大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展任欢欢.docx
- 文档编号:27929097
- 上传时间:2023-07-06
- 格式:DOCX
- 页数:11
- 大小:27.01KB
大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展任欢欢.docx
《大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展任欢欢.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展任欢欢.docx(11页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展任欢欢
脑缺血再灌注模型的建立方法及其评价
姓名:
任欢欢
学院:
药学
学号:
2013110023
大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展
任欢欢药学院药理学2013110023
摘要:
脑缺血再灌注模型是研究缺血性脑血管疾病病理生理学机制和防治措施不可缺少的工具,以往多采用大鼠作为研究对象。
而近年来,由于小鼠体重差异小,模型成功率较高,且接近于人类脑供血不足或脑梗塞再灌时脑组织病理生理演变过程,故学者们纷纷采用小鼠制作脑缺血再灌注模型。
本文将主要针对线栓法制备大鼠脑缺血模型进行综述。
关键词:
大鼠脑缺血再灌注损伤
缺血所引的组织损伤是致死性疾病的主要原因,诸如冠动脉硬化导致的心肌梗死、脑卒中等。
在缺血性疾病抢救和治疗过程中,医学家们渐渐发现,对组织造成损伤的主要因素,不是缺血本身,而是恢复血液供应后,过量的自由基攻击这部分重新获得血液供应的组织内的细胞造成的,这种损伤,叫做“组织缺血再灌注损伤”。
有许多证据说明仅仅缺血还不足以导致组织损伤,而是在缺血一段时间后又突然恢复供血(即再灌注)时才出现损伤。
在创伤性休克、外科手术、器官移植、烧伤、冻伤和血栓等血液循环障碍时,都会出现缺血后再灌注损伤。
缺血组织再灌注时造成的微血管和实质器官的损伤主要是由活性氧自由基引起的,这已在多种器官中得到的证明。
在缺血组织中具有清除自由基的抗氧化酶类合成能力发生障碍,从而加剧了自由基对缺血后再灌注组织的损伤。
使用SOD清除自由基对缺血再灌流组织损伤有保护作用。
1全脑缺血再灌注损伤动物模型的建立方法[1-2]
1.1双侧颈总动脉阻断法
该方法通过阻断双侧颈总动脉一定时间后再恢复血流,造成全脑脑缺血再灌注损伤。
优点是非常简便易行。
但是,由于常用实验动物中除沙土鼠外均有比较完整的大脑动脉环(Willis环),且沙土鼠也只有大约20%~30%的动物大脑Willis环发育不全。
所以,单纯阻断双侧颈总动脉难以造成完全脑缺血。
因而,该方法所导致的脑缺血再灌注损伤成功率低,使用范围有限,一般只用于沙土鼠脑缺血再灌注损伤模型的制备。
1.2双侧颈总动脉阻断合并循环降压法
采用夹闭家兔双侧颈总动脉合并股动脉(兔子、猫、狗等体型较大的实验动物)或眼眶后静脉丛(小鼠)快速放血,造成急性脑缺血模型。
脑电图、生化指标和形态学检测显示,这种模型脑缺血效果明显。
但是,该模型不易进行再灌注观察。
有作者采用双侧颈总动脉阻断合并控制性药物(硝普钠等)降压法,制造急性脑缺血模型。
缺血一定时间后可恢复血液灌流,用于脑缺血再灌注损伤观察。
