PCR自测题Word格式.docx
- 文档编号:14342448
- 上传时间:2022-10-22
- 格式:DOCX
- 页数:19
- 大小:33.52KB
PCR自测题Word格式.docx
《PCR自测题Word格式.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《PCR自测题Word格式.docx(19页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
50个核苷酸D.长度任意E.以上答案均不对
2.引物设计时G+C含量在引物中一般占(c)
A.
20~40﹪B.30~60﹪C.45~55﹪D.越高越好E.含量随意
3.以下说法错误的是(e)
A
引物中的碱基组成应该尽可能的随机分布。
B
引物自身不应该存在互补序列
C
设计引物时应考虑使3‘端引物和5‘端引物具有相似的Tm值
D
引物的5‘和3’端必须和模板严格配对结合
E
引物与非特异扩增区的序列的同源性不要超过70﹪
4.下列说法正确的是()
C.
PCR反应常用的缓冲液为10-50mmol/L的Tris-HCl(室温PH8.3-8.8)
D.
10mmol/L的KCl能促进引物的退火
E.
加入的BSA有利于破坏模板的二级结构
F.
二甲基亚砜有利于保护TaqDNA酶的活性。
E.Mg2+能降低TaqDNA聚合酶的活性。
5.TaqDNA聚合酶活性需要以下哪种离子(c)
A.K+B.Na+C.Mg2+D.Ca2+E.Cl-
6.适用于DNA序列中单个碱基突变的检测的方法是:
(d)
A.筑巢PCRB.多重PCRC.锚定PCRD.LCR
7.以下哪种PCR技术广泛应用于组织胚胎学和肿瘤学的研究(a)
A.原位PCRB.差异显示PCRC.不对称PCRD.反向PCR
8.已知一段设计好的引物的序列为GTGGATCCATGGCTCCTCTGAAGATTC,其Tm值为()
A.78B.80C.82D.84E.无法计算
9.以下哪种PCR技术可以克服序列未能全知的障碍而获取目的扩增片段(c)
A.共享引物PCRB不对称PCRC锚定PCRD.筑巢PCR
10.一位疑似杜氏肌营养不良症的患者,可以采用以下哪种方法协助诊断()
A.原位PCRB.多重PCRC.不对称PCR.D.锚定PCR
11.以下关于dNTP的说法错误的是(e)
B.
dNTP具有较强的酸性,使用时应将pH调至7.0-7.5
PCR反应中,四种dNTP必须按比例配制,以减少反应的错配率。
dNTP的浓度过高会增加碱基的错配率
dNTP的浓度低,反应速度下降,但特异性提高
12.TaqDNA聚合酶可以不要模板在dsDNA的末端加上一个()碱基.
A.dGTPB.dCTPC.dATPD.dTTP
13.有关PCR的描述哪个不对(d)
A.是一种酶促反应
B.引物决定扩增的特异性
C.扩增的对象是DNA序列
A)
D.扩增的对象是氨基酸序列
14.催化PCR的酶是(c)
RNA聚合酶
DNA聚合酶
TaqDNA聚合酶
反转录酶
15.PCR产物具有特异性是因为(c)
TaqDNA酶保证了产物的特异性
合适的变性,退火,延伸温度
选择特异性的引物
引物的Tm值不同.
