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普通生物化学习题集
第三章:
氨基酸、肽类、蛋白质化学
一、填充题
1组成蛋白质氨基酸的结构通式是()。
2具有紫外吸收能力的氨基酸有()、()和(),其中以()的吸收最强。
3脯氨酸是()氨基酸,与茚三酮反应生成()色物质。
4()和()是相对分子质量小且不含硫的氨基酸,在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。
5范斯莱克(VanSlyke)法测定氨基氮主要利用()与()作用生成()。
6实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应,然后用碱来滴定()上放出的()。
7赖氨酸带三个解离基团,它们的pK分别为2.18,8.95及10.53。
赖氨酸的等电点为()。
8肽链的N末端可以用()法、()法、()法和()法测定,而()法和()法是测定C末端氨基酸最常用的方法。
)。
9蛋白质分子的α-螺旋结构,每圈螺旋包含()个氨基酸残基,螺距为()nm,每个氨基酸残基沿轴上升高度为()nm。
天然蛋白质分子中的α-螺旋大多属于()手螺旋。
二、是非题
1某化合物和茚三酮反应呈蓝紫色,因而可以断定它是氨基酸或是蛋白质。
()
2亮氨酸疏水性比缬氨酸强。
()
3氨基酸在水溶液或在晶体状态时都以两性离子形式存在。
()
4合成的多聚谷氨酸在pH7时,其γ-羧基电离为-COO-,由于静电相斥,分子较松散,在pH4时并不电离,容易形成螺旋结构。
()
5溶液的pH可以影响氨基酸的pI值。
()
6组氨酸是人体的一种半必需氨基酸。
()
7蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变。
()
8二硫键和蛋白质的三级结构密切有关,因此没有二硫键的蛋白质就没有三级结构。
()
9凝胶过滤法可用于测定蛋白质的分子量,分子量小的蛋白质先流出柱,分子量大的后流出柱。
()
10蛋白质在小于等电点的pH溶液中,向阳极移动,而在大于等电点的pH溶液中,将向阴极移动。
()
三、选择题
1下列哪种氨基酸溶液不能引起偏振光的旋转()
A丙氨酸B甘氨酸C亮氨酸D丝氨酸
2下列氨基酸在生理pH范围内缓冲能量最大的是()
AGlyBHisCCysDAsp
3分子中含有两个不对称碳原子的氨基酸是()
AProBTyrCThrDArg
4氨基酸不具有的化学反应是()
A双缩脲反应B茚三酮反应CDNFB反应DPITC反应
5用纸层析分离丙氨酸、亮氨酸和赖氨酸的混合物,则它们之间Rf的关系应为()
AAla>Leu>LysBLys>Ala>Leu
CLeu>Ala>LysDLeu>Lys>Ala
7下列哪种氨基酸有米伦(Millon)反应()
ATrpBTyrCPheDArg
8Pauly试剂是将对氨基苯磺酸的重氮化合物喷洒到滤纸上,定性检测蛋白质的试剂,在蛋白质的地方显橘红色。
它的生色反应是发生在蛋白质内的()
A色氨酸的吲哚环B半胱氨酸的巯基
C组氨酸的α氨基D酪氨酸的酚羟基
9在组蛋白的组氨酸侧链上进行()以调节其生物功能。
A磷酸化B糖基化C乙酰化D羟基化
11如果要测定一个小肽的氨基酸顺序,下列试剂中选择一个你认为最合适的()
A茚三酮BCNBrC胰蛋白酶D异硫氰酸苯酯
13蛋白质可与碱共热水解,虽然这个过程会破坏一些氨基酸,但它却被常用来定量蛋白质的()
ASerBCysCThrDTrp