由于全身低血压可造成心、肾和其他重要器官的损害,导致模型复杂化。
1.3体循环控制性降压复合颅内注液增压法
李成辉等通过给狗快速滴注0.02%硝普钠溶液,使其平均动脉压(MAP)于2~3min内降至6.65kPa;之后向小脑延髓池快速注入脑脊液近似溶液,使颅内压(ICP)于5s内升高至13.3kPa。
这样由于降低MAP而使脑灌注压下降,同时升高颅内压使脑灌流阻力增大,导致脑血流阻断,造成脑缺血。
维持MAP及ICP于上述水平一定时间后,颅内减压使ICP降至正常水平,即可恢复血液灌流。
经组织学、生理学、生物化学及放射性同位素等多项技术检测,证明应用体循环降压结合颅内增压技术制造的脑缺血再灌注损伤模型,具有缺血效果可靠、并发症少等优点,可用作脑复苏的实验研究。
但该模型不适用于大鼠等小动物,并且也具有因全身性低血压导致其它脏器损伤,而使模型复杂化的缺点。
1.4四血管阻断法[3,4]
Pulsinelli等于1979年首先报道了采用电凝固大鼠双侧椎动脉合并结扎双侧颈总动脉,一定时间后再解除两侧颈总动脉结扎进行再灌注,从而造成严重大脑缺血再灌注损伤这种具有高度可重复性的全脑缺血造模方法。
李麟仙等在此基础上加以改进,采用直视下分离家兔两侧颈总动脉和椎动脉、夹闭四动脉造成脑缺血。
该方法简便易行,是研究脑缺血再灌注损伤比较常用的动物模型。
但由于椎动脉与脊髓前动脉间有交通支,并且动物不同种属和不同个体之间差异较大,模型的成功率较低,稳定性亦较差。
1.5三血管阻断法
Kamegama等通过电灼断基底动脉、同时夹闭两侧颈总动脉的方法复制全脑缺血模型,由于该方法不仅阻断了脑供血主干血管,而且也阻断了从脊前动脉来的侧支血管,与前述四血管阻断模型比较,脑缺血成功率高且无需再筛选是其主要优点。
田鹤屯阝等在此基础上又加以改进,不用显微镜而在直视下进行手术,用特制的动脉夹夹闭基底动脉而不用电灼断的方法。
缺血一定时间后可去除夹闭进行彻底再灌注,也避免了灼断基底动脉导致的动脉损伤、出血之弊,造成的缺血和再灌流效果迅速、稳定性好。
使用过程中全身动脉血压一直稳定在生理范围内,从而避免了由全身动脉压降低引起再灌流时脑血流灌注压不足是其又一个比较突出的优点。
1.6六动脉阻断法
在四血管阻断法造模的基础上加以改进,将传统的双侧颈总动脉阻断改为双侧颈内动脉和颈外动脉阻断再加双侧椎动脉阻断。
该方法由于颈动脉阻断的部位是在颈动脉窦的远心端,使颈动脉窦区能维持一定的压力。
这就避免了传统的四血管法阻断双侧颈总动脉,因双侧颈动脉窦区压力同时骤降,导致全身血压反射性升高,引起脑侧支循环开放增加和脑血流增加,进而使脑缺血程度减轻等弊端。
但该方法手术过程比较复杂、难度较大。
1.7颈动脉分流法
采用结扎左侧颈总动脉、同时从右侧颈总动脉远心端放血,使大脑由两侧颈总动脉来的血供停止,制造全脑缺血模型。
此时虽然两侧椎动脉的血流仍能通过基底动脉流向大脑Willis环,但由于从右侧颈总动脉远心端进行放血,引起该侧颈总动脉、颈内动脉和后交通动脉压力显著降低。
因而,当基底动脉的血流进入后交通动脉后,并不向前灌注大脑,而是逆行经颈内动脉的颈总动脉流出,导致大脑缺血。
从颈总动脉放出的血液又经同侧股静脉输入体内。
整个过程中可有效地控制血液流量和速度。
该模型的优点在于不影响基底动脉和椎动脉的血流量,脑干缺血不明显,对呼吸、循环等基本生命活动的影响较小。