16.LCR的说法正确的是()
体系中采用DNA聚合酶
须设计一对引物
反应需经过变性,复性,连接
LCR中,酶将dNTP加到引物的3-OH端
LCR具有高度敏感性
三、多项选择题
1.下列关于退火温度说法正确的是()
A.合适的退火温度应低于引物Tm值5℃左右。
B.引物与模板的退火温度一般在45-55℃之间
C.在Tm值允许的范围内,选择偏低的退火温度可以提高PCR反应的特异性。
D.退火时间至少需要一分钟。
2.进行PCR实验时以下措施有助于防止污染和结果的假阳性()
隔离不同的操作区
分装试剂,减少重复取样所致的污染
严格实验操作
设立实验对照
3.适用于扩增3‘或5‘端未知序列的PCR技术是()
A.反向PCRB.锚定PCRC.多重PCRD.不对称PCR
4.以下关于PCR技术应用说法正确的是()
筑巢PCR和共享引物PCR有利于增强PCR反应的特异性,适用于模板含量极少的样品的检测
不对称PCR可以大量制备单链DNA,可用于DNA的序列测定
彩色PCR适用于基因诊断和自动化DNA序列测定
定量PCR可用于基因表达和调控的研究
F
差异显示PCR可用于筛选和克隆受发育,突变等各种因素影响下差异表达的基因
5.关于引物设计说法正确的是()
为保证PCR反应的特异性,所设计的引物长度一般>
30个核苷酸
引物设计时G+C含量在引物中一般为45~55﹪
按经验,引物自身存在的连续互补序列一般不超过3个碱基
两个引物之间不应存在互补序列,尤其避免3‘端的互补重叠
引物的3‘端可以游离而不影响PCR反应的进行
6.以下关于PCR的说法正确的是()
PCR的模板可以是DNA也可以是RNA
PCR的模板必须从组织细胞中分离出来
PCR反应的特异性取决于引物和模板DNA的结合位点。
PCR反应初期,目的DNA片断的增加呈指数扩增。
PCR反应一般需要含102-105拷贝的模板
7.以下关于PCR反应条件错误的是()
PCR缓冲液中加入二甲基亚砜有利于破坏模板的二级结构,提高反应的特异性。
Mg浓度过高会降低TaqDNA酶的活性,Mg浓度过低又会使酶催化非特异性扩增增强。
4种dNTP应以等摩尔浓度配制,以减少错配误差。
引物浓度一般为0.5-1umol/L
8.PCR反应时应设立哪种对照()
A.阴性对照
B.阳性对照
C.试剂对照
D.以上答案都正确
9.逆转录反应体系包括()
RNA模板,四种dNTP
RNA酶抑制剂
合适的缓冲液体系
逆转录酶
寡聚胸腺嘧啶核苷酸引物
10.有关PCR的模板说法正确的是()
模板可以是DNA也可以是RNA
大多数PCR反应中对DNA模板纯度要求不高
模板用量低
标本处理的基本要求是除去杂质
11.以下有关RT-PCR反应的说法你认为正确的有()
反应体系一般有20μl
反应体系中有缓冲液,四种dNTP,MgCl2,DTT,牛血清白蛋白,Oligo(dT)引物RNA模板和逆转录酶
逆转录于42℃进行,随后即进行PCR
RT-PCR的最终反应过程依然是以DNA为模板的PCR反应
12.PCR的产物累积的特征是()
反应初期,目的DNA片断呈指数扩增
PCR进行到一定时间出现反应中的停滞效应
到达平台期的的PCR循环数取决于反应体系中酶的耗竭程度
PCR平台期的出现多数不可避免
到达平台期时若扩增目的DNA片断不足,可继续加入模板,酶和缓冲液进行PCR反应
13.有关Mg2+在PCR中的作用说法不正确的是()
TaqDNA酶的活性维持需要Mg2+
TaqDNA酶的活性与反应体系中的Mg2+总浓度有关
Mg2+过低,酶催化非特异性扩增增加
Mg2+过高会降低酶的活性
总量应低于dNTP的量,常用1.5mmol/L
14.PCR中使用的底物dNTP应该是()
使用前应将pH值调至7.0-7.5
dNTP浓度高可以加快反应速度,但却增加了出错率
降低反应速度可以提高反应特异性
PCR中,4种dNTP必须按一定比例配制
Mg2+会与dNTP结合,应注意二者浓度之间的关系
15.TaqDNA酶的特点是()
75-80℃时具有最高的聚合酶活性
活性的维持需要Mg2+的参与
TaqDNA酶和klenow片断一样具有校正功能
TaqDNA酶的忠实性很高
具有类似末端转移酶的活性
16.有关引物的说法正确的是()
引物浓度一般为0.1-1.5μmol/L
引物与模板的的比至少为108:
1
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- PCR 自测