14在pH7的水溶液里,在典型的球状蛋白分子中,处于分子的内部的氨基酸残基经常是()
AGluBPheCThrDAsn
16胰蛋白酶专一水解多肽键中()
A碱性残基N端B酸性残基N端
C碱性残基C端D酸性残基C端
17羧肽酶C专门水解C端倒数第二位是哪个氨基酸形成的肽链()
AArgBLysCCysDPro
18下列蛋白质中,()不是糖蛋白
A免疫球蛋白B溶菌酶C转铁蛋白D胶原蛋白
19血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于()
AO2分压的减少BCO2分压的减少
CCO2分压的增加DpH值的增加
20SDS凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量是根据各种蛋白质()
A在一定pH值下所带净电荷的不同
B分子大小不同C分子极性不同
D溶解度不同
四、问答及计算题
1试命名下列氨基酸(均存在于蛋白质中)
(1)用强酸或强碱处理能转变成存在于蛋白质中的另一种氨基酸。
(2)空气中即可氧化为存在于蛋白质中的另一种氨基酸。
(3)能在279nm强烈吸收紫外光,易为强酸所破坏。
(4)在pH6~pH8内有缓冲能力。
(5)与茚三酮反应生成一种黄色产物。
(6)其水溶液无旋光性。
2分析下列4个肽的混合物,在Dowex-1(一种阴离子交换树脂)的离子交换柱上以从pH10→1.0连续变化的缓冲系统作洗脱,试说出每种肽洗脱的相对次序。
A赖-甘-丙-甘B赖-甘-丙-谷
C谷-甘-丙-谷D组-甘-丙-谷
3某一条肽经酸水解组成分析含5种氨基酸,其N端非常容易环化。
经CNBr处理后得一游离碱性氨基酸,Pauly反应阳性。
若用胰蛋白酶作用则得两个肽段;其一为坂口反应阳性,另一在280nm有强的光吸收,并呈Millon氏阳性反应。
求此肽段氨基酸排列顺序,并指出它的等电点应该是大于、等于或小于pH7。
4蛋白质化学中常用的试剂有下列一些:
CNBr,尿素,β-巯基乙醇,胰蛋白酶,过甲酸,丹磺酰氯,6mol/LHCl,茚三酮,异硫氰酸苯酯和胰凝乳蛋白酶等。
为完成下列各项试验,请回答每项的最适试剂是什么?
(1)一个小肽的氨基酸顺序的测定
(2)多肽链的氨基末端的测定
(3)一个没有二硫键的蛋白质的可逆变性
(4)芳香族氨基酸残基的羧基一侧肽键的水解
(5)甲硫氨酸的羧基一侧肽键的裂解
(6)通过氧化途径将二硫键打开
参考答案
二、是非题
1错2对3对4对5错6对7对8错9错10错11错12错13对14对15错16对17错18对19错20对21错22错23错24对25对26错27对28对29错30错
三、选择题
1B2B3C4A5C6C7B8D9A10C11D12A13D14B15C16C17D18B19C20B21B22D23D24A25C26D27A28B29C30A31B32A33D34A35D
四、问答及计算题
1
(1)谷氨酰胺或天冬酰胺
(2)半胱氨酸(3)色氨酸(4)组氨酸(5)脯氨酸(6)甘氨酸
24个肽被洗脱下来的先合顺序依次为A→B→D→C。
3该五肽的顺序为:
谷氨酰-精氨酰-酪氨酰-甲硫氨酰-组氨酰。
此肽段的等电点大于7。
4
(1)异硫氰酸苯酯
(2)丹磺酰氯(3)尿素(4)胰凝乳蛋白酶(5)CNBr(6)过甲酸。
第三章:
酶化学
一、填充题
1全酶是由()和()组成,在催化反应时,二者所起的作用不同,其中()决定酶的专一性和高效率,()起传递电子、原子或化学基团的作用。
2酶活性中心往往处于酶分子表面的()中,形成()区,从而使酶与底物之间的作用加强。