再灌流时,停止右颈总动脉放血,使右颈总动脉、颈内动脉和后交通动脉的低压消失,由基底动脉来的血流能够进入Willis环;同时解除左侧颈总动脉结扎,恢复其血液灌流。
这样,大脑便有了足够的血液灌注,即再灌流充分是其又一特点。
但对于这种造模方法所导致的脑缺血范围尚有争议。
有研究显示,这种缺血主要是右侧大脑中动脉供应的脑区缺血。
造成这一差异的原因可能与放血速度、颈内动脉压力降低程度不同等有关。
1.8颈动脉负压分流法
实验大鼠以戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔麻醉。
从左股静脉注入肝素(180U)后缓慢注入生理盐水,夹闭两侧颈总动脉,从右颈外动脉持续抽吸颈总动脉内血液(0.3ml/min),此为脑缺血开始;同时,自左股静脉持续回输血液,全脑缺血20min后停止抽血,向颈动脉内注入1ml生理盐水,结扎颈外动脉,松开两侧颈总动脉,此为再灌注开始。
2局灶性脑缺血再灌注损伤造模方法
建立大脑局灶性缺血与再灌注损伤动物模型,是研究缺血性中风的病理生理机制及其防止的重要手段之一。
大脑中动脉(MCA)是人类脑梗塞的血管病变多发部位。
由于大鼠脑血管解剖接近人类,血管性损伤恒定,重复性好等优点。
因而大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型是比较公认的研究脑缺血损伤的标准动物模型。
对于局灶性脑缺血模型的制备,目前比较常用的有开颅法、插线法、光化学诱导法和栓塞法等造成大鼠MCA血流阻断与再通,从而导致其相应灌流区域局灶性脑缺血再灌注损伤。
2.1开颅法
多数研究选择颞下部开颅,通过电凝或丝线结扎横过嗅束外缘或内缘处的MCA,造成脑梗塞。
Kader等对电凝闭塞MCA方法加以改进,闭塞MCA所有可见分支,梗塞效果更好。
开颅法MCAO模型缺血效果可靠,是迄今应用最广泛的经典局灶性脑缺血模型。
但开颅创伤大,脑脊液外漏,易感染,改变了脑微环境,手术难度较大和MCA闭塞后无法观察再灌注损伤效应。
虽然有作者通过用微型动脉夹夹闭或通过穿线抬起MCA造成短暂脑缺血,然后使血流再通制作再灌注模型,但也只限于短时间MCAO后再灌注损伤的研究,技术上尚待进一步改进。
2.2插线法
2.2.1Kuizumi于1986年首次报道了尼龙线插线法制作的可逆性MCAO模型,解决了局灶性脑缺血再灌注损伤研究的难题。
该模型的制备方法是将动物麻醉后仰卧固定于手术台上,采用颈部正中切口或选择右侧颈部切口,分离一侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉。
结扎颈总动脉、颈外动脉及其分支动脉。
分离颈内动脉至鼓泡处可见其颅外分支翼腭动脉,穿线沿起点结扎分支。
在颈外动脉剪一小口,将制备好的尼龙线插入颈外动脉经颈总动脉分叉处进入颈内动脉,通过MCA起始端至大脑前动脉近端(插入深度平均约18.5±0.5mm)。
再灌注时外拉此尼龙线使其球端回至颈外动脉内,即可恢复MCA血供进行再灌注。
若手术选择颈部旁侧手术入路,可使手术视野暴露更好,便于血管分离;并且较颈部正中切口对气管刺激小,无需再行气管造瘘,使手术相对较简单。
病理检查结果显示,造模动物均存在缺血侧尾壳核及背外侧皮层梗塞,病变一致、稳定性好,缺血效果可靠。
尤其适用于基底节缺血再灌注的病理生理机制的研究和药物治疗效果与机制的观察。
此外,无需开颅、创伤小,栓线闭塞MCA后不引起血压、血气和体温的异常变化,不影响缺血后脑水肿和颅内压病理变化的自然过程等优点,均优于开颅闭塞MCA法建立的局灶性脑缺血模型。
