高二生物人教版选修一讲义专题三 课题1 菊花的组织培养 含答案.docx
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高二生物人教版选修一讲义专题三课题1菊花的组织培养含答案
一、植物组织培养
1.理论基础:
细胞的全能性。
2.植物细胞的全能性
当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。
3.基本过程
―→
二、影响植物组织培养的因素
1.材料选取
(1)不同的植物组织,培养的难易程度差别很大。
(2)对于同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。
(3)菊花的组织培养,一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
2.营养成分
常用的一种培养基是MS培养基,其主要成分包括:
(1)大量元素,如N、P、K、Ca、Mg、S。
(2)微量元素,如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co。
(3)有机物,如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素,以及蔗糖等。
3.植物激素:
常用的植物激素是生长素和细胞分裂素,二者的浓度、使用顺序及用量比例等都会影响实验结果。
4.外界条件:
pH、温度、光照等环境条件。
三、实验操作
1.细胞的全能性及其表达条件是什么?
2.植物组织培养的基本过程及影响因素是什么?
3.MS培养基与微生物培养基的配方有什么异同?
4.植物激素对实验结果有何影响?
5.植物组织培养过程中的无菌操作包括哪些方面?
探究点一
植物组织培养及影响因素
[共研探究]
1.植物组织培养
(1)概念:
在人工培养基上,在一定的条件下,离体培养植物的器官、组织、细胞,经过脱分化、再分化形成再生植株的技术。
(2)原理:
植物细胞的全能性。
(3)基本过程
根据植物组织培养的过程,回答下列问题:
①A过程表示脱分化,是指由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,又叫去分化。
脱分化的实质是已分化的细胞回到未分化状态。
②B是愈伤组织,其特点是:
细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。
③C过程表示再分化,是指愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程。
2.细胞分化
(1)概念:
在植物的个体发育过程中,细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。
(2)实质:
基因的选择性表达。
(3)结果:
形成不同的细胞和组织。
3.植物细胞的全能性
(1)概念:
已经分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能。
(2)原因:
生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。
(3)全能性表现的条件
①离体状态(用于离体培养的植物器官或组织片段,叫做外植体)。
②一定的营养物质。
③植物激素。
④其他适宜的外界条件(温度、pH、光照、氧气、无菌等)。
[总结升华]
1.细胞全能性大小与细胞种类的关系
(1)受精卵>生殖细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞;分化程度低的细胞>分化程度高的细胞。
(2)一般来说,离体后的植物细胞的全能性在一定条件下可充分体现。
(3)离体的动物细胞的全能性受到限制,但其细胞核的全能性可借助卵细胞的细胞质体现出来。
(4)未离体的细胞的全能性不能表达,只是在机体的调控下进行定向分化。
2.MS培养基中各成分的作用
成分
作用
微量元素和大量元素
提供植物细胞生活所必需的无机盐
蔗糖
提供碳源,维持细胞渗透压
甘氨酸、维生素、烟酸、肌醇等
满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养需求
【归纳拓展】 MS培养基与微生物培养基配方的不同
微生物培养基以有机营养为主,MS培养基则需提供大量无机营养,包括植物生长必需的大量元素和微量元素。
3.植物激素在组织培养过程中的重要作用
(1)在配制好的MS培养基中,常常需要添加植物激素。
植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
(2)激素使用的先后顺序及同时使用时,两者用量的比例对细胞分裂和分化的影响
①激素使用的先后顺序产生的影响
使用顺序
实验结果
先使用生长素,后使用细胞分裂素
有利于细胞分裂,但细胞不分化
先使用细胞分裂素,后使用生长素
细胞既分裂也分化
同时使用
分化频率提高
巧记为:
“先生”,分裂不分化;“后生”,分裂又分化;“同使”,分化频率高
②激素用量比例产生的影响
生长素/细胞分裂素比值
结果
比值高时
