果蝇计数
取一张白纸,沿对角线对折然后展平,平置于桌面,将麻醉之果蝇倒于对角线折痕上,以尺、毛笔或解剖针拨弄果蝇使其均匀分散于对角线折痕上,然后沿对角线将雌雄果蝇分类拨入各侧。
3.果蝇生活史的观察
图1.果蝇的生活史
1.卵2.一龄幼虫3.二龄幼虫4.三龄幼虫5.蛹6.成虫
果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。
30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡,低温则使它的生活周期延长,同时生活力也降低,果蝇培养的最适温度为20-25℃。
表2果蝇生活周期长短与温度的关系
10℃
15℃
20℃
25℃
卵幼虫
8天
5天
幼虫成虫
57天
18天
6.3天
4.2天
从表中可以看出,25℃时,从卵到成虫约10天;在25℃时成虫约活15天。
卵:
羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配,两天后才能产卵。
卵长0.5mm,为椭圆形,腹面稍扁平,在背面的前断伸出一对触丝,它能使卵附着在食物(或瓶壁)上,不致深陷到食物中去。
幼虫:
从卵孵化出来后,经过两次蜕皮,发育成三龄幼虫,此时体长可达4-5mm。
肉眼可见其前端稍尖部分为头部,上有一黑色斑点即为口器。
口器后面有一对透明的唾液腺,透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧,精巢较大,外观上是一明显的黑点,而卵巢则较小,可以此作为鉴别。
幼虫活动力强而贪食,它们在培养基上爬行时,留下很多条沟,沟多而且宽时,表明幼虫生长良好。
蛹:
幼虫生活7-8天准备化蛹,化蛹前从培养基上爬出,附着在瓶壁上,逐渐形成一梭形的蛹.在蛹前部有两个呼吸孔,后部有尾芽,起初蛹壳颜色淡黄而柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,表明即将羽化了。
成虫:
幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化,最后从蛹壳前端爬出。
刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长,翅膀尚未展开,体表尚未完全几丁质化,故呈半透明的乳白色。
透过腹部体壁,可以看到黑色的消化系统。
不久,变为短粗圆形,双翅展开。
体色加深。
如野生型初为浅灰色,然后呈灰褐色。
4.果蝇成虫形态特征观察
⑴果蝇成虫分为头、胸、腹三部分
⑵头部有一对大的复眼,三个单眼和一对触角。
⑶胸部有三对足,一对翅和一对平衡棒。
⑷腹部背面有黑色环纹,腹面有腹片,外生殖器位于腹面末端,全身有许多体毛和刚毛。
5.果蝇几种突变类型的观察
表3果蝇常见突变形状特征
突变形状名称
基因符号
形状特征
所在染色体
白眼
w
复眼白色
X
棒眼
B
复眼横条形
X
檀黑体
e
体呈乌木色,黑亮
R
黑体
b
体呈深色
L
黄身
y
体呈浅橙黄色
X
残翅
vg
翅退化,部分残留不能飞
R
焦刚毛
sn
刚毛卷曲如烧焦状
X
小翅
m
翅较短
X
6.雌雄性果蝇鉴别
表4雌雄果蝇形态学特征
区别
雌果蝇
雄果蝇
体形
个体较大
个体较小
腹部末端
腹部末端较尖
腹部末端较钝
腹部背面黑色条纹数
腹部背面有五条黑条纹
腹部背面有三条黑条纹,最后一条极宽,并延伸到腹面
第一对足跗节前端性梳有无
外生殖器较简单,有阴道板和肛上板等结构
外生殖器较复杂,有生殖弧、肛上板、阴茎等结构
腹部腹面腹片数
腹部腹面有6个腹片
腹部腹面有4个腹片
外生殖器结构
无性梳
前腿跗节上有性梳
图2.雌雄果蝇形态特征图
7、果蝇的性别决定
⑴染色体组成果蝇为二倍体2n=8,
雌雄基因平衡理论:
对果蝇而言,X染色体上有决定雌性的基因,常染色体上有决定雄性的基因存在,其比值决定果蝇的雌或雄,Y染色体只与育性有关,而与性别无关。
⑵果蝇的性别决定
果蝇的性别决定为XY型,Y染色体在性别决定上不起作用,只与育性有关。
含有Y染色体,可产生正常的配子,不含Y染色体,则配子不育。
性别决定与性比值(性指数)有关。
X/A=1则为雌性;X/A=0.5则为雄性。
X/A>1,为超雌;X/A<0.5,则为超雄;0.5<X/A<1则为中间性。
雌雄基因平衡理论:
果蝇X染色体上有很多雌性基因,常染色体上有很多雄性基因,Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因,因此性别决定于基因的平衡。
⑶果蝇的连锁群
X染色体上有141个基因;第2染色体上有228个基因;第3染色体上有156个基因;第4染色体上有12个基因。
⑷同源染色体:
来源相同、结构相似、控制的形状相同,在减数分裂中配对的一对染色体。
8、果蝇饲养:
分别挑取5对野生果蝇和5对白眼果蝇到空瓶中饲养,贴上标签,写明组合、日期、实验者姓名。
饲养两周后供下次实验使用
八、作业
1.你如何能准确鉴定果蝇的雌雄个体?