2.2.2ZeaLonga线栓法
该模型的制备方法是将动物麻醉后,颈后正中切开,电烧双侧椎动脉局阻断后循环;前正中切开,暴露左侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)和颈内动脉(ECA),以微血管夹将CCA夹闭,将单股尼龙线(4-0)插入ICA远端,大脑中动脉起始部阻断血流。
平均进线长度为(2±0.2)cm。
2.2.2.1实验动物的选择[5]
作脑缺血模型选用的实验动物有:
小鼠、大鼠、蒙古沙土鼠、猫、狗、猪、羊以及灵长类动物猕猴等。
大鼠具有种系内纯性好、同系大鼠间遗传差异小、有超强的抗感染能力和生命力、成本低等优点,而且它的基因与人类的基因有98%的同源性,神经系统发达,其脑血管结构与人类非常相似,血管闭塞后缺血范围恒定、重复性好,所以目前被广泛使用。
在几种鼠种之间,Markraf等研究发现,Fischer-334大鼠的模型效果最为理想,但因鼠源问题,目前多选用性情温和、生长快、价格便宜的SD大鼠。
另外,虽然脑卒中多发生在中老年人群,但是在模拟人类脑血管疾病的发病过程中,专家建议不宜盲目选用老年大鼠制备该模型,除非特别需求,鼠龄选择上仍以250~350g的青年健壮为宜,超过该范围的大鼠则不宜选用该模型或需要建立新的实验方法及标准。
麻醉剂的正确使用可以在同样的手术时间内最大限度地减少对动物生理状态的影响,并可以减少不必要的时间浪费,是实验成功的重要因素。
卜碧淘用Wistar-Kyoto大鼠对常用的几种麻醉剂进行实验,结果表明戊巴比妥钠腹腔注射对大鼠的生理状况影响最小,仅有轻度降温作用,对大鼠的生理指标(呼吸、肛温、脑温、心电图、动脉血压及血气等)影响最小,故在脑缺血再灌注损伤模型制备的麻醉中,用2%戊巴比妥钠45mg/kg进行大鼠腹腔麻醉效果好。
但是戊巴比妥钠的水溶液不稳定易分解,分解后的溶液毒性较大,因此最好现用现配,或者将配置好的麻药放在冰箱中冷冻保存。
2.2.2.2实验线栓制备[6,7]
对线栓头端的处理是为了让阻断更加彻底、可靠,同时减少对血管壁的机械性损伤。
张成英等报告栓线头端球体直径以0.2mm比较适宜,但在实际操作中不易测量。
线栓法的倡导者Koizumi和ZeaLonga均采用4~0单股尼龙线,但依其线栓前端的加工方式不同,从而衍生出两大流派。
Koizumi流派的主要特点是在尼龙线前端的表面覆盖各种化学材料,如硅树脂、多聚赖氨酸等;ZeaLonga流派制作线栓比较简单,就在线栓前端加热烫成一光滑而膨大的球形。
Holland认为涂过硅树脂的线头在试验中会存在一些负面影响,如易造成颅内蛛网膜下腔出血(SAH)或尼龙线卡在颈内动脉而难以推进、存在缺血实验偏差。
王耀明等采用固体石蜡经加热熔化后处理线栓,具有很好的一致性,制作非常简便。
Laing等研究认为,覆以硅胶的栓线较头端教烧成光滑圆球的栓线柔软度好,栓塞成功率高,重复性好。
Zarow等在对比研究中发现:
用硅胶涂层的尼龙线比用同样规格的不涂硅胶尼龙线产生的脑梗死体积更稳定,更有利于缺血后再灌注研究。
近年来一些学者将Longa方法进行改进,将4~0的尼龙线烧成小的圆头,浸入0.1%多聚赖氨酸溶液中,然后取出放在60e条件下烤箱中干燥备用,结果全部成功阻塞,出现一致梗死。
目前尽管对线栓头端的处理方法很多,但还没有一种最为标准理想的方法,需要进一步研究探讨。
2.2.2.3实验动物手术[8]