促根分化,抑芽形成
比值低时
促芽分化,抑根形成
比值适中
促进愈伤组织的形成
简记为“高根、低芽、中愈伤”
[对点演练]
1.分别将未分化细胞群培养在植物激素X和植物激素Y浓度比不同的培养基中,未分化细胞群的变化情况如图所示。
据图分析下列叙述正确的是( )
A.植物激素X是生长素
B.植物激素Y可诱导芽的生成
C.该实验用的材料未分化细胞群可来自不同种植物
D.激素X和Y浓度比为1时细胞不能分化
解析:
选D 细胞分裂素用量与生长素用量的比值适中,有利于外植体脱分化,比值升高有利于芽的分化,比值降低则有利于生根。
结合题图,植物激素Y高时利于根的形成,则Y为生长素;植物激素X高时利于芽的形成,则X为细胞分裂素;根据单一变量原则,该实验材料应取自同种植物;激素X、Y浓度比为1,愈伤组织不发生分化。
2.下图是植物组织培养的简略表示图。
请据图回答:
(1)把组织培养的过程按正确顺序排列______________(用字母和箭头表示)。
(2)外植体发育成一个完整个体需经过________和________两个过程。
(3)若B中为胡萝卜根尖细胞,则培养成的新植株的叶片的颜色是________,这说明根尖细胞____________________________。
(4)从理论上讲,植物细胞都有形成再生植株的可能性,这是________________的表现。
解析:
植物组织培养的基本过程:
外植体脱分化形成愈伤组织,愈伤组织再分化形成根和芽。
根据图中的植物发育情况可以看出组织培养的顺序为B→D→C→A。
由根尖细胞培养成的新植株的叶片之所以是绿色的,是因为由愈伤组织分化而来的叶片细胞中,控制叶片绿色性状的基因进行选择性表达。
植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。
答案:
(1)B→D→C→A
(2)脱分化 再分化
(3)绿色 含有控制叶片绿色性状的基因
(4)植物细胞全能性
探究点二
菊花的组织培养过程
[共研探究]
完善菊花组织培养的实验操作过程图
[总结升华]
1.植物组织培养过程中应注意的问题
(1)在植物组织培养过程中,由于培养基中营养物质被消耗,所以需要适时更换培养基。
(2)培养一株完整的试管苗,必须先进行生芽培养,再进行生根培养。
如果顺序颠倒,先诱导生根,就不好诱导生芽了。
(3)菊花植物组织培养中,愈伤组织的形成不需要光照,而在诱导生芽后,需要一定量的光照。
(4)试管苗一般在高湿、弱光、恒温等条件下培养生长,出瓶后一定要注意保温、保湿。
(5)试管苗的光合作用能力弱,在移栽前应给予较强光照闭瓶炼苗,以促进幼苗向自养苗转化。
2.植物组织培养过程中的无菌操作
(1)植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高。
用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,大量微生物生长会消耗大量营养物质且产生毒素,造成植物细胞死亡。
(2)植物组织培养过程中的无菌技术包括培养环境、培养基、培养器械的消毒灭菌和植物材料(外植体)的消毒。
对培养材料进行表面消毒时,一方面要考虑药剂的消毒效果,另一方面要考虑植物材料的耐受能力。
不同药剂、不同植物材料,甚至不同器官要区别对待。
3.重复实验和对照实验的设置
(1)一种材料或配方至少要做一组以上的重复。
设置对照实验可以取一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。
(2)不同组的同学可以设置不同的激素浓度,比较植物生长的速度。
[对点演练]
3.下列有关菊花的组织培养的说法,正确的是( )
A.需要有三种培养基,其营养成分中的碳源应该是无机碳源
B.要用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌,即在100℃下保持15~30min
C.在培养过程中要先让愈伤组织生根后再使其生芽
D.用酒精对外植体进行消毒时,持续的时间不能太长
解析:
选D 在菊花组织培养过程中,共需配制三种培养基,分别是脱分化培养基、生芽培养基和生根培养基,这些培养基需要的碳源是蔗糖,而不是无机碳源;在对培养基进行高压蒸汽灭菌时,要在121℃下保持15~30min,以便杀死所有微生物的细胞、芽孢和孢子等,100℃下不能杀死微生物的芽孢;在培养过程中要先让愈伤组织生芽后再使其生根;用酒精对外植体进行消毒时,持续的时间不能太长,否则容易杀死外植体细胞。
4.(2018·石家庄月考)在植物组织培养过程中,接种时应注意的事项有( )
①接种室要消毒 ②只要戴口罩,操作时便可说话
③外植体要消毒 ④接种操作要在酒精灯火焰旁进行 ⑤接种完毕应立即盖好瓶盖
A.①②③④⑤ B.①②③④
C.①③④⑤D.②③④⑤
解析:
选C 组织培养中要求进行严格的无菌操作,因为一旦出现细菌或真菌污染,就会导致实验失败,其要求除题目中提到的①③④⑤项外,还有工作人员即使戴上口罩,也不许说话、咳嗽等。
1.下列关于影响植物组织培养的因素的说法,正确的是( )
A.不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料培养的难易程度相同
