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非淀粉多糖酶在饲料中应用的作用机理及其影响因素
非淀粉多糖酶在饲料中应用的作用机理及其影响因素
专论综述
非淀粉多糖酶在饲料中
应用的作用机理及其影响因素
冯定远华南农业大学动物科学学院
摘要:
本文讨论了阿拉伯木聚糖酶,p一葡聚糖酶和纤维素酶等饲用非淀粉多糖酶制剂作用机
理和影响饲用非淀粉多糖酶制剂应用效果的因素.非淀粉多糖酶可以降解饲料中可溶性非淀粉多
糖,降低食糜的粘性;摧毁植物细胞壁,释放细胞内养分;减少动物后肠有害微生物增殖;对消化系
统发育的影响以及提高机体代谢水平,增强免疫力.日粮类型,动物种类,动物消化道内环境,饲用
酶制剂性质,其它饲料添加剂的作用以及加工和贮存条件等多方面因素都不同程度影响酶制剂的
应用效果.
关键词:
非淀粉多糖酶;作用机理;应用效果;影响因素
饲用酶制剂是近年来研究和开发十分活跃的领
域,基础研究和生产应用都取得可喜的进展,特别是
饲用非淀粉多糖酶制剂的应用研究,随着非常规饲
料原料的开发和非常规日粮的使用越来越普遍.所
谓非淀粉多糖酶制剂是指降解非淀粉多糖的一类酶
制剂,非淀粉多糖(Non—starchPolysaccharides.NSP)
是植物组织中除淀粉以外的所有碳水化合物的总
称,由纤维素,半纤维素,果胶和抗性淀粉四部分组
成.它们的特殊结构使它们具有一定的抗营养特性,
相应的非淀粉多糖酶制剂可以破坏其特殊结构,从
而去除或降低其抗营养作用,提高饲料的利用效率
和改善动物的生产性能.合理添加使用非淀粉多糖
酶制剂的前提是正确理解饲用非淀粉多糖酶制剂作
用机理及影响其效果的因素.近年来,华南农业大学
等单位在这方面作了较系统的研究(于旭华,2001,
2004;冯定远等,1997,1998,2000;冯定远和张莹
2000;冯定远和吴新连,2001;沈水宝,2002;黄燕华,
2004).
1饲用非淀粉多糖酶制剂作用机理
自非淀粉多糖被发现是造成小麦,大麦,黑麦和
小黑麦等麦类日粮主要的抗营养因子以来,人们就
开始针对性地在麦类基础日粮中添加非淀粉多糖
酶,并且取得了良好的使用效果(Classen等,1988;
Bedford,1996).阿拉伯木聚糖酶,B一葡聚糖酶和纤
维素酶在动物日粮中添加不仅提高了动物的饲料转
化率和生长速度,同时降低了动物粪便的粘度和水
分含量,动物的呼吸系统和腿部疾病大大减少,提高
了动物的福利,也减少了日粮中营养物质向环境的
排放,部分缓解了养殖业对环境污染的压力.
非淀粉多糖具有抗营养作用的主要是可溶性部分,
称为可溶性非淀粉多糖(SNSP).可溶性阿拉伯木聚
糖主要存在于黑麦,小麦和小黑麦中,它是由吡喃木
糖残基以B一1,4键连接而成,木糖某些残基上的
c一2或c一3上还可能发生阿拉伯糖残基的取代.阿
拉伯糖残基的取代降低了主链化学键的作用力,从
而使其具有水溶性和粘稠性.B一葡聚糖是来源于大
麦和燕麦糊粉层和胚乳层的一种部分可溶性的细胞
壁多糖.它是由B一1,4糖苷键和p一1,3糖苷键组
成,其中p一1,4糖苷键构成主链.由于p一1,3糖苷
键的存在,使B一葡聚糖不同于纤维素,从而使其成
为在水溶液中的粘性成分.