术前24h禁食、不禁水。
参照Longa等和罗勇等报道的方法,采用经颈内动脉线栓法制备大鼠右侧MCAO致局灶性永久性脑缺血模型。
35g/L水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠,仰卧位固定,颈前区备皮、消毒.取颈正中切口逐层切开皮肤及皮下组织,分离胸锁乳突肌,切断二腹肌前腹,暴露右侧颈总动脉(commoncarotidartery,CCA),颈内动脉(internalcarotidartery,ICA)和颈外动脉(externalcarotidartery,ECA),探查颈外动脉在颈部发出第一分支(甲状颈干)处,在其远心端(偏嘴侧)约0.2cm处结扎并切断ECA,确保ECA残端长度不短于0.5cm;游离、凝闭并切断ECA与ICA之间的交通支.用蛙心夹暂时阻断CCA及ICA血流,用11号手术尖刀于ECA残端作一纵行小切口,将线栓从右侧ECA残端插入ICA;轻轻牵拉ECA残端,使其与ICA成一条直线,调整线栓角度,使改良线栓弧度水平向外,与颈前正中线呈45b水平向外的夹角,移去夹闭ICA的蛙心夹,轻轻将线栓送入颅内.从CCA分叉处送入ICA约1.9~2.1cm时通常可遇阻力,且大鼠呼吸、心跳突然加快,部分大鼠尿失禁,借此可作为大脑中动脉起始处栓塞成功的标志.若不能顺利将线栓送入颅内,可再度调整线栓与ICA的角度,或再夹闭ICA更换线栓;若线栓插入过程中,线栓进入血管内的长度小于1.5cm即遇阻力(通常为1cm左右),同时大鼠出现轻微的右侧面肌抽动,提示线栓误入翼腭动脉(pterygopalatineartery,PPA),须拔线栓至ECA残端,再度调整线栓角度,重新插入.栓塞成功后,用丝线结扎ECA残端,移去夹闭CCA的蛙心夹,观察无活动性出血后关闭切口。
3模型评价的指标[9]
3.1大鼠症状及体征的评价
参照Bederson等、Zeallonga等的五级4分评分方法并改进。
0分:
未见神经病学征象,即无神经功能缺损症状,大鼠被提尾悬空时两前肢向地面伸直,置动物于软塑料板上,轻握鼠尾,在鼠肩后施加侧向推力使鼠滑动约10cm,手感左右推动的阻力相等。
1分:
轻微的神经功能缺损,大鼠被提尾悬空时病灶对侧前肢呈屈曲、抬高、肩内收、肘关节伸直。
置动物于软塑料板上,轻握鼠尾,在鼠肩后施加侧向推力使鼠滑动约10cm,手感左右推动的阻力相等。
2分:
中度局灶性神经功能缺损,有向瘫痪侧旋转征象,大鼠被提尾悬空时脑缺血对侧前肢呈屈曲、抬高、肩内收、肘关节伸直。
置动物于软塑料板上,轻握鼠尾,在鼠肩后施加侧向推力使鼠滑动约10cm,手感左右推动的阻力不等,病灶对侧的侧向推动阻力明显减低。
3分:
重度局灶性神经功能缺损,有向病灶对侧跌倒征象。
4分:
无自发活动及意识水平下降。
3.2脑电图特征
分别在大鼠冠状缝前相当于皮层感觉运动区(额顶区)部位和顶叶后部(顶枕区)的左右两侧对称地放置脑电极各一个,电极尖端穿过颅骨接触硬脑膜,用牙科黏合剂固定,参考电极安置在鼻骨正中,八道生理记录仪记录。
可以反映阻断侧大脑中动脉供血区、非供血区以及对侧相应部位的脑电变化。
若应用脑电图仪,可放置更多的电极,能更准确地反映脑缺血的范围以及程度。
缺血区脑电图出现波幅降低,频率减。
3.3软脑膜微循环观察
可直接观察软脑膜微循环血液的灌流状况,结合专用的微循环图像处理系统,直接测量微血管的管径及血流速度。
一般先在大鼠的颞顶部制作一颅窗,再进行观察。