要领是什么?
2.果蝇的生活史分几个阶段?
,你所观察到的不同类型的果蝇在整个生活史阶段有什么差异?
3.配制果蝇培养基时应注意什么问题?
4.将野生型和几种突变型性状观察的结果填表。
5.每组配制4~6瓶果蝇培养基。
实验3果蝇的两对因子的自由组合
一、实验原理
遗传规律验证:
位于非同源染色体上的两对等位基因,其杂合体在形成配子时,等位基因间必然按分离定律分离进入不同的配子,而非等位基因问则可自由组合进入同一配子,这样分配的结果就是:
产生4种基因型的配子,且每种类型产生的概率相等。
在杂合体自交产生的n代中就表现出9种基因型.若显性完全,就表现出4种表现型,a表型比为9:
3:
3:
1,这就是基因自由组合定律。
果蝇的灰体(E)与黑檀体(e)为一对相对性状,决定这对性状的基四位于第Ⅲ染色体上;长翅(Vg)与残翅(vg)为另一对相对性状,决定这对性状的基因位于第Ⅱ染色体上。
本实验将探讨这两对性状的遗传规律。
卡方检验:
卡方检验(Chi-squaretest)可以用来验证离散样本的实测值与理论值间的差异是否可以解释为抽样随机差异[2]。
在应用于遗传定律的验证时,首先应确定自由度f,建立无效假设(NullHypothesis,在此应用中为实测值与理论值之间没有真实差异,实验结果所得的差异是误差所致),计算卡方值,并查找在相应自由度下该计算出的卡方值在多大程度上可以支持无效假设。
处女蝇:
雌性果蝇有个特殊的结构为储精囊,经历过交配的雌果蝇会储存精子以备后续产卵。
因此如果希望杂交得到的后代均来自某特定雄蝇的后代,在杂交前就应挑选处女蝇杂交。
一般来说,刚羽化出来的果蝇在8-12小时之内仍在发育,不进行交配,所以在这段时间内新羽化的雌蝇均为处女蝇。
为了保险起见,一般选择8小时内孵出的果蝇。
二、实验目的
进一步认识二对基因自由组合的原理;巩固和提高利用统计学方法处理实验数据的能力;学会选择二对基因进行遗传杂交;能够准确筛选出处女蝇;能够根据实验安排进行双因子遗传实验的操作。
三、实验材料
黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)的两个品系:
灰体残翅(EEvgvg)(残翅基因vg位于第二染色体)
黑檀体长翅(eeVgVg)(黑檀体基因e位于第三染色体)
四、仪器设备
立体解剖镜,恒温培养箱,天平,培养瓶及麻醉瓶,毛笔及白瓷板。
五、药品试剂
乙醚,玉米粉,琼脂,红糖,酵母粉,丙酸。
六、实验步骤
1.选灰体残翅果蝇为母本,黑檀体长翅为父本(反交也可,但因残翅果蝇不能飞,只能爬行,用做母本比较好)。
雌蝇一定要选处女蝇,可在实验前2~3d陆续收集,雌、雄个体分开培养,数目多少根据需要而定。
2.首先把灰体残翅处女蝇倒出麻醉,挑5只移到水平放置的杂交瓶中,再把黑檀体长翅倒出麻醉,挑选5只雄蝇,移到上述述杂交瓶中。
等杂交亲本在杂交瓶中全部苏醒后,将杂交瓶直立,并移入25℃温箱中培养。
注意贴好标签(写明亲本基因型、交配方式、杂交日期、实验者姓名)。
3.7d后,释放杂交亲本。
4.再过4~5d,F1成蝇开始出现,观察F1性状,连续检查2~3d,或在释放亲本7d后集中观察。
5.选取5~10对F1雌、雄果蝇,移人一新培养瓶(这里不需用处女蝇),置25℃温箱中培养。
6.7d后,释放F1亲本。
7.再过4~5d,F2成蝇出现,开始观察。
可连续统计7~8d。
被统计过的果蝇倒入水槽冲掉。
七、实验说明
八、作业
1.观察并统计几代的表型及个体数,分析相对性状间的显隐性关系。
2.观察并统计F1(多于30只)代的表型及各种表型的个数,特别要注意新性状组合个体的出现。
计算F2(多于50只)不同表型个体数的比例,确定这两对基因的遗传规律。
(做X2测验,看其是否符合遗传规律)
3.基因间发生自由组合的前提是什么?