1.1降解饲料中可溶性非淀粉多糖,降低食糜的粘
性
日粮中阿拉伯木聚糖和B一葡聚糖造成抗营养
作用的主要原因是提高了动物肠道内容物的粘度
(Choct等,1990;Annison,1991),而在麦类基础H粮
中添加阿拉伯木聚糖酶和B一葡聚糖酶则可以减低
动物肠道内容物的粘度.消化道内容物的粘性,对内
源酶来说是一个屏障,添加相应的酶制剂一方面增
加了动物肠道内饲料同消化酶的接触机会,同时,已
消化养分向肠粘膜的扩散速度也加快,提高了动物
对已消化养分的吸收,从而提高动物的生产性能.纤
维素系水性很强,添加纤维素酶也可降低粘稠度,促
进内源酶的扩散,增加养分的消化吸收.
Bedford等(1992)在对肠道中食糜粘性的检测
中发现,肠道食糜的粘性同日粮类型和阿拉伯木聚
糖酶的添加剂量之间存在着较强的互作关系,随着
日粮中黑麦添加量的增加,肉鸡肠道内容物粘度逐
饵料?
养殖?
琢境2006"?
81
专论综述
渐增加,而日粮中木聚糖酶的添加则降低了动物肠
道内食糜的粘度;在对肉鸡肠道食糜的粘度同动物
生产性能的回归分析中发现,肉鸡的日增重和饲料
转化率与动物肠道食糜粘度之间存在着一定的相关
关系,其中饲料转化率同粘度的回归方程为:
FCR=
1.507+0.0075x;另外,当日粮中黑麦的含量较高时,
阿拉伯木聚糖酶的需要量也较高.
粘度升高的抗营养作用主要有:
(1)使溶质的扩
散速度下降(Petterson和Al"nan,1988;Bedford,
1996),这种效应将明显减慢营养物质从日粮中的溶
出速度.
(2)使肠道机械混合内容物的能力严重受阻
(Edwards等,1988).高粘度会使食糜中各组分混合
不均,从而妨碍食糜中的糖,氨基酸和脂肪酸向肠黏
膜的移动.研究表明肠道内粘度增加,脂肪的消化率
明显降低,主要是降低了脂肪乳化所需要的混合作
用.(3)非淀粉多糖与内源酶的结合.粘稠的非淀粉
多糖与肠道内酶的结合从而阻止这些酶与其底物的
反应.Almiral等(1995)认为,饲喂大麦日粮时肠道食
糜中胰酶活性降低以及胰脏肥大就是因为肠道食糜
粘度升高的缘故.
Bedford等(1992)认为,肠道食糜粘度的对数与
肉鸡体增重和饲料转化率之间存在显着的负相关作
用.Annison和Choct(1991)研究认为,小麦中的可溶
性非淀粉多糖与日粮表观代谢能呈显着线性负相
关.汪儆等(1997)报道,小麦或次粉日粮中添加0.1%
以木聚糖酶和B一葡聚糖酶为主的酶制剂提高了日
粮的表观代谢能值(AME).加酶后,小麦日粮AME
值提高6.6%,差异极显着(P<0.01),次粉日粮AME
值提高1.5%.Choct和Annison(1992)指出用相应酶
切割非淀粉多糖,降低其粘度和分子量进行鸡饲养
试验,发现随着粘度和分子量的降低非淀粉多糖的
抗营养作用逐渐消失.Chesson(1987)指出,纤维素
酶制剂能改善饲养效果并不是非淀粉多糖被水解成
单糖增加吸收,而是改变了肠道粘性增加养分扩散
速度的结果.三种纤维素酶的协同作用,能显着降低
非淀粉多糖的抗营养作用,提高植物性饲料养分利
用率(Annison和Topping1994;Englyst,1989).