颅窗制作方法如下,脑立体定位仪固定头部,在一侧顶骨中央钻开一颅窗。
用骨蜡及电热烧灼器彻底止血,无菌生理盐水冲洗,待无任何出血点后,方可剪开硬脑膜。
剪开硬脑膜之前,将1mm厚的玻片制成颅窗的大小及形状备用。
将硬脑膜轻轻挑起,眼科剪小心剪开硬脑膜,此时即有脑脊液流出,迅速将颅窗处硬脑膜剪去,出血处可用血管钳钳夹止血。
之后迅速将玻片覆盖于颅窗上,并避免出现气泡。
牙科黏合剂封闭周围间隙,待变硬后,用手术刀将多余的部分切去。
观察玻片周围是否有脑脊液渗出以及颅窗内是否有出血渗出。
若颅窗周围无渗出,颅窗内无气泡及出血,脑血管无异常出现即表示颅窗制作成功。
颅窗制备完成后,将实验动物置于微循环观测仪下,可观察到清晰的软脑膜微血管图像。
找到易于观察微动脉及微静脉管径符合观察要求的部位,通过摄像、录像或照相记录实验过程的微循环变化。
连接计算机微循环图像处理系统,可较准确地测量微循环的各项指标。
也可应用激光多普勒微循环血流分析仪,可将激光探头固定于颅窗上,只要保证激光探头在整个实验过程中无位置移动及转动,即可准确地测定该部位的微循环血流量。
3.4微透析结合高效液相色谱观测
应用微透析仪可在活体状态下,将动物置于立体定向仪上,在前囟右侧、前侧各1.5mm处插入微透析探针,深度3.5mm(或感兴趣局域)。
用灌流液灌流,速度2LL/min,基础灌流60min后收集微透析液。
与高效液相色谱或毛细血管电泳仪连用,动态观测脑组织神经递质、神经内分泌激素等活性物质的动态变化。
3.5脑毛细血管通透性的评价
大鼠尾静脉注射1%依文斯蓝(50mg/kg)之后结扎大鼠双侧颈总动脉。
结扎后3h,断头取脑。
然后将脑放入盛有5mL甲酸胺溶液试管中浸泡,并置于45摄氏度恒温箱中温育72h。
取出后用7220或721分光光度计620nm进行浸出液比色,测定光密度(A值)。
再以标准曲线查出5mL甲酸液中依文斯蓝含量,继而计算出单位脑重的依文斯蓝含量。
以此评价毛细血管通透性。
3.6脑组织含水量测定
用以观察脑缺血损伤后脑组织水肿情况。
一般在缺血模型复制后24h,快速剥出鼠脑,将左右大脑半球分别称重,然后置90~100e烤箱内烤干至恒重(5d后两次检查)。
分别称量大脑半球干重,按以下公式计算大脑半球的含水量。
3.7脑组织内神经递质、血管活性物质及其他生物活性物质的测定
取脑组织称重,以pH7.0PBS缓冲液制成匀浆,3000r/min离心30min,取上清液采用相应的方法,检测各项指标。
如测定NO-2和(或)NO-3、SOD、MDA等。
3.8组织形态学观察
动物断头取脑,去掉嗅球、小脑和低位脑干,剩余部分冠状切成5片,迅速将脑片置于TTC(2,4,5-三苯基四氮唑)染液中(每5mL染液中含4%TTC1.5mL,1MK2HPO40.1mL,其余加蒸馏水定容),37摄氏度避光温孵30min,取出后置于10%甲醛中避光保存24h,经染色后非缺血区为玫瑰红色,梗塞区为白色。
将白色组织仔细挖下称重,以梗塞组织重量占全脑重量及患侧脑重量的百分比作为脑梗塞范围(%)。
也可以对脑片染色并进行计算机图像分析,观察大鼠脑梗塞灶的范围。
另外,可采用光学显微镜、电子显微镜研究镜下的组织细胞形态学改变;应用免疫组化检测脑内基因产物等重要功能蛋白的含量;采用原位PCR结合原位杂交,可观察基因的表达。
3.9方法改进以及思考[10]
应尽量避免栓线插入翼腭A大鼠仰卧时,ICA从CCA分出后下行(向背侧)约5mm又分为两支A,即走向乳突泡(Mastoidbulla)的翼腭A和进入颅内的ICA的延伸部分。