4.如何判断两个基因是连锁遗传还是自由组合?
实验4果蝇的伴性遗传
一、实验原理
生物体有些性状是伴随性别一起遗传的,他们遵循自身的遗传规律,由于和性别有关,因此称为伴性遗传方式。
在果蝇的身体中,眼色红白眼是一对伴随X染色体遗传的基因,他们的遗传和果蝇的性别有关,本实验通过果蝇杂交实验,旨在验证伴性遗传的规律。
二、实验目的:
进一步掌握伴性遗传的规律和特点;正确认识伴性遗传与常染色体遗传的差别;能够准确筛选出处女蝇;能够根据实验安排进行伴性遗传实验的操作。
材料和方法
三、实验材料:
黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)野生型和突变型品系
双筒解剖镜,大指管,麻醉瓶,磁板,海绵板,解剖针,毛笔,镊子。
四、实验步骤
1.收集雌果蝇品系的处女蝇。
由于雌蝇生殖器官中有贮精事囊,一次交配可保留大量精子,供多次排 精用,因此做杂交实验前必须收集未交配的处女蝇。
由于孵化出的蝇在12小时内(更可靠是8小时)不交尾,因此必须在这段时间内把♀、♂蝇分开培养,所得的♀蝇即为处女蝇。
2.准备好培养基,把已麻醉的红眼♀、♂果蝇和白眼♀、♂果蝇,按正、反交方式,分别放入不同培养瓶内,进行杂交,贴好标签,标签形式如下:
3.6-7天后,见到有F1幼虫出现,可除去亲本(除干净!
)。
4.再过3-4天,观察F1成蝇的性状。
5.所出现的F1 ♀、♂果蝇麻醉后,挑3-5对蝇换入新的里头基继续饲养(眦处无需处女蝇)。
两组合后代不能混合,应分别培养。
6.6-7天后又需除F1亲本果蝇。
7.再过3-4天,F2代成蝇出现,麻醉后倒在白瓷板上观察眼色和性别,进行统计。
(当F3出现就失去意义了)。
8.每隔1-2天统计一次,累积6-7天数据。
五、作业
1.完成F2数据统计表;根据统计结果做χ2检验,并对检验结果做解释。
观察结果
各类果蝇的数目
红眼♂(+)
白眼♂(w)
红眼♀(+)
白眼♀(w)
实验观察数
预期数(3:
1)(C)
偏差(O-C)
(O-C)2/C
2.总结伴性遗传的特点。
3.假设控制红白眼色的基因位于常染色体上,那么,正反交的结果又将如何呢?
实验 五人类X染色质的制备与观察
一、实验原理
1.发现
1949年,加拿大学者Barr等人在雌猫的神经元细胞核中首次发现一种染色较深的浓缩小体,而在雄猫则没有这种结构。
进一步研究发现,除猫外,其他雌性哺乳动物(包括人类)也同样有这种显示性别差异的结构。
而且不仅是神经元细胞,在其他细胞的间期核中也可以见到这一结构。
称之为巴氏小体,也称为X染色质。
正常女性的间期细胞核中紧贴核膜内缘有一个染色较深,大小约为1微米的三角形或椭圆形小体,即X染色质。
间期核内X染色质的数目总是比X染色体的数目少1。
正常女性有两条X染色体,因此只有一个X染色质;若有三条X染色体,就会有两个X染色质,余此类推。
正常男性只有一条X染色体,所以没有X染色质。
2.莱昂假说
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