1.2摧毁植物细胞壁,释放细胞内养分
虽然非淀粉多糖的粘性是造成动物生产性能下
降的主要原因,但是非淀粉多糖作为一种物理屏障,
在动物消化酶与日粮混合中的作用也是很明显的,
这一作用在非粘性日粮如玉米豆粕基础日粮中的作
用则更为重要.在一些试验中证明,在肉鸡的非粘性
日粮中添加非淀粉多糖酶制剂可以提高肉鸡的生产
匈稃?
养殖?
琢境2a05?
8
性能(Cowan,1996;Choct,1997),这一点也说明非淀
粉多糖酶制剂可以降解饲料中非可溶性的植物细胞
壁,打破物理屏障,更多的消化酶与它们的底物接
触,最终提高了饲料营养物质消化率和动物的生产
性能.
植物细胞壁的结构复杂,主要由非淀粉多糖(包
括纤维素,B一葡聚糖,木聚糖,甘露聚糖和果胶)和
木质素等组成.许多饲料即使经加工处理后,仍不能
破坏其细胞壁的完整性,包埋在细胞壁内的许多可
消化营养物质(蛋白质,淀粉等)由于不能与消化酶
接触而不能被消化利用.家禽体内缺乏内源性纤维
素酶,因此饲粮中相当比例的营养物质随纤维素进
入后肠发酵或从粪便排出(张海棠等,2000).在日粮
中添加纤维素酶,可以破坏植物细胞壁结构,使细胞
内容物裸露出来与动物内源消化酶接触消化,提高
植物性饲料的营养价值.韩东等(1996)在电子显微
镜下观察到纤维素酶使部分细胞因胞间层的分解而
离散,结构规则的细胞破解,用DNS法测定酶解后
麸皮中还原糖的含量,是未酶解前的两倍左右.赵林
果等(2001)试验用纤维素复合酶体外酶解小麦,玉
米,大麦等,扫描电镜观察到酶处理后的样品表面孔
隙数量增多,孔径增大,胞间层断裂,细胞被破坏;酶
解结束后测定酶解液中还原糖含量是未加酶处理的
3~5倍;将酶解液与稀碘液进行显色反应结果呈较
深的蓝色,而未加酶处理的水浸提液呈非常淡的蓝
紫色.这表明,在酶的作用下淀粉大分子从被打碎的
细胞中释放出来.Terrila—wilo等(1996)也报道,用
纤维素酶和木聚糖酶作用于小麦,随着细胞壁物质
的降解,蛋白质和非淀粉碳水化合物的释放量明显
增加.
Savory(1992)用"c标记单糖研究外源酶对饲
料中植物细胞壁的降解作用,认为纤维素中释放出
来的葡萄糖可能是酶降解细胞壁而促进能量利用的
方式.而Bedford(1996)认为,添加酶制剂改善肉鸡
饲料的消化利用并不是来自于降解非淀粉多糖产生
的能量,而是通过将大分子非淀粉多糖降解成小分
子物质,降低了食糜的粘度和通过破坏细胞壁的完
整结构,释放其中的细胞内容物.
1.3减少动物后肠有害微生物增殖
成年动物肠道内的微生物菌群通常是稳定的,
当日粮类型改变或者日粮中营养物质的消化速度改
变时,可以改变动物肠道内微生物的种类和数量
(Vahjen等,1998).当日粮中非淀粉多糖的含量增加
时,宿主肠道的有害微生物则会增殖.Choct等
专论综述
(1996)的试验表明,肉鸡H粮中添加可溶性非淀粉
多糖明显增加了小肠内微生物的增殖和发酵,而随
后的试验中添加了非淀粉多糖酶后则克服了这个问
题.高纤维日粮中添加纤维素酶可显着减少盲肠内
容物大肠杆菌数,同时显着增加了有益的乳酸杆菌
数(黄燕华,2004).
Vah]en等(1998)报道,在肉鸡H粮中添加木聚
糖酶改善了肉鸡消化道微生物的种类和数量,显着
降低了肉鸡0~3周龄肠道中的菌落数和革兰氏阳性
菌数,同时显着增加了组织样品中乳酸菌的数目.家
禽H粮添加纤维素酶制剂能改变H粮纤维的消化部
位,使H粮纤维的消化由盲肠转移到小肠,减少后肠
微生物发酵,提高其消化率.此外,外源酶还有助于
改善消化道内环境,平衡内源酶的分泌,减少肠黏膜
细胞的脱落.
