检验与临床POCT实验室应用PPT课件下载推荐.ppt

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如蛋白用化学试剂测定方法叫化学法。

如蛋白钙钙镁镁2用酶测定方法叫酶法。

如葡萄糖用酶测定方法叫酶法。

如葡萄糖谷丙转氨酶谷丙转氨酶3用抗原抗体反应原理方法叫免疫法。

用抗原抗体反应原理方法叫免疫法。

HBsAg4用原子吸收方法叫色谱法。

钾用原子吸收方法叫色谱法。

钾钠钠5用电泳分离方法叫电泳法。

蛋白电泳用电泳分离方法叫电泳法。

蛋白电泳高压液相色谱高压液相色谱6测定蛋白分子用酶联聚合反应即测定蛋白分子用酶联聚合反应即PCR方法。

方法。

DNA7生物传感器。

血气生物传感器。

血气血糖血糖二按方法敏感性分类二按方法敏感性分类1超微量法超微量法微克以下微克以下皮克皮克纳克纳克一般用一般用免疫发光法免疫发光法激素激素肿瘤标志物肿瘤标志物2微量法微量法毫克以下毫克以下微克微克一般用金标一般用金标法或胶乳法散射法法或胶乳法散射法RFCRP3常量法常量法克以下克以下毫克毫克一般用生化一般用生化法法白蛋白白蛋白甘油三脂甘油三脂根据反应产物特性分1比色常用生化测定2比浊抗原抗体测定3散射可标记乳胶4测定光强度往往标记主要反应方式1液体反应生化免疫等成本低线性宽灵敏度高2干式反应干生化免疫层析渗滤法相对灵敏度低线性窄成本高往往单人份包装标记技术分类标记技术分类1放射物质标记放射物质标记2荧光物质标记荧光物质标记3酶物质标记酶物质标记4金标记（铁金标记（铁铜铜硒）硒）5发光物标记发光物标记测定方法1决定性方法2参考方法3常规方法123的过程叫正确度传递321的过程叫溯源超微量分析（化学发光）目前按方法形式分类目前按方法形式分类1板式发光（包被在板上）板式发光（包被在板上）须洗涤和分须洗涤和分离离反应手续多反应手续多反应反应慢慢2均相发光均相发光分洗涤和无洗涤二种分洗涤和无洗涤二种简单简单和反应快和反应快发光按反应方式：

发光按反应方式：

干式反应和湿反应干式反应和湿反应仪器分：

仪器分：

全自动全自动半自动半自动化学发光发光免疫化学发光分：

免疫化学发光分：

1酶底物发光（硷性磷酸酶）贝克曼酶底物发光（硷性磷酸酶）贝克曼2直接发光（丫叮脂）直接发光（丫叮脂）西门子西门子3电发光（钌）电发光（钌）罗氏罗氏4时间分辨荧光（铕）时间分辨荧光（铕）德普德普5微粒荧光微粒荧光透景透景6无须分离直接发光无须分离直接发光博阳博阳方法学要求1精密度批内批间变异系数CV表示2正确度和目前公认结果比较偏差53稳定性好4反应快5抗干扰能力强分析仪器按反应状态分类分析仪器按反应状态分类1干式反应干式反应万孚飞测万孚飞测金标定量金标定量2湿式反应湿式反应生化仪生化仪发光仪发光仪四四按反应方便程度分类按反应方便程度分类1手工法手工法2半自动半自动3全自动全自动仪器要求1精密度好CV38C或90次/每分3呼吸频率20次/每分4白细胞12000/uL或4000/uLSIRS主要由微生物感染所引起，其他非感染如严重缺氧，烧伤、急性胰腺炎等也可以造成。

炎症诊断试验1，体温测量2，白细胞计数和分类3，血沉4，血清蛋白电泳5，CRP6，IL-6IL-8PCT在脓毒血症应用1，区分是否细菌感染，越高感染病情越重2，肺炎中应用鉴别细菌性和病毒性3，全身性真菌感染应用4，脑膜炎鉴别中应用5，新生儿感染中应用PCT监控具有高度感染的患者应用1，重危患者2，大手术后3，器官移植PCT在疗效观察中应用1，脓毒症2，多器官衰竭3，休克4，感染后手术治疗CRP1肝脏合成，结构五聚体是一种急性时相反应蛋白。

2特点：

本地很低，当受到刺激时（一般6小时）迅速升高可达1000倍。

3临床应用普遍。

CRP与PCT的应用比较CRP:

炎症过程的筛选6小时后上升2天达高峰CRP高提示病变存在。

PCT：

诊断和监测细菌性疾病感染一个参数是严重细菌性和真菌感染特异性标志。

也是脓毒症和炎症活动有关多脏器衰竭的可靠指标。

患者好转PCT比CRP反应快，而CRP有较长时间才下降。

CRP和PCT的比较相同：

都是急性时相反应蛋白CRP是临床运用特点是炎症指标，在感染性炎症和非感染性炎症，组织损伤、局部和全身的轻度中度重度的感染和各种轻中度损伤中应用。

PCT运用在严重细菌感染及脓毒血症CRP和PCT的比较PCT指标在细菌感染方面相对特异CRP指标相对特异性差在病毒感染中PCT不升高，CRP会轻中度升高，在细菌感染中CRP呈现一般中度以上升高，持续时间长，PCT只有在严重细菌感染时才会升高，治疗好转就下降。

检测项目主要临床意义临床意义：

共性有二点1，诊断和鉴别诊断2，疗效观察PCT临床意义PCT作为急性时相反应蛋白（APR）一种，一般认为在持续毒素刺激下，68小时开始升高CRP临床意义1主要用于各种损伤、感染、治疗等观察。

2超敏CRP主要用于心血管疾病。

BNP主要用于慢性心衰的评估肌钙蛋白主要用于心肌损伤及梗死PCT临床意义总结PCT只有在严重细菌、真菌、寄生虫感染及脓毒症和多脏器功能衰竭时测定才有意义。

在自身免疫、过敏和病毒感染时不升高。

因此PCT在细菌性疾病鉴别、监控细菌性感染及病程预后估计等方面有意义。

检验科发展方向临床检验发展基本要求：

围绕临床检验发展基本要求：

围绕及时及时方便方便准确方针准确方针1整个检验科全自动整个检验科全自动2POCT（即时检验）（即时检验）3系统化系统化优点优点溯源性溯源性不准确度不准确度4信息化信息化提高内涵、把握方向、持续进步提高内涵、把握方向、持续进步1做企业或公司：

诱惑多做企业或公司：

诱惑多最重要不是选择而是放弃最重要不是选择而是放弃得到空间更大得到空间更大坚信基本判断坚信基本判断项目项目找对找对成功一大半成功一大半2生存法则：

守住底线、创造空间生存法则：

守住底线、创造空间3确定方向：

想做什么？

能做什么？

确定方向：

4市场要什么：

不是你有我有。

而是排他性即唯市场要什么：

而是排他性即唯一性一性5社会需要什么：

可靠、放心、方便、环保社会需要什么：

可靠、放心、方便、环保最好创造新产业最好创造新产业目前市场上哪些品牌可以真正实现一步法加样？

PCT/心标等：

明德、乐普、基蛋（金标半定量）CRP：

迪倍思（金标半定量，加样后需补加缓冲液），其他品牌均需要加样前稀释/预处理国赛CRP-散射比浊法操作步骤：

禾柏CRP-散射比浊法艾克美CRP-荧光免疫法奥普CRP-金标法凯创CRP-金标法热景CRP-上转发光法检验科需要项目和方法检测简单方便检测快速，成本低，高的特异性和敏感性能够反映疾病的严重程度早期准确诊断反映预后和治疗的疗效全自动信息化荧光免疫法干式（POCT）国内代表万孚特点：

专一激发光及双抗体保证高特异性；

信号级联放大保证高灵敏度p光路特异（专一激发光和吸收光），吸收光背景干净，光信号特异性高p荧光微球共价标记：

偶联效率高，级联放大荧光信号，灵敏度高，量程大p夹心法：

免疫反应特异性较高常见免疫学检测方法方法学/免疫学标记物检测方法代表厂家举例POCT荧光定量荧光免疫层析双抗体夹心法异硫氰酸荧光素荧光强度万孚、艾克美时间分辨免疫层析双抗体夹心法镧系元素时间分辨测量荧光雷度微流控双抗体夹心法荧光素荧光强度博适、微点比浊法抗原抗体一步法/orion、国赛、禾柏金标法双抗体夹心法胶体金胶体金颗粒颜色奥普、凯创、瑞莱上转发光双抗体夹心法UCP（稀土颗粒）发光强度热景非POCT化学发光双抗体夹心法化学发光剂发光强度罗氏、新产业酶联免疫双抗体夹心法碱性磷酸酶底物显色梅里埃总结检验主要检测有方法检验趋势POCT检验方法类型及要求检验的临床意义谢谢