3T.R.Cech和S.Altman因各自发现了()而共同获得1989年的诺贝尔化学奖。
4金属离子对酶的激活作用有两种,一是作为(),二是作为()。
5乳酸脱氢酶有()种()个亚基组成。
体内有()种乳酸脱氢酶的同工酶,在临床诊断上有应用价值。
6胰蛋白酶的专一性就是在()残基右侧的肽键上水解;羧肽酶B专一性地从蛋白质的羧羰切下()氨基酸。
7同一种酶有n个底物,就有()个Km值,其中Km值最()的底物,便为该酶的最适底物。
8测定酶活力时,底物浓度应(),反应温度应选在(),反应pH选在(),反应时间应在反应的()期进行。
9表示酶量的多少常用()表示。
二、是非题
1与非酶反应相比,酶反应能使更多的底物变成为产物。
()
2酶影响它怕催化反应的平衡的到达时间。
()
3辅基与辅酶的区别只在于它们与蛋白质结合的牢固程度不同,并无严格的界限。
()
4氧化酶都含有细胞色素。
()
5酶反应最适pH只取决于酶蛋白本身结构。
()
6在极低底物浓度时,酶促反应初速度与底物浓度成正比。
()
7做为辅因子的金属离子,一般并不参与酶活性中心的形成。
()
8底物与酶的活性中心靠共价键结合,以提高催化效率。
()
9测定反应的最适温度时,先将酶在不同温度下保温一段时间,然后在30℃下测定酶活性。
()
10Km值是酶的一种特征性常数,有的酶虽可以有几种底物,但其Km值都是固定不变的。
三、选择题
1在测定酶活力是,用下列哪种方法处理酶和底物才合理()
A其中一种用缓冲液配制即可B分别用缓冲液配制,然后混合进行反应
C先混合,然后保温进行反应
D分别用缓冲液配制,再预保温两者,最后混合进行反应
2假定一种酶只有当某一特定的组氨酸残基侧链未被质子化时,酶分子才具有活性,降低pH对于该酶会发生下列哪一种类型的抑制作用。
()
A反竞争性B非竞争性C竞争性D混合型
3酶的纯粹竞争性抑制具有下列哪种动力学效应()
AVmax不变,Km增大BVmax不变,Km减少
CVmax增大,Km减小DVmax增大,Km不变
4酶与底物分子间的关系可以恰当地表述成()
A一种临时性结合B通过共价键的一种稳定结合
C酶在其中发生永久性改变的一种结合
D随机的非互补结合
5已知胰凝乳蛋白酶的转换数是100s-1,DNA聚合酶是15s-1。
下列说法正确的是()
A胰凝乳蛋白酶的底物结合常数高于DNA聚合酶
B胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶反应速度更大
C在一定的酶浓度和饱和底物水平下胰凝乳蛋白酶反应速度比DNA聚合酶在相同条件下更低
D在饱和底物水平下,胰凝乳蛋白酶的反应速度大约是DNA聚合酶反应速度的6.7倍
四、问答及计算题
1何为酶的活力和比活力?
测定酶活力时应注意什么?
为什么测定酶活力时以测定初速度为宜,并且底物浓度远远大于酶浓度?
2已糖激酶溶液在45℃,12min内会丢失50%活性。
但是当有大量底物葡萄糖存在时,该酶在45℃只丢失3%活性。
试解释此现象。
9甘油醛-3-磷酸脱氢酶,相对分子质量为4万,由4个相同亚基组成,每个亚基上有一个活性位点,在最适条件下,5ug纯酶制品每分钟可以催化2.8umol甘油醛-3-磷酸转化为甘油酸-3-磷酸。
请计算酶的比活力和单个活性位点的转换数。
10α-糜蛋白酶(Mr24000)可以水解苯甲酰-L-酪氨酸乙酯。
比活为45.0umol/min/mg酶。
已知α-糜蛋白酶只有一个活性位点。
求转换数。
11
(1)对于一个遵循米氏动力学的酶而言,当[S]=Km时,若υ=35umol/min,Vmax是多少umol/min?