1.4对消化系统发育的影响
H粮中非淀粉多糖的存在一方面与消化酶,胆
汁等活性物质结合,造成动物消化道内消化酶活性
的降低,另外,还可以造成动物消化器官代偿性增生
和肥大(Isaksson等,1982;Ikegami等,1990;于旭华,
2001).饲料中添加了非淀粉多糖酶后则可以减少动
物消化器官的代偿性生长.Brenes等(1993)在无壳
大麦中添加酶制剂可以分别降低鸡嗉囔和肌胃重量
的15%和17%,而在带壳大麦中添加酶制剂则可以
分别降低嗉囔和肌胃重量的7%和8%.在麦类H粮
中添加酶制剂降低了消化器官代偿性增生.添加纤
维素酶可使雏鹅小肠相对重量下降,并可显着降低
雏鹅直肠相对重量和42H龄生长肉鹅盲肠相对重
量.纤维素酶可改善小肠及盲肠肠道黏膜绒毛的发
育,减轻或避免高纤维H粮对肠绒毛的损伤(黄燕
华,2004).H粮中添加了木聚糖酶肉鸡空肠中段小
肠绒毛由对照组的手指状变为长舌状,而且小肠绒
毛较短(于旭华,2004).
钱利纯(1998)认为,H粮中添加适宜的外源酶
制剂可使胃肠道内环境发生变化,使肠壁变薄并减
少肠道微生物数量,改善营养吸收.Brenes等(1993)
报道,大麦H粮添加粗酶制剂,降低了十二指肠,空
肠回肠和结肠的相对重量.高峰(1998)也报道,在以
大麦为主的H粮中添加酶制剂显着降低肉鸡小肠的
相对重量.
1.5提高机体代谢水平,增强免疫力
畜禽的生长发育过程以及各种营养物质在动物
体内的消化吸收和代谢都受到神经和内分泌激素的
调控.在大麦基础H粮添加粗酶制剂可以显着提高
雏鸡甲状腺素(T,),促甲状腺素(TSH),生长激素
(GH)和胰岛素(Ins)水平.在鹅的试验中也取得了
相似的结果,大麦基础H粮中添加0.1%粗酶制剂提
高了肉鹅60H龄的GH,T,,TSH和胰岛素样生长
因子I(IGF—I)等与生长关系密切的激素水平(韩正
康,2000).高纤维H粮中添加纤维素酶,可使雏鹅和
生长肉鹅血液中胰岛素,T,,T,TSH水平有不同程
度的提高,使胰高血糖素水平显着降低.使42H龄
鹅血液中IGF—I水平有提高的趋势,肌肉IGF-I水
平在21H龄和42H龄均有提高的趋势(黄燕华,
2004).在小麦基础H粮中添加阿拉伯木聚糖酶,均
有提高黄羽肉鸡6周龄血清中T浓度的趋势,其中
Ⅺ与对照组比较达到显着水平(于旭华,2004).在粗
酶制剂作用下,大麦H粮的p一葡聚糖等多糖经分解
后可能产生活性寡糖,活性寡糖作用于肠黏膜细胞
受体,使机体的细胞免疫力明显提高.蛋白质可能降
解产生具有免疫活性的小肽,而H粮中非淀粉多糖
也可降解成一些寡糖,可能参与机体免疫调节,增强
机体免疫力和健康水平(Martin,1995).