因为翼腭A的走向几乎和分支前的ICA走向相同,而ICA的延伸部分则是改向头侧走行,所以插线时会很自然的进入翼腭A,需反复拔插几次,碰巧后才能进入颅内,非常痛苦。
最初我干脆将翼腭A也分离,然后夹闭或结扎翼腭A的起始部,结果是手术很难操作,效果也不理想。
后来又改用另一方法,即在栓线将要插入翼腭A前,用镊子将ICA轻轻往头侧推一下,使ICA和其延长的分支成一直线,同时顺势插线,可很容易的进入颅内。
随着经验值的增加,发现完全可以通过改进栓线形状达到目的,即使栓线有一定程度的弯曲,插线时只要保证栓线向屋顶方向弯曲,闭着眼睛也能将线插如颅内,决不会进入翼腭A。
另外,做好术后护理工作也极为重要。
术后保温术后动物尚未清醒时,必要的保温措施可减少死亡率。
可用60W的白炽灯距离大鼠50cm高度持续照射,待清醒后再撤除。
过夜应将室温稳定在25℃左右为宜。
低温低代谢状态对脑缺血有保护作用,而温度过高会加重脑缺血损伤,甚至导致动物死亡。
再灌注拔线速度拔线过快,会导致蛛网膜下腔出血甚至拉断血管,导致动物死亡。
现今有关脑缺血的基础与临床研究均取得了显著成效。
作为普及面广,操作相对简便的动物模型,线栓法也在不断的实践中得到验证和改进。
但由于影响因素较多,如何规范和优化手术操作,降低死亡率,使模型梗塞体积恒定,更能模拟人类发病机理,仍是亟待解决的问题。
主要参考文献
[1]武钊,刘佩仪,文锐玲,林梓豪,黎允诗,黄伟青,欧阳斌.建立全脑缺血再灌注动物模型的实验研究进展[J].临床医药践,2011,09:
687-690.
[2张綦慧,张允岭,陈志刚,郭蓉娟,孟繁兴,林参,王乐,金香兰.脑缺血动物模型研究进展[J].辽宁中医杂志,2010,08:
1618-1620.
[3]李文东,姜洪波,连晓清,刘晓丽,杜爱林.Pulsinelli四血管法大鼠全脑缺血模型制作方法的改进[J].新乡医学院学报,2010,03:
237-239.
[4]李兵,章翔,蒋晓帆,王彦刚,曹卫东.改良四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血模型[J].中华神经外科疾病研究杂志,2005,02:
110-113.
[5]田莹,余化霖.线栓法大鼠局灶性脑缺血模型制作要点及进展[J].齐齐哈尔医学院学报,2011,02:
256-258.
[6]徐佳,葛林宝,陈汉平,等.大鼠栓线法MCAO模型中栓线插入深度的研究[J].上海实验动物科学,2002,4:
209-212
[7]张成英,姚家庆,田鹤村,等.大鼠脑动脉环的解剖学观察[J].解剖学杂志,1996,19(6):
506-508
[8]朱继,万东,唐文渊.改良线栓法制备大鼠局灶脑缺血模型[J].第四军医大学学报,2008,08:
685-687.
[9]吴国泰,王瑞琼,曾立斌,夏仁福,任远.大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型的制作规范与评价[J].甘肃中医学院学报,2006,06:
46-50.
[10]陈小睿,孟宪丽,孟保华,李佳川.线栓法致大鼠局灶脑缺血模型的评价及思考[J].时珍国医国药,2009,02:
424-425-427
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 大鼠 局灶性脑 缺血 模型 制作 要点 进展 任欢欢