(2)当[S]=2×10-5mol/L,υ=40umol/min,这个酶的Km是多少?
(3)若I表示竞争性抑制剂,KI=4×10-5mol/L,当[S]=3×10-2mol/L和[I]=3×10-5mol/L时,υ是多少?
12在不同底物浓度的反应体系中,分别测有无抑制剂存在时的υ,数据如下:
[S]无I有I(2.2×10-4mol/L)
mol/L(×10-4)v(µmol/min)v(µmol/min)
1.02817
1.53623
2.04329
5.06550
7.57461
求有无抑制剂存在时的Vmax和Km(Kˊm),并判断这种抑制剂是什么类型的抑制剂。
13称取25mg蛋白酶粉配制成25mL酶溶液,从中取出0.1mL酶液,以酪蛋白为底物,用Folin-酚比色法测定酶活力,得各每小时产生1500ug酪氨酸。
另取2mL酶液,用凯氏定氮法测得蛋白氮为0.2mg。
若以每分钟产生1ug酪氨酸的酶量为1个活力单位计算,根据以上数据,求出:
(1)1mL酶液中所含蛋白质量及活力单位;
(2)比活力;(3)1g酶制剂的总蛋白量及总活力。
参考答案
一、填充题
1酶蛋白辅酶因子酶蛋白辅酶因子2凹穴疏水3核酶(具有催化作用的RNA)
4酶的辅助因子直接的激活剂52456碱性氨基酸碱性7n小
8远远超过酶浓度最适温度最适初9酶的活力单位数1081
11绝对立体12–1/Km1/Vmax13亚基解离
14正碳离子五价磷过渡态Zn2+-活化水四面体肽键氧阴离子活化水
15无酶时不反应被靶酶专一性激活与靶酶反应必须比解离更为迅速,即K1>>Kdis
16最慢的第一步反应17酶活性中心18别构酶共价调节酶齐变序变
19丝氨酸20蛋白激酶蛋白磷酸酯酶
21糖基化乙酰化γ-羧基化ADP-核糖基化22天冬氨酸组氨酸
23腺苷酰化脱腺苷酰化24比活力总活力25增大变小
二、是非题
1错2对3对4错5错6对7错8错9错10错11对12对13错14对15错16错17错18错19对20对21对22错23对24错25对
26对27错28错29错30对
三、选择题1D2B3A4A5D6D7D8B9A10C11C12B13A14B15A
16B17B18B19C20D
四、问答及计算题
1酶活力指酶催化某一化学反应的能力,可以用一定条件下所催化的化学反应的反应速度来表示。
酶比活力指一定量的酶,例如1mg或1g等,所具有的总的活力。
由于酶催化的反应只在反应初始阶段具有恒定的速率,因此测定酶的活力以测定初速度为宜。
由于酶的活性受到测定环境如底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等影响,因此酶活力测定要选择最适条件,包括最适pH、最适温度、最适底物浓度、最适离子强度等。
由于酶活力与酶量是成正比的,为保证所有的酶都能结合底物,参与反应,底物浓度要远远大于酶浓度。
2已糖激酶能催化葡萄糖与ATP反应,使葡萄糖磷酸化。
在无ATP时,葡萄糖与已糖激酶结合,能稳定游离酶分子,抵抗酶变性。
由于无ATP,不会发生上述反应。
9比活力=2.8U/5×10-3mg=560U/mg
转换数/活性位点=2.8umol/min÷(5ug/40000ug/umol×4)=5600/min=93.3/s
10转换数=45.0×10-6×1000×24000=1080/min
11答:
(1)Vmax=70umol/min
(2)Km=1.5×10-5mol/L
(3)因为,[S]﹥﹥Km,[I],所以,υ=Vmax=70umol/min
12答:
先分别求出1/[S],1/V,1/V′,作1/V∽1/[S],1/V′∽1/[S]图,从图中求出:
1/Vmax=0.01min/µmolVmax=100µmol/min
-1/Km=-3.7×103L/molKm=2.7×10-4mol/L
-1/Kˊm=-2.0×103L/molKˊm=5×10-4mol/L
因为Vmax不变,Km增大,所以是竞争性可逆抑制。
13答:
(1)0.625mg蛋白质;250U
(2)400U/mg蛋白质
(3)0.625g;2.5×105U
第五章:
核酸化学
一、填充题
1、核酸完全的水解产物是()、()和()。
其中()又可分为()碱和()碱。
2、体内的嘌呤主要有()和();嘧啶碱主要有()、()和()。
某些RNA分子中还含有微量的其它碱基,称为()。
3、嘌呤环上的第()位氮原子与戊糖的第()位碳原子相连形成()键,通过这种键相连而成的化合物叫()。
4、体内两种主要的环核苷酸是()和()。
5、写出下列核苷酸符号的中文名称:
ATP();dCDP()。
6、RNA的二级结构大多数是以单股()的形式存在,但也可局部盘曲形成()结构,典型的tRNA结构是()结构。
7、tRNA的三叶草型结构中有()环,()环,()环及()环,还有()。
8、tRNA的三叶草型结构中,其中氨基酸臂的功能是(),反密码环的功能是()。
9、其中一股链为5’ATGCC3’的双螺旋DNA的互补链顺序是()。
二、是非题
1稀有碱基是指细胞中含量很少的游离嘌呤或嘧啶。
()
2如果DNA样品A的Tm低于DNA样品B的Tm,那么样品A含有的A-T碱基对高于样品B。
()
3由于DNA是多阴离子,所以它的熔点随盐物质质量浓度增加而增加。
()
4超速离心测定DNA相对分子质量时待测DNA溶液应具有较高浓度。
()
5“荷载的”tRNA指结合有氨基酸的tRNA。
()
6包括核糖体在内的所有RNP,蛋白质是其主要的功能成分,核酸则作为结构成分。
()
7用碱水解核酸,可以得到纯的3ˊ-核苷酸的混合物。
()
8对于提纯的DNA样品,测得OD260/OD280<1.8,则说明样品中有蛋白质残留。
()
9真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3ˊ-OH。
()
10rRNA在蛋白质合成中只起到装配者作用,而tRNA不但具有携带氨酸功能并有解译作用。
三、选择题
1、自然界游离核苷酸中,磷酸最常见是位于()
A戊糖的C-5′上B戊糖的C-2′上
C戊糖的C-3′上D戊糖的C-2′和C-5′上
2、可用于测量生物样品中核酸含量的元素是()
A碳B氢C氧D磷
3、下列哪种碱基只存在于RNA而不存在于DNA()
A尿嘧啶B腺嘌呤C胞嘧啶D胸腺嘧啶
4、核酸中核苷酸之间的连接方式是()
A2′,3′磷酸二酯键B糖苷键
C2′,5′磷酸二酯键D3′,5′磷酸二酯键
5、核酸对紫外线的最大吸收峰在哪一波长附近()
A280nmB260nm
C200nmD340nm
6、DNA变性是指()
A分子中磷酸二酯键断裂B多核苷酸链解聚
CDNA分子由超螺旋→双链双螺旋D互补碱基之间氢键断裂
7、DNATm值较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致()
AG+ABC+G
CA+TDC+T
8某DNA分子中腺嘌呤的含量为15%,则胞嘧啶的含量应为()
A15%B30%C40%D35%
9、寡聚dT-纤维素柱层析用于()。
A从总DNA中分离纯化质粒DNA
B从总核蛋白中分离出DNP
C从总RNA中纯化mRNAD除去杂蛋白
10、双链DNA热变性后()
A黏度下降B沉降系数下降C浮力密度下降D紫外吸收下降
四、问答题
1DNA的Walson-Crick双螺旋结构模型要点是什么?