2影响饲用非淀粉多糖酶制剂应用效果的因素
2.1日粮因素
H粮类型不同,非淀粉多糖酶制剂的应用效果
不同.对麦类H粮和玉米豆粕H粮,所适合应用的非
淀粉多糖酶制剂有所不同.即使对麦类H粮,所适合
应用的非淀粉多糖酶制剂也有所不同.小麦和黑麦
中主要的非淀粉多糖是阿拉伯木聚糖,用于小麦和
黑麦H粮的非淀粉多糖酶制剂应主要含木聚糖酶;
而大麦和燕麦中除了阿拉伯木聚糖外主要是B一葡
聚糖,用于大麦和燕麦H粮的非淀粉多糖酶制剂则
主要含B一葡聚糖酶及较少量的木聚糖酶.小麦和黑
麦中的阿拉伯木聚糖含量分别为8.1%和8.9%;华南
农业大学测定不同小麦品种的阿拉伯木聚糖含量为
7.33+0.14%(于旭华,2004).大麦和燕麦中的p一葡
聚糖含量分别为8.2%和4.5%,但其中阿拉伯木聚糖
的含量也较高,分别为7.9%和2.1%(Englyst,1989).
裸大麦中8一葡聚糖的水平要高于皮大麦中的水平,
饲喂品种中8一葡聚糖的含量高于酿造品种的含量.
纤维素酶对不同纤维源的H粮作用有差异,不同纤
维源H粮的改善程度也不同,添加纤维素酶对稻谷
H粮总能代谢率的提高幅度大于草粉H粮(黄燕华,
2004).
2.2动物种类因素
动物的种类和年龄等都会影响酶制剂的使用效
果.在高含量非淀粉多糖的饲料中添加非淀粉多糖
饵?
养殖?
环境2话3
专论综述
酶,可以明显提高家禽的生长性能和饲料报酬,但是
非淀粉多糖酶对于猪的效果往往没有家禽饲料中的
应用效果明显.可能非淀粉多糖对猪的危害没有其
对鸡的危害严重,由于猪肠道内容物中水分含量高
于家禽,而干物质的含量(10%)明显低于家禽肠道
内容物干物质的含量(20%),其肠道内容物中的粘
度往往要比家禽的低很多,Fenger等(1988)的试验
发现,即使是很小幅度粘度的提高就能够使营养物
质在溶液中的扩散速度急剧下降,猪肠道内容物的
低粘度增加了消化酶和各种营养物质的扩散速度.
由于猪的后肠道容量占总肠道的比例要远远高于家
禽,后肠微生物的发酵作用在猪的消化中往往占有
很大的作用,猪后肠微生物的发酵作用可以释放一
些脂肪酸从而给动物提供部分的能量,而家禽肠道
中微生物种类和数量要低于猪,因此酶制剂在其日
粮的消化中的作用更为明显.另外,饲料在猪的胃中
往往要停留4h以上,而饲料在鸡的胃中停留时间要
短的多.由于鸡在酸性环境的肌胃前还有嗉囔,酶制
剂在嗉囔相对高的pH值环境中发挥了相当大的作
用.
麦类日粮对肉仔鸡的抗营养作用与H龄有很大
的关系.Classen和Bedford(1991)比较了小麦和大麦
加酶日粮对肉仔鸡的生产性能的影响,结果发现,高
p一葡聚糖含量的大麦H粮对肉仔鸡的抗营养作用
主要发生在0-4周龄,4周龄以上各组肉仔鸡之间
生长性能差异不显着.这主要是因为随着肉仔鸡H
龄的增加,小肠内容物粘度有所降低的原因.
但Bedford(1997)比较了14个试验中酶制剂对
42H龄肉仔鸡的生长情况发现,酶制剂的添加对
22-42H龄肉仔鸡饲料报酬的提高幅度明显高于0~
21H龄.这可能是因为,虽然肉仔鸡食糜的粘度随
着日龄的增加而逐渐的降低,但是随着H龄的增加,
非淀粉多糖增加了肉仔鸡肠道致病菌的增殖,而饲
料中添加非淀粉多糖酶后,降低了食糜的粘度,提高
了各种营养物质的消化吸收率,从而减少了肠道有
害微生物的繁殖.