B.在植物组织培养中,培养基中必须添加植物激素
C.植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是互相独立的
D.pH、温度、光照等条件对植物组织培养特别重要
解析:
选D 不同植物组织培养的难易程度不同,同一种植物材料也会因材料的年龄、保存时间的长短等影响实验结果;在植物组织培养中,培养基中常常要添加植物激素,但不是都必须添加植物激素,如菊花茎段组织培养不必添加植物激素;各种植物激素的作用是相互联系的,而不是互相独立的。
2.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是( )
①植物细胞的全能性 ②离体的植物器官、组织或细胞 ③根、芽 ④生长素和细胞分裂素 ⑤生长素和乙烯 ⑥愈伤组织 ⑦再分化 ⑧脱分化 ⑨植物体
A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④ B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④
C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤
解析:
选B 植物组织培养依据的原理为植物细胞的全能性;培养过程的顺序是离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,再分化形成根、芽等进而形成新的植物体;诱导的植物激素为生长素和细胞分裂素。
3.下列关于无菌技术的说法,正确的是( )
①由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对无菌操作的要求非常严格 ②对培养基及器械用高压蒸汽灭菌 ③对植物材料进行表面消毒时,一方面要考虑药剂的消毒效果,另一方面要考虑植物材料的耐受能力 ④植物组织培养中不同植物材料要区别对待 ⑤对培养的植物材料可用高压蒸汽灭菌 ⑥如果不小心引起污染,将可能造成培养工作前功尽弃
A.①②③④⑤B.①②③④
C.①②③④⑥D.①②③④⑤
解析:
选C 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,灭菌不彻底就会导致整个实验失败,①正确。
在进行植物组织培养时,对培养基及器械要用高压蒸汽灭菌,②正确。
对植物材料进行表面消毒时,一方面要考虑药剂的消毒效果,另一方面要考虑植物材料的耐受能力,③正确。
植物组织培养中不同植物材料要区别对待,因为不同植物材料对药剂耐受力不同,④正确。
对植物材料不能用高压蒸汽灭菌,⑤错误。
如果不小心引起污染,将可能造成培养工作前功尽弃,导致整个实验失败,⑥正确。
4.请回答下列有关植物组织培养的几个问题:
(1)离体的植物组织或细胞培养常用的一种培养基是________,其主要成分中的大量元素有________________________________________________________________________,
培养中常用的两种植物激素是________和__________,两者使用时的______________、___________________、__________________等,都会影响实验的结果。
(2)植物组织培养的一般步骤为_____________________________________
________________________________________________________________________。
(3)如图为植物组织培养的部分过程:
①过程是________,②过程是________,A是________。
(4)组织培养过程中还需要维持一定的外界条件,一是要有适宜的________,二是____________等。
解析:
(1)植物组织培养常用的基本培养基为MS培养基,其中含有N、P、K、Ca、Mg、S等大量元素;激素的种类和浓度对外植体的分化和增殖起到了重要的作用,尤其是生长素和细胞分裂素,二者的浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都会影响实验结果。
(2)植物组织培养的一般步骤为:
制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培。
(3)植物组织培养的主要过程是先脱分化形成愈伤组织,然后再分化形成试管苗。
(4)组织培养过程中需要保持适宜温度和无菌环境等外界条件。
答案:
(1)MS培养基 N、P、K、Ca、Mg、S 生长素(类) 细胞分裂素(类) 浓度 使用的先后顺序 用量的比例
(2)制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 (3)脱分化 再分化 愈伤组织 (4)温度 无菌环境
【基础题组】
1.影响植物组织培养的因素包括( )
①培养基的配制 ②外植体的选取 ③激素的运用
④消毒 ⑤温度、pH、光照
A.①②③④⑤B.①②③
C.①②③④D.①②③⑤
解析:
选A 植物组织培养过程受多种外界因素的影响,其中包括温度、光照、pH等,而培养基的成分、外植体的选取、激素的运用和消毒是否严格等也会影响组织培养。
2.下列有关植物组织培养的说法,正确的是( )
A.高度分化的植物细胞、组织和器官产生愈伤组织的过程是再分化
B.愈伤组织继续培养,重新分化成根和芽等器官的过程叫脱分化
C.脱分化和再分化过程均能够体现细胞的全能性
D.植物组织培养技术能保持遗传性状的一致
解析:
选D 高度分化的植物细胞、组织和器官产生愈伤组织的过程是脱分化,愈伤组织继续培养,重新分化成根和芽等器官的过程叫再分化;脱分化和再分化的基础是细胞的全能性,但是这两个过程均未形成完整的植株,不能够体现细胞的全能性;植物组织培养技术能保持遗传性状的一致。
3.在对外植体消毒时,以下说法正确的是( )
A.菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷子轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min
B.用95%的酒精冲刷
C.放入0.1%的氯化汞中10min
D.用蒸馏水清洗若干次
解析:
选A 选取外植体后先用流水冲洗后,可加少许洗衣粉洗去污物;用体积分数为70%的酒精消毒6~7s;用质量分数为0.1%的氯化汞消毒1~2min,时间太长,影响外植体细胞的活性;最后用无菌水冲刷附着在其上的氯化汞等。
4.下列有关植物组织培养的叙述,正确的是( )
A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B.脱分化过程不需要植物激素,植物激素只在再分化过程中发挥作用
C.由于植物细胞都具有全能性,所以菊花的组织培养实验中选材不会影响实验的结果
D.对外植体进行表面消毒时,既要考虑药剂的消毒效果,又要考虑植物的耐受能力
解析:
选D 愈伤组织是一团排列疏松而无规则、无定形状态的薄壁细胞;脱分化和再分化过程均需要添加一定量的植物激素;虽然植物细胞都具有全能性,但是不同的材料培养的难易程度是不同的,所以要选择合适的材料进行植物组织培养;对外植体进行表面消毒时,既要考虑药剂的消毒效果,又要考虑植物的耐受能力。
5.试管苗在移栽前进行一系列操作,使幼苗生长健壮,耐环境变化能力增强,这一过程叫“炼苗”。
下列关于移栽的叙述,正确的是( )
A.培养后的试管苗,打开封口膜后,直接移栽至大田
B.试管苗在移栽时不需在培养间进一步培养
C.试管苗在培养间培养一段时间后,用无菌水清洗根部培养基后,移栽入大田
D.试管苗在培养间培养一段时间后,最好用无菌水清洗根部培养基,再移入消过毒的蛭石、珍珠岩等环境下炼苗
解析:
选D 试管苗光合作用能力低,对不良环境的耐受能力差,在培养一段时间后,由异养苗向自养苗转化,并且要在蛭石、珍珠岩等无菌环境中培养一段时间,适应外界环境后再移至大田栽培。
6.在菊花的组织培养操作完成了3~4d后,观察同一温室中的外植体,发现有的外植体正常生长,有的外植体死亡,你认为外植体死亡的原因不可能是( )
A.外植体来自衰老的植物组织,其中细胞活性低或结构不完整
B.接种时培养基灭菌不彻底,接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体
C.培养过程中虽然温度、pH适宜,但没有及时调整各种营养物质、激素的比例
D.愈伤组织形成初期没有给予充足的光照
解析:
选D 由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高;用于植物组织培养的培养基同样适合某些微生物的生长,如一些细菌、真菌等的生长;而培养物一旦受到微生物的污染,就会导致实验失败,因此要进行严格的无菌操作。
在培养的不同阶段,外植体对营养物质和激素的需求不同,所以培养过程中要及时调整各种营养物质、激素的比例。
愈伤组织形成过程中,细胞还没有开始再分化,不能进行光合作用,所以愈伤组织形成初期不需要充足的光照。
7.将某植物外植体接种到MS培养基中可以培育出试管苗,下列叙述正确的是( )
A.该过程中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素
B.将某植物外植体培育成试管苗,其原理是细胞分裂
C.细胞分裂素和生长素的使用顺序不会影响植物细胞的发育方向
D.生长素与细胞分裂素的用量比值高时,有利于芽的分化,抑制根的形成
解析:
选A 生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素;将外植体培育成试管苗,其原理是细胞的全能性;生长素和细胞分裂素的使用顺序会影响植物细胞的发育方向;生长素用量与细胞分裂素用量比值高时,有利于根的分化,比值低时,有利于芽的分化,比值适中时,有利于愈伤组织的形成。
8.如图为植物组织培养的过程示意图。
下列叙述正确的是( )
①
②
③―→④
A.①必须脱离母体后,才可能完成上述过程
B.②由排列疏松的薄壁细胞组成,没有全能性
C.②→③的再分化过程中,只利用细胞分裂素即可诱导②生根
D.在上述组织培养过程中不需要光照条件
解析:
选A 分析题图可知,①②③④依次代表离体的植物组织或细胞(外植体)、愈伤组织、根或芽、植株。