2DNA在纯水室温下放置时,为什么线状双链DNA会分离成它的组成链?
3预测所给样品各组成部分的相对迁移速度或相对沉降位置.
(1)琼脂糖凝胶电泳分离某质粒DNA的环状、开环形、线形和变性无规则线团的混合物。
(2)氯化铯密度梯度离心分离长度相同的两种DNA的混合物,A来自一种嗜热菌,B来自大肠杆菌。
4下列哪些物质能降低双链DNA的Tm值?
并解释它们的作用方式。
SSB;核组蛋白;氯化钠;甲酰胺;碱
5某细菌DNA相对分子质量为4.0×108,求
(1)此DNA分子长度;
(2)此DNA分子的体积;(3)此DNA分子含多少个螺旋?
6某DNA分子的浮力密度是1.699g/cm3,求其含(G-C)%?
7试用酶学方法来区别:
(1)单链DNA和双链DNA;
(2)线状DNA和环状DNA
参考答案
一、填充题
1磷酸含氮碱戊糖含氮碱嘌呤嘧啶
2.腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶稀有碱基
3.91糖苷键嘌呤核苷
4.CAMPcGMP
5.三磷酸腺苷脱氧二磷酸胞苷
6.多核苷酸链双螺旋三叶草
7.二氢尿嘧啶反密码TφC额外氨基酸臂
8.与氨基酸结合辨认密码子
9、5’GGCAT3’
10、连接核糖与磷酸、连接两个DNA链、将碱基连到戊糖上、连接核苷酸残基。
11、长度
12、识别并结合核糖体小亚基,启动蛋白质合成,保护3ˊ端免受核酸外切酶作用;增加mRNA稳定性
13、腺嘌呤3位=N-H,4位C=O
14、胞嘧啶1位=N-H,2位-NH-H
15、用酸性(钅瓜)盐/苯酚/氯仿抽提用酸性(钅瓜)盐/氯化铯密度梯度离心
二、是非题
1错2对3对4错5对
6错7错8对9对10错
三、选择题
1A2D3A4C5B
6D7B8D9C10A
11B12D13B14C15D
16B17D18B19C20B
四、问答题
1DNA是含两条多核苷酸的双螺旋分子。
两条多核苷酸链反向平行,彼此按碱基配对形成氢键;两条链彼此缠绕,形成右手螺旋(B型螺旋体直径2纳米,碱基对0.34纳米,螺距3.4纳米,10对核苷酸/螺圈);磷酸核糖骨架在外,碱基对平面垂直于核糖平面,即垂直于螺轴,并层叠堆积在内;螺旋体表面形成两个沟,一条大沟(majorgroove)和一小沟(minorgroove)。
2失去一价阳离子的稳定作用,DNA的解链温度Tm降低。
3
(1)无规线团>环状>线形>开环
(2)浮力密度A>B
4SSB:
单链结合蛋白
甲酰胺:
强烈的氢键竞争者
碱:
增加碱基电荷
5解:
(1)DNA分子中碱基对平均相对分子质量=670,则
此DNA分子中含碱基对为(4.0×108)/670=6×105则
每对碱基的纵轴距离是3.4埃
此分子的长度=6×105×3.4埃=0.0204(cm)
(2)DNA分子直径为20埃,则
υ=πr2l=3.14×(10×10-8)2×0.0204=6.40×10-16cm3
(3)DNA分子每10对碱基形成一个螺圈
6×105/10=6×104个
6解:
(G-C)%含量与DNA的浮力密度之间呈正相关,可用下面公式计算
ρ=0.100(G-C)%+1.658
(G-C)%=41%
7
(1)S1核酸内切酶只作用于单链DNA;
(2)核酸外切酶不能作用用环状DNA。
四、问答及计算题
5、答:
①密码的简并性;②密码子无标点,一般不重叠;③密码子的通用性和变异性;④密码子的第三位碱基具摆动性(即有变偶性);⑤密码的编排具有防错功能。
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