2.3饲用酶制剂性质
不同来源酶的特性是不同的,即使同一来源的
酶,性质也有所不同.由不同菌种产生的酶制剂,其
发挥最大活性所需的底物和环境条件(pH值和温度
等)往往是不一样的.汪做等(2000)对国内外4种酶
制剂木聚糖酶活性进行检测发现,各种酶制剂木聚
糖酶最适的反应温度为60-65oC,最适的pH值为
5.85-6.35,其中3种酶在pH值低于3.6时活性急剧
4匀籽?
养殖?
环境200.5"?
8
下降.在随后对4种酶制剂中f3一葡聚糖酶活性的检
测中发现,大多数复合酶制剂获得最高p一葡聚糖酶
活的条件是60~(2和pH值6.35.同一种发酵方法不
同菌种来源的纤维素酶稳定性小同,木霉来源比青
霉来源好;同一真菌来源的纤维素酶,液体发酵的稳
定性更好(黄燕华,2004).
于旭华(2001)试验表明,在pH4.6的条件下,A,
B两种纤维素酶,其最高活性都是在温度为60℃时
获得,纤维素酶A和B在40~(2条件下的活性分别为
60~(2条件下的71.7%和64%.pH值对2种纤维素酶
的活性也有较大的影响,其活性在pH值4.6时的活
性最大,在pH值3.6-5.8的范围内,其活性都保持
在50%以上.选择温度和pH范围与畜禽体内环境
一
致的纤维素酶可发挥较好的作用.
2.4其它饲料添加剂的作用
非淀粉多糖酶可以降低小肠食糜的粘度,减少
各种营养物质在后肠道内的富集,从而减少各种有
害微生物在后肠道内的增殖.而抗生素对肠道有害
细菌也有较强的抑制作用,因此抗生素与酶制剂在
饲料中的作用效果可能有协同作用.Pijel(1996)报
道,卑霉素与木聚糖酶同时使用,可以使肉仔鸡的牛
产性能优于单独使用酶或单独使用抗生素时的牛产
性能.黄俊文等(2000)的试验也发现,饲用酶单独使
用能够改善断奶仔猪的生长性能,而金霉素与饲用
酶的配合使用能够进一步改善仔猪的生产性能,尤
其在试验的后期,金霉素与饲用酶的配合使用,干物
质,能量和粗蛋白的消化率都要高于酶的单独添加
组.
另外,微量元素添加剂,酸化剂等饲料添加剂,
特别是在预混料中的同时添加,在一定程度上也会
影响酶制剂的活性和应用效果.
3非淀粉多糖酶应用关注的问题
3.1饲料加工过程
高温高压处理黑麦和小麦降低了其在肉鸡牛产
中的营养价值,这可能是由于高温高压处理增加了
肉鸡消化道中食糜的粘度,然而高温高压处理加酶
饲料却明显的提高了肉仔鸡的生产性能,其效果要
明显好于单独添加木聚糖酶组肉仔鸡的生产性能.
另外,微波处理和制粒处理都能够增加酶制剂在饲
料中应用的效果,这与饲料加酶降低了其在动物体
内食糜粘度可能有关.加酶的大麦H粮在不同的温
度下制粒后饲喂肉鸡的试验发现,肉鸡的生产性能
开始时随着制粒温度的升高而提高,这可能是冈为
制粒增加了日粮中p一葡聚糖的可溶性从而提高了
专论综述
小肠内容物的粘度,饲料加酶后降低了B一葡聚糖的
抗营养特性.当温度继续升高,肉鸡的生产性能有所
下降,这可能是冈为过高的温度对酶有部分灭活作
用,也可能是因为过高温度破坏了饲料中的营养物
质从而降低了各种营养物质的消化利用性(Classen
等,1991).