植物体的组织或细胞只有处于离体状态时,才可能表现出全能性,发育成完整的植株;愈伤组织细胞具有全能性;生根还是发芽取决于激素的种类和浓度比例,当生长素与细胞分裂素比值高时,有利于生根,比值低时,有利于生芽;植物组织培养中需要光照。
【能力题组】
9.下列关于植物组织培养的叙述,错误的是( )
A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压
B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化
C.离体植物器官或组织都必须通过脱分化才能形成愈伤组织
D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因组成相同
解析:
选D 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织的基因组成不一定相同,如取同一株绿色开花植物的体细胞和生殖细胞分别进行植物组织培养,由于生殖细胞的基因型与体细胞的不同,得到的愈伤组织基因组成也不相同。
10.在植物组织培养过程中,要使用植物激素,但不同的植物激素以及使用时间的先后和用量的相对大小都会影响细胞的分裂、分化。
下列叙述错误的是( )
A.先使用生长素,后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂,但细胞不分化
B.先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂也分化
C.生长素用量与细胞分裂素用量的比值低时,有利于芽的分化,抑制根的形成
D.不使用植物激素,有利于愈伤组织的形成
解析:
选D 外植体脱分化形成愈伤组织的过程也需要植物激素的调节,生长素与细胞分裂素的比值适中时,促进愈伤组织的形成。
11.(2018·衡阳月考)某生物兴趣小组用芦荟新鲜茎的一部分作为材料进行组织培养,发现愈伤组织能正常形成且继续长大,根和芽却迟迟不能形成。
你认为导致该情况出现的最可能的原因是( )
A.葡萄糖、氨基酸等有机营养供应不足
B.培养环境中光照、温度、pH或氧气浓度不适宜
C.生长素和细胞分裂素用量比例不协调
D.脱分化和再分化过程受到杂菌污染
解析:
选C 根据题干信息“愈伤组织能正常形成且继续长大”,说明培养基营养充足、环境条件适宜且没有受到杂菌污染,因此愈伤组织不能分化出根和芽是由生长素用量和细胞分裂素用量比例不合适造成的。
12.下图为植物组织培养的过程,下列说法错误的是( )
A.②试管中的细胞全能性最高
B.④试管中培育的个体都是纯合子
C.①到②不需光照
D.①到④进行的细胞分裂都是有丝分裂
解析:
选B ①、③、④试管中的细胞都是经过分化的细胞,所以全能性较低,而②中细胞是经脱分化形成的,所以相比较而言,全能性最高;④中植物是否为纯合子由①中细胞的基因型决定;①到②为脱分化形成愈伤组织的过程,不需光照。
13.(2018·铜仁月考)如图所示为胡萝卜的韧皮部细胞通过无菌操作植入试管后,在一定的条件下,形成试管苗的培育过程,请据图回答下列问题:
(1)要促进细胞分裂生长,培养基中应含有营养物质和激素,营养物质包括________和小分子有机物;激素包括细胞分裂素和________两类植物激素。
(2)此过程依据的原理是____________________。
A和B阶段主要进行的分裂方式是________,B阶段除了进行细胞分裂外,还进行细胞________等。
(3)B阶段需要光照,原因是_____________________________________________
________________________________________________________________________。
(4)试管苗的根细胞没有叶绿素,而叶的叶肉细胞具有叶绿素,这是基因________________的结果。
(5)将胡萝卜组织块接种到培养基上时,为防止细胞污染应如何操作?
________________________________________________________________________。
解析:
(1)植物组织培养使用的培养基应含有供组织细胞生长发育所需要的无机盐和小分子有机物,还需提供调节细胞发育方向的细胞分裂素和生长素等激素。
(2)植物细胞的全能性是植物组织培养的理论基础,脱分化和再分化阶段中细胞的增殖方式均为有丝分裂,再分化阶段愈伤组织细胞经有丝分裂和分化形成试管苗。
(3)再分化阶段需要光照,因为叶中叶绿素的合成需要光照条件。
(4)同一植株的所有细胞所含有的遗传信息相同,但由于基因的选择性表达,不同细胞的形态功能存在差异。
(5)酒精灯火焰旁温度较高,可有效杀死空气中的杂菌。
答案:
(1)无机盐 生长素
(2)植物细胞的全能性 有丝分裂 分化 (3)芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件 (4)选择性表达 (5)接种要在酒精灯火焰旁进行
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