Pickford(1992)比较了3种商业酶制剂的制粒稳
定性,在制粒温度80~(7的条件下,3种商品酶制剂在
饲料中的存留率分别为85%,55%和35%.Petterson
等(1997)的试验则表明,在85cC的制粒条件下,有2
种木聚糖酶的活性存留率保持在80%以上,即使制
粒温度升高至95cIC,其中1种热稳定木聚糖酶的活
性存留率仍然保持在70%以上.
饲料加工调质过程中过高的温度可能破坏饲料
中添加酶的活性,但动物的生产性能并不是随着饲
料加工温度的升高而降低.Silversides等(1998)试验
表明,日粮中木聚糖酶的活性随着饲料加工温度的
升高而逐渐下降,但随后21日龄肉仔鸡的饲养试验
发现,饲料加工温度82~C的肉仔鸡生产性能最好,
饲料加工温度低于或高于82cC,肉仔鸡的生产性能
都有所降低,而饲料转化率与饲料中酶的活性之间
相关性不着.对肉仔鸡肠道内容物的粘度的测定
结果发现,所有加工温度的加酶饲料都降低了肉仔
鸡肠内容物的粘度,而且在95~(2时粘度的降低幅度
最大.Steen(2001)报道,在日粮中添加0.5kg/t和
1kg/t的复合酶制剂,然后分别在7O,80,9O和95~(2
的条件下调质制粒,结果在所有温度的条件下,酶制
剂的添加均提高了动物的饲料报酬,相同的加酶条
件下的饲料报酬与不同调质温度之间呈三次方的函
数关系,即降低,升高,再降低,两种不同剂量之间比
较可以看出,在8()cC和95~C条件下两种剂量生产性
能相近,在70℃的调质条件下高剂量的饲料报酬要
好于低剂量的饲料报酬,但是在90~C的条件下与此
相反.因此,在实际生产中应该以动物的实际生产性
能作为检验酶制剂有效性的标准.
提高酶制剂在饲料加工过程中高温的耐受性的
途径丰要有三条.一方面可通过基因技术筛选耐高
温的菌株,第二条途径可以采用产品的物理处理如
包埋等技术,第三条途径采用液体酶制剂在饲料制
粒后的颗粒表面喷涂技术,也可以减少酶制剂在饲
料加上调质过程中活性的损失.
嗜热菌产耐热木聚糖酶基因在常温菌中的克隆
和表达为耐热木聚糖酶的开发和利用提供了更广阔
的前景.克隆基因的高效表达,提高了木聚糖酶的耐
热性,同时获得相同量所需的细胞量仅仅为野生型
的百分之几,提高了酶的产量.由于宿主菌产生的其
它蛋白质相对不稳定,采用热变性的方法可以迅速
而简便地对常温菌中表达的耐热木聚糖酶进行提
纯,解决了工业用胞内酶纯化费用高的难题.在筛选
耐高温菌种的同时一定要注意酶的产量和其它一些
理化性状的改变,以免提高酶的耐热性的同时降低
了酶的产量以及在常温下的活性.
酶制剂可以通过一些物理处理提高对高温的耐
受性,主要包括添加载体对原酶进行吸附作用,另外
利用疏水的物质对原酶进行包被.Pichford(1992)报
道,酶的稳定化处理可以将酶在75cIC制粒后的存留
率由48%提高至76%,而95cC制粒后酶活的存留率
由12%提高至34%.在对酶制剂进行包被处理的同
时,一定要注意包被后的酶制剂是否可以在动物合
适的消化道部位进行释放,达到其催化的目的.
木聚糖酶经过制粒后回收率比较低.Silversides
等(1999)报道,木聚糖酶在经过80,9O和95cC的制
粒温度后,其回收率在11%~4O%之间,而制粒后添
加液体酶则全部回收.这表明制粒后喷涂技术对于
提高酶制剂的回收率方面具有很好的作用.
3.2动物消化道内环境
消化道内环境对外源酶活性产生的影响也是酶
制剂应用应该关注的问题.Inborr等(1993)利用体外
消化模拟法对粗木聚糖酶和一种饲用复合酶在单胃
动物
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